分子生物学概括大全11篇
时间：2024-01-27 16:21:57绪论：写作既是个人情感的抒发，也是对学术真理的探索，欢迎阅读由发表云整理的11篇分子生物学概括范文，希望它们能为您的写作提供参考和启发。
篇（1）
课程内容的优化分子生物学是从生物化学分化延伸出来的一门独立的学科，一些内容和生物化学有较多的联系或重叠。但是分子生物学有自身的学科特点，突出对生命现象分子本质的解析。由于本校生物专业的“分子生物学”课程是在“生物化学”之后开设的，在课程教学中，任课教师通过讨论，对教学内容进行了分析，确定了两门课的侧重内容，在注意系统性的前提下，着重讲解教材的重点与难点，例如：在“生物化学”中已经有较大的篇幅讲述生物大分子的结构，在“分子生物学”课程中将略讲，教师在讲解复制、转录和翻译等过程分子机制时，以温故知新的方式，将基础知识和基本概念进行要点概括，借此为下一步的教学做铺垫，并检测学生的背景知识掌握情况，这种教学方法不仅得到了学生的广泛好评，而且使学科特点在教学中更加突出，专业课教学学时分配更加合理，起到了引导学生关注专业基础知识关联性的作用。
课程设置的调整鉴于本校生物专业学生普遍有考研的需求，学生对“分子生物学”的教学要求高，希望能更贴近考研的要求，所以在2010年的培养方案中，分子生物学采取了分级、分段开设的方法，在大三面向所有专业开设的“分子生物学”，教学重点放在系统性和基础性上；在大四以选修课的形式开设的“高级分子生物学”，旨在通过教学促进学生提高专业基础理论的综合能力，在学科的深度和广度上做进一步的扩展，不仅补充了最新的国内外分子生物学前沿和热点内容，而且选择一些重点科研院所的考研真题进行剖析，引导学生完成拓展和提高。调查显示，学生普遍赞同这一课程改革方式。
课程实践环节与理论环节的有效衔接
实践教学是“分子生物学”课程的重要部分，但是由于条件所限，目前本校生物专业的“分子生物学”课程仅开设了理论课，实验课尚未开设。为解决这一问题，在理论教学中通过对教学内容的分析，尽最大可能的将基础理论的讲授和分子生物学基础实验相结合，坚持既要使教学沿着课程的主线进行，又要努力使实验技术的介绍与理论课教学合理的衔接的原则，一定程度上弥补了实验教学的不足，旨在通过课堂教学，使理论和实验教学融为一个有机的整体，一些代表性的分子生物学技术的原理和方法按照表1所示的安排在基础理论部分的讲解中进行了介绍。作为任课教师，要使课堂教学精彩，还应深入科研第一线，这样才能利用科研和生产实践中的例子丰富课堂教学内容。[1]尤其是分子生物学这样更新快的学科，教师必须了解和准确把握学科发展方向和前沿热点，将自身科研实践中的经验、体会和感悟传递给学生，激发学生的对科学研究的热情，调动学生学习积极性。值得注意的是，专业课教学要充分发挥学生在学习过程中的主体作用，努力提高他们的分析能力、综合能力和创新能力，引导学生将理论知识和实验技术内容有效的融合，在教学中采用了一些方法来激发学生的学习兴趣和主动性，例如：每节课之后有要点回顾和知识链接提示，留给学生较为宽松的时间进行复习和延伸学习；设置一些与本节课内容有关的基础题、提高题、实验分析题，安排学生课下自行选择完成，以便学生检测学习掌握的情况，及时将知识梳理归纳，增加了学习过程的开放性和自主性。
教学模式的探索和实践
篇（2）
中图分类号：G642.41 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2015）07-0189-02
分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。随着分子生物学新理论和技术的大量出现，其应用已渗透到生命科学的各个领域，不再是神秘、难以操作的实验技术，而成为生命科学相关教学和科研过程中的一项基础技术。例如，许多本科课程教学中以及毕业论文实验过程中都涉及分子生物学技术，同时，工业上进行菌株选育工作，也多采用了分子生物学技术，并已形成了一种发展趋势。因此，开设本科分子生物学实验课程，让学生掌握基础分子生物学操作，培养学生分析问题和解决实际问题的能力，可促使学生在毕业论文环节快速开展实验并获得结果，对于完成本科阶段学习具有重要作用，也为学生在毕业后快速投入和开展有关的科研和实际生产工作打下坚实的基础。
工科院校的培养目标就是为社会和工程应用培养工程师，培养具有坚实的基础知识和较强应用能力的人才。针对这一培养目标并结合发酵工程学科专业特色，在实际教学中不但要让学生充分理解实验的原理，对其实验操作的技术能力也提出较高的要求，同时还需要培养学生分析和解决实际应用问题的能力，以应用于未来科研和生产工作中。本文结合实际教学经历，浅谈对工科学校分子生物学实验课教学改革的探索。
一、改进教学组织方式，提高教学效率
（一）培养学生自学能力，提高课堂效率
在以往的实验课上，学生等、靠、要的思想严重泛滥，一切都等着老师传授，一旦离开老师就不知所措，不能形成良好的自学能力。针对这一问题，并根据分子生物学实验的特点，我们将实验集中安排在一段时间内完成。制定了详细的时间表，并注明每天实验的操作内容，让学生充分了解每节课要进行的内容，形成连贯的思路。同时，将详细的讲义提前发给学生，督促学生进行充分的预习，查阅有关文献资料，了解最新研究进展。在课堂上通过提问和分析式的讲解让学生理解每步操作的原理和目的。这样可激发学生的研究兴趣，不仅知道应该怎样去操作实验，还可以达到知其所以然的目的。对于不理解的知识，也可以在课堂上询问老师，问题的解决可以激发学生的兴趣，变被动学习为主动学习，形成良性循环，这不仅可提高课堂效率，还有助于培养学生形成良好的学习习惯。在课程完成后，有兴趣的同学还可在课余时间加入研究室的课题研究中，巩固实验操作能力，让抽象的理论变为可见的事物，培养学生的科研精神，丰富学生的课余生活，尤其是对于参加各种本科生科技竞赛活动的同学有极大的帮助，同时也可辅助研究生的研究，减轻研究生的工作负担。
（二）对必要操作进行演示
由于多数同学完全没有接触过分子生物学实验，实验的操作步骤又较为烦琐，难免操作失误，使后续实验受阻。而上课的时间有限，几乎没有重复操作的可能性。因此，需要对必要的操作步骤进行演示，让学生由抽象的想象转变为具体认识，减少了学生实验操作出错的概率。
（三）尽量增加每位同学的操作机会
由于分子生物学实验试剂通常较昂贵，以往实验常以小组为单位进行，不能充分锻炼学生的动手能力，也为那些有偷懒思想的同学提供了置身于实验之外的机会。我们在实验条件容许的情况下，尽量增加每个同学的动手机会，将以小组为单位进行的实验改为每人一次的实验。例如，让每个同学都进行PCR操作，并亲自将自己扩增的PCR产物加入琼脂糖凝胶中，使他们能够充分体会到分子生物学实验操作是微量的，需要准、稳。然后，从琼脂糖凝胶电泳中确定扩增出目的DN段的PCR样品，用以进行下一步实验。这样，不但可以提高同学参与实验的热情和兴趣，而且可以避免以小组为单位实验时操作失败导致后续实验受影响的现象。
二、改进课堂讲授方式，培养工科学生分析和解决问题能力
（一）培养学生分析和解决实际问题的能力
分子生物学是一项精巧的技术，其发展速度快，大量新技术不断涌现，而课堂上时间有限，仅能实践学习一些基础的分子生物学实验技术。在这有限的过程中，让学生形成分析问题和解决问题的能力，以应用于未来的科研或者生产过程中，这对于学生的发展更有长足发展意义。分子生物学实验操作需要“心灵手巧”。“心灵手巧”则可一次操作成功，否则多次重复操作仍不能获得理想结果。所谓“心灵”是指学生需要充分理解实验原理，掌握操作注意事项。例如，让学生懂得分子生物学操作要注意避免环境以及人所携带的酶类对操作对象（如DNA、RNA）的降解作用；同时，实验过程中用到的试剂极为微量，多一点、少一点可能就导致成倍数的误差。这不仅可避免他们课堂上实验的失败，在未来进行其他实验时还可以事先设想出操作的注意事项，形成分析问题的习惯和能力。即使在不能获得理想实验结果时，引导其分析实验操作过程失误的原因，提出改进的办法，可培养他们独立思考和解决问题的能力。这正可达到“授人以鱼，不如授人以渔”的效果。所谓“手巧”则要求学生有较高的动手能力。我们将操作要领总结成口诀的形式，并对口诀进行详细的解释。例如，在进行感受态细胞制备的实验中，用“冷”、“轻”两个字概括其操作的要领，也就是所有操作尽量在冰上进行，并轻柔操作防止这种处于脆弱状态的细胞破碎，以充分保证细胞的活性。这样既容易让学生理解，又方便他们记忆。此外，第一次操作过程难免出现各种问题，鼓励学生多加练习，熟能生巧，在实践中掌握真知。这对于培养同学的耐心和毅力，在未来胜任更为复杂的工作同样重要。
（二）培养学生具有“量”的工程概念
工科学校有为企业提供工程人才的义务。工业上追求高产量、高转化率、高生产速率，利用分子生物学改造生物体，也是为了追求这三高。因此，我们在教学过程中应为学生灌输“量”的概念。例如，让学生懂得所获得的重组酶，酶活越高越有应用价值，而所应用的底物价格越低越有利于工业应用。此外，让同学懂得生命体是复杂的，在不同环境下表现出的性能也不一样，经过实验摸索可获得一个最优的实验条件，从而将产量提高。进一步通过提问和布置课后思考题的方式，引导学生利用已学知识并通过查阅文献，设计、改进实验方案，展望未来可进行研究的方向，这也有助于学生在未来快速适应企业科研、生产等工作。
三、改进考核机制，综合评价学习效果
以往教学多以实验报告形式进行实验课的考核，但往往发现多份同一版本的实验报告。这些抄袭别人实验报告的同学显然不能完全掌握实验内容。另一方面，有的同学实验报告写的非常仔细、全面，但实验操作过程并不理想。因此，仅凭实验报告的质量不能够综合评价同学对实验的掌握程度。
针对上述问题，我们对实验考核机制进行了改进，增加以下考核方式：首先，在课堂上进行提问，考察学生的预习情况和对以往知识的掌握情况，并进行评分。其次，实验过程中为每个学生对操作注意事项的理解程度、操作的熟练程度以及获得结果的好坏程度进行评分，避免了不动手、靠同组同学做实验的现象，提高了学生实验的积极性。再次，对实验报告中实验数据处理、分析清晰以及对思考题讨论详尽、有创新思路的同学给予加分。促使学生通过查阅资料解决问题，增强其学习主动性和分析问题的能力，也可减少实验报告抄袭的现象。
总之，通过分子生物学实验的教学过程，引导、鼓励学生通过网络资源、图书馆资源进行扩展学习，促进学生开阔思路，形成创新性思维，形成连贯、有序的研究思路。同时，引导学生形成产量意识和工业化的思维方式，对其今后在科研和工程领域的发展都有帮助。
参考文献：
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篇（3）
作者简介：王忠华（1972-），男，浙江开化人，浙江万里学院生物与环境学院，教授；斯越秀（1979-），女，浙江诸暨人，浙江万里学院生物与环境学院，讲师。（浙江 宁波 315100）
基金项目：本文系浙江省精品课程项目、宁波市生物医药基地项目的研究成果。
中图分类号：G642.0 文献标识码：A 文章编号：1007-0079（2013）07-0127-02
随着分子生物学的迅猛发展，分子生物学与基因工程已广泛渗透到现代生命科学的各个分支领域，成为生物技术和生物工程等专业的核心课程。[1-3]“分子生物学与基因工程”的学习，使学生了解生物遗传物质的化学本质、遗传信息在生物体内的传递过程及其遗传操作的基本原理，知晓从自然界的生物中克隆所需目的基因的基本思路和策略。该课程启发学生的思维，让学生熟悉从最基础的核酸开始，到基因分离方法的确定、基因的克隆、鉴定、表达以及最终能获得目的基因的表达产物的整个过程；使学生对分子生物学与基因工程有一个全方位的、比较系统的认识。[4，5]
“分子生物学与基因工程”是在生物化学和遗传学两大学科的支撑下发展起来的。随着分子生物学的发展，新的内容和研究方法层出不穷，使该学科日益丰满和独立。[6-7]“分子生物学与基因工程”课程具有综合设计性和实践性强等特点，并且与农业、医药、环境、能源和食品等行业紧密结合，发展空间广阔。
长期以来，该课程教学活动都以教师为中心，教师在课堂上以描述性的讲解来传播知识，学生在教与学的过程中是一种被动地认知信息的接受者。这种教学方式往往忽视了学生获得知识的潜在性和理解知识的差异性，以及发展知识的创造性。这种传统的教与学的模式虽然在教学中统一了大纲，确定了标准，规范了教学制度，但同时也掩盖了学生个性发挥的能力，忽略了学生积极思维的创新意识，不利于面向21世纪的高素质应用型人才的培养。因此开展“分子生物学与基因工程”互动式教学方式的改革是极其必要的。
因此，该课程以培养学生的创新能力为最终改革目标，通过分子生物学与基因工程理论教学“大班上课、小班讨论”的形式开展合作性学习的教学内容与方法改革。该改革的实施可提高学生查阅文献、总结分析问题和表达能力等多方面的综合素质，同时也有利于学生自主学习能力和良好学习习惯的培养，对于实现高素质应用型人才的培养目标具有较大的现实意义。
一、确立了创新能力培养的教学目标
根据“分子生物学与基因工程”面向的行业特点和学生创新能力培养的需要，确立了综合技能、工程应用能力和学科研究能力三个层次的教学目标（见表1）。
二、教学方法改革
1.研讨小组规则
（1）以一个行政班为小组基本单位，每个小组组员人数控制在6～7人，在小组成员结构安排上要注意男女生比例及活跃分子与不活跃分子比例的适当搭配。
（2）每一研讨小组要选定一名有责任心的同学担任该研讨小组组长，主要负责“学习研讨”活动中的具体任务分解与分配；负责召集每次“学习研讨”活动的课后讨论会，确定课后讨论时间和讨论地点；负责收集每次“学习研讨”活动中小组成员所提交的书面材料。
（3）每次“学习研讨”活动时，小组主持人负责主持本次小组讨论会；小组发言人负责主持本次小组讨论分析报告的讲稿制作，并代表本小组就所讨论论题在课堂上发言。
（4）记录员负责小组讨论的记录工作；每份讨论记录中要包括时间、地点、主持人、参加人员、记录员、所讨论问题和各成员的发言记录及其在各自发言记录后的亲笔签名等。
2.小组研讨活动的基本规则
研讨活动应符合分子生物学专业的基本范畴，禁止任何形式的人身攻击或限制他人的发言自由；小组成员应就所讨论课题，从不同层面、不同角度展开全面深入的讨论；每位小组成员均应参与讨论，发表自己的意见，并在记录员的发言记录上签名。
3.小组学习研讨活动流程及相关要求
（1）研讨主题的确定。由主讲教师就所承担授课内容部分拟订若干备选研讨主题，再提交课程改革小组集体讨论确定；主题选择主要涉及授课内容中的一些重点、难点、热点与前沿问题，以及一些理论授课无法展开而又需要学生掌握的问题；指导教师在指导学习研讨过程中，可根据实际情况对备选主题做适当调整，并与主讲教师及时沟通。
（2）学习研讨任务的分配（课堂研讨2～3周前布置）。指导教师向各学习研讨小组分配任务，各小组组长进一步将本小组承担的研讨任务细分到每个小组成员，尽量做到每个组员负责承担一个研讨主题下子题目的研讨资料收集及研究报告的撰写工作。
（3）学习研讨资料的收集与学习（课堂研讨之前完成）。在指导教师指导下，各小组及其成员应就其承担的研讨主题开展资料收集工作；每一研讨主题应制作一份学习研讨资料清单，资料数量为5～10篇；每份清单中的资料类型可以是著作、期刊论文、学位论文、报纸文章、会议论文等；要求收集资料的组员在力所能及的范围内，尽量将所收集的资料复印或打印出来。
4.自主学习小组课余研讨活动的开展（课堂研讨之前完成）
各小组组长在本小组资料收集工作结束后、课堂研讨活动开展之前，召集本小组成员就该小组所承担的各项研讨主题进行课余研讨；由小组长指定的本次学习研讨活动的主持人主持；就本小组所承担的各项主题逐一展开研讨活动；该课余学习研讨活动要由指定的记录员做好相应的小组学习研讨记录，并及时提交给小组发言人。
5.学习研究报告的撰写
（1）每一位小组成员应就其承担的研究主题撰写一份个人自主学习研究报告，并在规定时间内（须在课堂学习研讨活动开展前，并给小组发言人留有准备整个小组发言的时间）提交给本次学习研讨活动的小组发言人。
（2）本次学习研讨活动的小组发言人，须在综合小组课余研讨活动中的主要观点、参考小组学习研讨记录和每一组员的个人自主学习研究报告基础上，撰写一份小组“学习研讨”发言报告。该报告内容主要包括如下方面：该小组本次学习研讨活动的概况介绍；对该组分所承担的数个研讨主题予以逐一评析并提出相应结论；对该小组本次学习研讨活动进行整体评价，总结经验，分析不足，并提出相应改建建议。
6.自主学习小组课堂研讨活动的开展
首先，由指导教师根据本次学习研讨活动任务的具体情况确定学习小组发言人的发言顺序及发言时间要求。
其次，发言活动按下列流程进行：该发言人就《小组学习研讨发言报告》中的核心内容做简明扼要的小组发言；其他小组的同学以及指导老师就该发言人的发言以及该发言人所在小组承担的研究主题相关问题展开提问，发言人及其小组的其他成员予以做答；指导教师就上述发言、提问及应答情况予以现场评分，并做简短总结。
再次，小组发言人发言完毕后，指导教师应就本次学习研讨活动做一简短的整体评价。
7.自主学习小组学习研讨活动相关资料的汇集、整理与上交
（1）各小组本次学习研讨活动的发言人应于本次研讨活动结束后，在小组组长、记录员及其他组员的配合下，将本次活动中形成的各类书面资料与电子文稿按要求加以汇集整理，并制作本次《学习研讨活动书面材料汇编》的封面与目录，在规定时间内及时上交给指导老师。
（2）上述材料汇编包括：封面与目录；本次学习研讨任务及内部分工；每一研讨主题的具体研讨资料，包括资料清单、资料复印件、个人自主学习研究报告；小组学习研讨记录；小组学习研讨发言报告；学习研讨活动组员个人评分表；学习研讨活动小组整体评分表。
三、考核办法改革
为了保证合作性学习的公平性与可持续性，对教学考核方法也进行了相应的调整与改革。主要是实行了全过程评价与自主性评价的方法，具体如下：
小组每一组员的本次学习研讨活动的最终成绩（百分制）=个人成绩（占50%）+ 小组成绩（50%）。其中个人成绩（占50%）=资料清单成绩（15%）+ 个人自主学习研究报告成绩（35%），小组成绩（50%）= 小组学习研讨记录成绩（10%）+ 小组学习研讨发言报告成绩（15%）+ 小组发言的现场评分成绩（20%）+ 本次学习研讨活动书面材料汇编成绩（5%）。
各项目成绩评定的参考标准如下：
1.资料清单成绩评定的参考标准
资料数量丰富、质量高、格式规范，考核为优秀；资料数量较丰富、质量较高、格式规范，考核为良好；资料数量符合要求、质量尚好、格式较规范，考核为中等；资料数量较少、质量不太高、格式尚规范，考核为及格；资料数量少、质量差、格式不规范，考核为不及格。
2.个人自主学习研究报告成绩评定的参考标准
对研讨主题所涉相关资料及其他组员观点的归纳概括全面到位、分析过程详实，最终结论明确、论证充分，格式规范，考核为优秀；对研讨主题所涉相关资料及其他组员观点的归纳概括较全面、分析过程详实，最终结论明确、论证较充分，格式规范，考核为良好；对研讨主题所涉相关资料及其他组员观点的归纳概括较全面、分析过程较详实，最终结论较明确、论证较充分，格式较规范，考核为中等；对研讨主题所涉相关资料及其他组员观点的归纳概括不甚全面、分析过程不够详实，最终结论不甚明确、论证不甚充分，格式尚规范，考核为及格；对研讨主题所涉相关资料及其他组员观点的归纳概括不全面、分析过程不详实，最终结论不明确、论证不充分，格式不规范，考核为不及格。
四、改革实施初步成效与物化成果
本改革从浙江万里学院生物与环境学院生物技术和生物工程专业2008级学生起，连续实施了三届，每年直接受益学生数为200人。课程改革能紧密围绕培养学生的综合能力，采用以学生为主体、教师主导的教学方法，教学内容实用且能紧跟专业前沿，较好地培养了学生的自学能力、动手能力、创新能力和团队合作精神。
近三年来，生物技术、生物工程专业学生参加课程组教师的相关科研项目有50多人次；完成相关校级创业创新基金项目或校科研基金项目近10项；获浙江省科技厅“新苗计划”资助项目2项；获浙江省“挑战杯”课外科技作品竞赛二等奖1项；获浙江省大学生生命科学竞赛优胜项目1项；学生在校期间公开发表与课程相关学术论文8篇。
通过对毕业生综合表现的跟踪调查发现，学生在所进行的毕业实习中，表现出较强的基因工程分析与设计能力，一定的创新精神和良好的合作精神，受到了用人单位的一致好评。考研学生在复试中，较强的基因工程实验技能受到浙江大学、厦门大学等老师的肯定。
五、展望
课程教学改革与推广是一项艰巨的任务，它需要教师着眼于现实建设、着眼于未来发展，不断更新内容，不断改进教学方法，使项目始终保持可持续的高水平的发展。
参考文献：
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篇（4）
摘 要：本文提出基于创新能力培养的分子生物学课程教学改革的实践和思考，重点针对系统性、先进性和科学合理的理论教学体系和合理的教学评价体系.着重对大学生进行创新意识和创新能力的培养，从而塑造具有一定实践操作能力，具有独立思考、独立解决问题能力的专业型生物技术人才.
关键词 ：创新能力；分子生物学；教学改革
中图分类号：G642.0 文献标识码：A 文章编号：1673-260X（2015）04-0239-02
现今，分子生物学作为生命科学发展的领军学科迅猛发展，为人类认识生命现象以及利用改造生物带来了前所未有的机会.当今高校的人才培养和教育目标能够归结为一点，即如何充分体现大学教育的内在价值和培养导向，将培养具有创新思维、学识素养、人格品质的高级生物学人才作为高校生物技术人才培养的主要目标和改革方向[1].在这一指导方向下，“分子生物学”课程的教学过程应着重对大学生进行创新意识和创新能力的培养，塑造具有独立思考、独立解决问题能力的专业型生物技术人才.
目前，大多数高校的分子生物学课程教学中普遍存在以下问题：（1）分子生物学课程高深莫测、专业词汇多且与实际联系不够紧密；（2）分子生物学课程具有的微观特征，使得学生对生物体内发生的生物学过程无法形成立体的感官印象；（3）课程知识内容更新快，实验技术发展速度快[2].笔者通过近年的教学研究和实践，结合生物技术类专业分子生物学教学存在的上述问题，同时也是分子生物学教学工作者为之头痛且急需解决的问题，探索出基于创新能力培养的“分子生物学”课程教学改革经验，现分析如下（图1）.
1 更新教学内容，紧跟学科发展前沿，为创新型人才培养奠定理论基础
1.1 系统性的课堂教学设计
高校创新人才培养是一项复杂的系统工程，创新教育的实施则需要通过课程教学来体现，而高质量的课程教学主要取决于课程设计和实施质量.由于生物学学科发展迅速，分子生物学理论体系持续处于一个不断发展和完善的阶段，新知识和新技术层出不穷.对学生而言，这种知识体系的更新往往使其感觉力不从心，然而创新比知识追赶更为重要，构建完整的知识体系才能是创新成为可能，而创新的前提则是学生对这门课程的兴趣度和认知指数.因此如何从课程开始授课就激发学生学习的兴趣是教师解决的首要问题.以课程绪论的讲述为例，可以提及一年一度的诺贝尔生理或医学奖以及化学奖，这些杰出的研究成果几乎都与分子生物学领域有关，而年代的由远及近，就是一部很好的分子生物学发展简史，尤其强调近三年的诺贝尔成果，这样在课程学习的开始就激起了学生学习的热情，让学生们感悟到学习这门课程有着极其重要的意义.同时在讲述分子生物学的授课内容时，按照“中心法则”这一知识主线展开，让学生一开始就感觉到课程的条理性.最后应用类似Nature和Science的国际性刊物上发表的一些有趣的研究结果或者一些生物学网站上有趣的研究报道，如“在电脑芯片上孕育生命”，“science—蚂蚁通过声音进行交谈“，“基因决定我们的身材是梨型还是苹果型”等，这些教学设计都能够极大的激发学生学习的积极性和热情度，从一开始就预防学生对这门课程有”晦涩难懂“这一先入为主的认识.同时在理论学习过程中应重视原理的发现和证明过程，如遗传密码这一知识点，不仅仅掌握密码子的基本特性和概念，更应该让学生了解在当时的分子生物学发展背景下，科学家是如何巧妙的设计实验思路和试验方法，解决了密码子的破译问题.使学生在学习的同时也了解了科学思维的创造过程.
1.2 多元化的知识获取途径
在知识输送的过程中更注重多元化的方式，如采用小组讨论的形式开展专题汇报，每小组8人，最终通过个人在专题研讨活动中的贡献对学生进行评价.这种方式为学生提供了一个通过集体知识体系完善和学习交流的学习方式，例如对“原核生物基因表达调控”这一部分的讲授，可以选自国际顶尖期刊Science、Nature或Cell的研究论文，进行集体阅读，提炼论文精要和基于理论知识的新的实验方法和原理，促使学生形成对不断发展的分子生物学知识多方位和丰富的理解，自主建构可持续发展的知识体系.此外，课程论文的撰写也是学生科研能力和创新能力培养的重要途径，例如课程讲授至“RNAi技术”，进行简单的课堂讲授后让学生进行“RNAi技术的应用及发展展望”，学生通过查阅大量的文献资料，结合自己专业特点总结近年来本专业通过RNAi技术产生的新成果，这种以“课程综述”的形式使学生对分子生物学学科的意义有了新的诠释，有效激发学生的学习积极性.同时需要将课堂讲授知识进行课后拓展，鼓励学生阅读多种课外资料，介绍一些专业的生物学网站如“丁香园“、“小木虫”、“生物秀”等，鼓励学生进入网站论坛和其他高校同学多交流专业问题，此外我们选取一些优秀的国外学术期刊供学生课外阅读，并要求学生总结阅读过程中的专业词汇、撰写阅读心得，在增加知识积累的同时，给学生提供尽快掌握学科专业知识及其相对应外语词汇的机会（图2）.
1.3 优化教学手段，传统与现代教学相结合
针对分子生物学课程的微观特征，教学团队的教师在课程讲授过程中充分利用现代多媒体技术尽量多的引入一些视频，来增加学生对生物体内发生的生物学过程的感官印象，并上传至网络教学平台，便于学生理解抽象问题；如“DNA的复制、RNA的转录合成过程和蛋白质的生物合成过程“都可以利用生动形象的动画让学生直观了解起始、延伸以及终止的全过程，通过观看动画让学生观察基因表达发生的空间位置、各种蛋白质因子与起始位点相结合的顺序，以及起始复合物的形成过程.然后将视频中转录的发生过程作为主线与理论教学内容紧密结合起来，突出重点，层层深入.又如对于“原核生物基因表达调控的基本单位——操纵子“，通过动画了解乳糖操纵子的作用机制等.最后本章内容讲授完毕后，要求学生再一次根据视频对本章进行一次回顾，找出相应的知识点并及时解决有疑问的地方.
网络教学平台是课程授课的第二“阵地”，本课程已获得甘肃省精品课程，因此对课程网站的建设持续进行（jwjpkc.gsau.edu.cn/2013/fzswx/index.html）.鼓励学生参与提出问题并解决问题，或展开进一步的讨论.学生实在不能解决的问题由老师在网页上或课堂上解决.通过这种途径使真正优秀的学生有自己的发展空间并培养所有学生主动学习的热情，培养学生相互帮助的优秀品格并享受帮助别人的喜悦.
2 建立健全教学评价方式
创新性培养成效的体现需通过科学的评价方式进行，一方面是对教师教学效果的评估，更重要的是为创新性能力培养的学生起到激励的导向作用.因此，合理的教学评价体系也是创新性教学体系的重要组成部分，是实现教学质量监控的重要手段.Bloom.A.认为教育认识目标应概括为一门好的课程应该覆盖到记忆、分析、综合、判断和运用，并对以上各层次目标发展起促进作用[3].因此，我们改变传统“平时+期末”的评价模式，学生的总成绩由四部分组成：基础知识占50%（考核方式为期中考试+期末闭卷+测试小考），学术前沿认知占15%（小组专题汇报和个人在专题研讨活动中的贡献），独立研究和实践能力占25%（实践操作），探究学习能力占10%（课程论文）（表1）.通过采取上述过程化的评价体系，我们有重点的对2009-2012级学生进行调研发现，学生的学习积极性、实践操作和创新能力有了较大的提高，在近年硕士研究生的分子生物学专业课考试中通过率高达83%，学生普遍反映在复试环节的表达更加可圈可点.
3 结束语
综上所述，通过我们近年的教学实践发现：系统性、先进性和科学合理的理论教学体系是创新型人才培养的前提条件，探究性的课后学术能力拓展是创新型人才培养的重要途径，合理的教学评价体系是创新型人才培养的客观体现，最后教师对课程各环节的职业素质和修养则是促进创新型人才成长的重要保证.然而，我们也深知甘肃农业大学作为西北地区一所农业院校，在科研条件、办学力量和学生素质方面与发达地区尚存在较大差距，因此如何学习先进院校优秀的教学手段和方法，并力争缩小这一差距仍需要我们做出更大的努力.
参考文献：
篇（5）
DOI:10.3969/j.issn.1672-8289.2010.10.008
遗传中心法则是分子生物学教学的重点内容,其重要意义在于以简明扼要的形式来表示生物的遗传信息贮存、传递、表达的过程及方向。把DNA自我复制、DNA转录产生RNA、RNA翻译产生蛋白质从而表现生物的遗传性状这种普遍的传递方式,以及逆转录、RNA复制等特殊的传递方式进行科学性的高度概括。因此遗传中心法则应成为分子生物学教学的一条主线,来引导整个教学过程,对于克服解决分子生物学的教学难点可以产生事半功倍的效果。本人在教学中对此制定了若干教学策略,发掘利用一些相关的教学资源,并采取相应的措施加以实施。
1.教学时机的选择
在各类教材中,关于遗传中心法则的编排,有几种不同的方式。有的排在DNA复制、逆转录、转录、翻译等内容之前的导言部分,有的排在上述内容之后的总结部分,有的插在DNA复制的章节之中。这些不同的编排方式实际上体现了不同编者对遗传中心法则教学时机选择的不同看法。本人在教学中采用前后结合的方式,即在导言部分先展示遗传中心法则的关系式,并简要介绍其基本内容。在讲解完DNA复制、转录、翻译、反转录、RNA复制等过程之后,再次以遗传中心法则来概括总结上述内容。并重点强调各种物质在遗传信息传递过程中的作用及相互关系,使遗传中心法则发挥了先头引导和终末总结的双重作用。
2.教学进程步骤的选择
补充发展的遗传中心法则包含了遗传信息在DNA、RNA、蛋白质这三大类物质之间传递的五个过程:
这些过程的详述内容多数教材是以三大类物质各自的生物合成方式编排的。按此编排顺序讲解,不利一点在于因为这过早涉及到逆转录和RNA复制这两种主要存在于病毒的传递方式,会影响学生对生物界最普遍、最重要的三条“生产线”,即DNA复制、转录、翻译过程认识的连贯性。本人选择的教学步骤是先连贯起来讲解这三条最重要的“生产线”,阐明其普遍性意义,然后补充介绍逆转录和RNA复制的特殊性。这样一方面使重点内容更加突出,主次更加分明。另一方面也能体现出遗传中心法则学说本身的历史发展过程。
3.重点内容知识的理解巩固措施
遗传中心法则所包含的内容属于分子生物学的范畴,抽象的名词概念较多,往往使初学者在理解上有一定的难度。可以采取以下措施来克服解决:
3.1要求学生不仅能正确写出遗传中心法则的表示式,还帮助、要求学生能用简要的文字说明来概括其内容要点:①DNA分子中贮存着生物的遗传信息,并以亲代DNA为模板,通过自我复制把遗传信息传递给子代DNA②DNA遗传信息表达的第一步是以DNA为模板通过转录指导合成RNA,把DNA的遗传信息传递给RNA③遗传信息表达的第二步是以mRNA为模板,通过翻译指导合成蛋白质;④某些RNA病毒能通过逆转录过程,以RNA为模板指导合成DNA,把RNA病毒的遗传信息传递给DNA⑤某些病毒的RNA也能进行自我复制。
3.2布置一些与遗传中心法则有关的习题,有助于加强重点内容知识的理解巩固:①设某一DNA分子有转录功能的模板链的碱基排列顺序为:
写出由它转录产生的RNA链的碱基排列顺序。
②假设上题转录产生的是一条mRNA链,查阅遗传密码表,写出由此mRNA翻译产生的蛋白质的氨基酸排列顺序。
③某一病毒的RNA的碱基顺序为:
写出由它逆转录产生的cDNA单链及DNA双链。
4.介绍与遗传中心法则有关的人物及成果
让学生了解一些遗传中心法则的历史发展过程,有助于对其科学性和重要意义的认识。本人结合教材内容适当补充介绍一些与遗传中心法则的建立有关的人物与成果:
(1)1958年克里克首先提出遗传中心法则,认为DNA的遗传信息先传递给一种中间模板(RNA),蛋白质是以中间模板进行生物合成的。
(2)1961年雅各布和莫诺等人发现并证明了克里克所说的中间模板就是mRNA。
(3)1968年在尼伦伯格等人的多年研究下,一套生物界通用的遗传密码表全部破译了,证实了从mRNA到蛋白质的信息传递过程。
(4)1965年斯皮格尔曼在RNA病毒中发现了RNA复制酶,证明了RNA复制过程,使遗传中心法则得到补充。
(5)1970年坦明和巴尔的摩发现了逆转录酶,证明了以RNA为模板指导DNA合成的逆转录过程,使遗传中心法则又得到重要的补充和发展。
5.探索遗传信息传递的其它可能性
目前的遗传中心法则似乎还有几笔没有填写的“空白”,这也是一些求知欲较强的学生往往会提出的问题。可借此引导学生运用科学思维对未知领域大胆猜想,古往今来很多重要的科学发现最初也是从猜想、假说引发的。
5.1 DNA能否直接决定蛋白质
这种猜想在遗传中心法则提出之前就曾有过。在还未发现RNA是DNA到蛋白质的中间模板之前,曾经设想各种氨基酸是嵌入在DNA形成的“空洞”里,在DNA模板上连接成多肽链。后来有人在一些离体实验中观察到,一些抗生素,如新霉素、链霉素,能扰乱核糖体对mRNA的选择和结合。受抗生素干扰的核糖体可以接受单链DNA分子代替mRNA分子,从而以单链DNA为模板翻译出多肽链的氨基酸顺序。另外还有人发现,细胞核里的DNA可以直接转移到细胞质的核糖体上,由DNA直接决定蛋白质的合成。
5.2 蛋白质能否传递遗传信息
克里克在提出中心法则时指出:信息从核酸到蛋白质的传递是可能的,但信息不能由蛋白质转移到蛋白质或核酸中。也就是说,蛋白质是遗传信息传递的终点。这一观点现已面临诸多方面的挑战。
5.2.1蛋白质能否决定DNA
有人发现了一种被称为Rev1DNA聚合酶的蛋白质,它可以为DNA复制提供编码信息。研究者发现一些致癌物质能破坏DNA的鸟嘌呤(G),或者破坏鸟嘌呤与胞嘧啶(C)的配对。而Revl DNA聚合酶可以以自身为模板在DNA复制链上加一个胞嘧啶,这个胞嘧啶无论鸟嘌呤是否在DNA模板中存在,都会被Rev1加上去。这样在DNA下一次复制时就可以利用这条单链复制出与它互补的DNA新链。.Rev1的发现有两方面的意义,一方面它是在有致癌物质的情况下,对受损的DNA进行修复的一种新的机制。另一方面,这也许可以看作是蛋白质可以作为DNA合成模板的启示。
5.2.2蛋白质能否决定RNA
RNA编辑是1986年Benne等人首先在原生动物布氏锥虫线粒体内的发现的一种新的遗传现象。后来相继发现高等植物,哺乳动物和病毒也有RNA编辑作用。RNA编辑是指由基因转录产生的mRNA分子。在酶的催化作用下,发生核苷酸的删除,插入或替换,使得转录产物的序列不与基因的序列互补。RNA编辑对于生物来说具有校正、扩充遗传信息和调控翻译等重要的生物学意义。此外由于参与RNA编辑的酶属于蛋白质酶类,因此对于中心法则来说,也许可以在RNA蛋白质之间加上一个反向的箭头符号,即RNA蛋白质。
5.2.3 蛋白质能否复制
1997年度诺贝尔医学生理学奖授予美国的普鲁辛纳,以表彰他发现了一种可导致疯牛病和人类罕见的克雅氏症的蛋白质致病因子――普里昂蛋白。该致病因子只含蛋白质成分,不含核酸(DNA或RNA)成分。但却有极强的侵染性。致病型普里昂蛋白(prpsc)可诱使正常型普里昂蛋白(prpc)转化为致病型,两种蛋白质的一级结构相同,但二级结构不同,正常型prpc二级结构中α一螺旋占40以上,几乎不含β一折叠。而致病型prpsc含有高达50左右的β一折叠。目前对于prpsc扩增机制的研究有两种模型学说,一种是重折叠模型,又称模板辅助模型,另一种是晶种模型,又称成核聚合模型,都能使prpsc以几何级数扩增。由于prpsc扩增必须有致病型prpsc和正常型prpc的存在, 因此有人提出将这种扩增的方式称为“自他复制”,以区别于DNA的自我复制。这一发现在生物科学界引起了极大的震动,其重大意义在于使人类对病原体的认识又前进了一步,认识到除了通常的细菌、病毒、霉菌、寄生虫外,变异的蛋白质也可传播疾病。此外,随着对致病型普里昂蛋白复制原理及过程的进一步研究,也许在遗传中心法则中,蛋白质复制这个“圈”可能得到补充。
参考文献:
[1] 汪承润,屈艾,蒋继宏.中心法则的发展和面临的挑战[J]。生物学教学,2003,28(1)4-7.
[2] 李振刚.分子遗传学:第2版[M].北京:科学出版社,2004.
篇（6）
Keck School of Medicine, University of
Southern California, CA, USA
Stuart E. Siegel, Department of Pediatrics,
Keck School of Medicine, University of
Southern California, CA, USA
Hans E. Kaiser, Department of Pathology,
School of Medicine, University of Maryland,
Baltimore, MD, USA
Molecular Markers of
Brain Tumor Cells
Implications for Diagnosis, Prognosis and Anti-Neoplastic Biological Therapy
2004, 362pp.
Hardcover EUR 78.70
ISBN 1-4020-2781-8
Kluwer Academic Publishers
在过去的20年，科研工作者已经在分子肿瘤领域取得了划时代的重大发现，这很大程度上归功于免疫组织化学方法的应用。这一方法在脑肿瘤研究中也已经从试验阶段走向了成熟。
全书包含了三部分。第一部分是肿瘤的分子生物学（包括第1、2章）：第1章以儿童脑肿瘤中最常见的神经母细胞瘤和神经胶质瘤为例介绍了脑肿瘤的分子生物学进展；第2章介绍了早期阶段的脑肿瘤中浸润的多核和单核细胞免疫表型的鉴定，肯定了免疫组织化学在脑肿瘤的研究和诊断及治疗中的作用。第二部分鉴于脑肿瘤对传统的手术、放化疗方法效果不佳，介绍了对脑肿瘤的生物治疗的研究（包括第3~9章）：第3章概括论述了在脑肿瘤研究中的实验性治疗方法；第4章对生物抗癌治疗在肿瘤治疗中的作用和前景进行肯定的基础上，从增强非特异性自然免疫、胸腺激素、干扰素、肿瘤坏死因子、白介素－2等几个方面对生物抗癌技术进行了介绍；第5章介绍了一种在白介素－2的协同作用下可以杀伤新生肿瘤细胞的细胞毒淋巴细胞；第6章简要概述了抑制血管形成在抗癌治疗中应用；第7章先介绍了肿瘤疫苗的概念，然后分门别类的讲述了不同组织器官的专职抗原提呈细胞，并通过分析其抗原提呈的过程，阐述了APC在肿瘤生物治疗中的免疫治疗的重要作用；第8章介绍了抗肿瘤的独特性抗体，单克隆抗体在临床上的实验性应用以及多种针对癌细胞治疗制剂的整体应用的重要性；第9章讲述了癌－抗原，一类特定分化的抗原家族，是在抗癌的免疫治疗中有前景的靶向抗原。第三部分为本书的附件（包括第10、11章）：第10章材料与分析；第11章索引。
本书总结了分子生物学中关于脑肿瘤的研究成果，归纳提出了脑肿瘤的生物治疗方法，适合从事免疫组织化学、肿瘤相关研究的人员阅读参考。
刘玉琴，教授
篇（7）
免疫及病原生物学知识点需求。
抗感染免疫是社区医生最常用到的知识点(图2)。社区医院处于传染病、地域性疾病、突发疫情的前沿阵地,对传染病和突发疫情早发现、早隔离、早治疗,对地域性疾病进行筛检和治疗,是其重要职责之一。而比较出乎教师意外的是即使是在农村,由于目前生活水平的稳步提高,寄生虫学这一章节临床医生并不常用,对其要求不高。抗体与补体是临床医生最希望详细了解的知识点。临床上不少检测手段都需要用到免疫学的基本概念和原理,由此免疫学的应用和技术需要做些概括性的讲解,使学生在实际工作中遇到相关问题不至于太茫然。
细胞生物学知识点需求。
细胞生物学最常用的和希望了解的知识点均集中在细胞的活动上,即细胞水平的增殖、分化、衰老、坏死和凋亡。这些知识点与肿瘤的发生、发展、转归密切相关,也与不少药物的作用机制相关。总体而言细胞生物学与基层的医学工作者并不是很密切。
课程整合初步大纲。
根据社区卫生院临床医师对生物化学、病原生物学、免疫学、细胞生物学知识点的实际应用情况和知识点的需求量,我们拟针对临床专业(社区医学方向)学生开设实用医学生命科学课程,涵盖以上学科部分知识点,力求达到在有限的学时内,传授综合性强,实用性强的知识点。
传统的课程结构将临床专业的课程分为公共基础课、专业基础课和专业课。这一模式系统性强,但各课程各自强调系统性、完整性,彼此之间缺乏联系。由于面向农村社区临床医学人才培养不要求学生有十分宽广的基础理论知识,根据够用、适度的原则,需要调整专业基础课程,如细胞生物学、分子生物学的设置。目前的趋势是社区医生的培养重点在于大力发展全科医学教育,这就要求教师在教学过程中将不同学科的知识点融会贯通,进行课程的重组,整合。江西医学院上饶分院推行面向农村社区全科医学教育改革,其专业基础课程模块中对课时进行了调整:生物化学与分子生物学占67学时(理论55+实验17学时)、病原生物学与免疫学占66学时(理论54+实验12学时)、细胞生物学占20学时(理论14+实验6学时);遗传学内容作为选修课程。目前,我校临床医学专业生物化学72学时,病原生物学与免疫学81学时,细胞生物学未开课。由此,我们在社区医学专业课程设置上,拟将这三门课程进行整合并适当增加遗传学的内容,形成一门贯穿一学年的153学时的实用医学生命科学。
从而有效避免各课程为了强调自身学科的系统性和完整性而导致课程之间内容重复,相互重复的内容可统一在某一课程中单独讲述。除了课程结构上进行改革,还要根据培养目标重新编写教学大纲和教材,删除或弱化课程中对基层社区卫生工作无太大实际意义的内容,如本次课程整合过程中,弱化生物化学相关的蛋白质空间结构、等电点等,加强三大代谢的讲授力度;即强调基本概念、生理意义等,而不是代谢步骤和调控。
篇（8）
费尔巴哈在谈到哲学的改造时说过：“哲学必须重新与自然科学结合，自然科学必须重新与哲学结合”。这是一种“建立在相互需要和内在必然性上面的结合”。〔1〕自然科学构成了哲学的基础， 生物科学是这个基础中不可或缺的组成部分。如同所有其他科学一样，生物科学也深深受到哲学的理论思维和方法的影响。生物学哲学作为连结哲学与生物学的桥梁和中介，对二者的重新结合起着十分重要的作用。从学科建设的角度看，这门学科的存在和发展，既须以实证科学知识特别是生物科学的知识材料为基础，跟上现代科学技术发展的步伐；又要汲取哲学研究的积极成果，适应当代哲学变革的需要。
就学科性质而言，一般认为生物学哲学属于科学哲学体系中的一个分支学科。《大英百科全书》第15版所列《自然哲学》条目将关于自然的实际特征问题作为实在来进行考察，并分为物理学哲学和生物学哲学两个部门。不过这里对“自然哲学”一词的使用，有别于以往的传统自然哲学，而是“作为对科学哲学的补充”。如所周知，西方科学哲学是以科学为研究对象，主要论述科学的认识论和方法论问题。维也纳学派的创立者M.石里克的自然哲学也是作为一种科学哲学，一种探讨哲理的科学方法。他申明自然哲学的任务在于解释自然科学命题的意义，自然哲学是一种旨在考察自然定律的意义的活动。在其自然哲学讲稿中关于生物哲学的分析，便是从有机自然现象也一定要由定律来描述这一点出发，来讨论生物学中的机械论与活力论问题。
在科学哲学的发展进程中，除了一般科学哲学，还兴起了特定学科的科学哲学，自本世纪初以来主要是物理科学哲学。传统的科学哲学带有片面的物理主义倾向，认为运用物理方法能够对这个世界作出绝对完全的描述，世界上发生的每一事件均可用物理语言来描述。物理主义最热烈的倡导者、分析哲学的主要代表人物之一的R.卡尔纳普声言：“如果根据物理语言的普遍性，把物理语言用作科学的系统语言，那么，所有的科学都会成为物理学。……实际上只有一种客体，那就是物理事件。在这物理事件范围内，规律是无所不包的”。〔2 〕石里克也同意物理主义的观点，他仅仅基于量的方面的考虑而得出结论：“对于自然哲学而言，有机体不过就是一些特殊的具有复杂结构的系统，它们被包含在物理世界图像的完美和谐的秩序之中”。〔3〕
传统的科学哲学把研究重点放在物理学的定律和理论上，把它们看作科学的结构和逻辑的范例。之所以这样是有其深远的科学背景的。自牛顿实现了力学中第一次伟大综合，此后，经典物理学的各个分支日趋完善，牛顿的机械纲领左右了近代科学和哲学的发展。本世纪初以相对论和量子力学的建立为标志的物理学革命，是物理学发展中的重大突破，也是对科学哲学的有力推动。逻辑经验主义的主要代表H.莱辛巴赫所著《量子力学的哲学基础》一书，就是通过对量子力学的科学成果的分析，阐释了他关于知识的性质、客观实在以及因果性等问题的见解。多年来，科学哲学的研究植根于逻辑学、数学及物理学定律，重视对物理理论的分析而忽略了生物学。正如在科学哲学家的视野内，有机生命及其进化只不过是世界科学图景中的一个次要因素；在科学哲学的殿堂中，生物学哲学也是处于比较次要的从属的地位。这种状况只是到本世纪中叶以后才开始改观。随着分子生物学所取得一系列新进展，导致了生物学的革命，生命科学作为最激动人心的科学领域跃居到自然科学的前沿，对现代整个自然科学和哲学的影响也日益显著。由于引入数学、物理、化学等学科的理论、方法和新的技术手段，现代生物学的研究领域得以向微观和宏观层次不断延伸扩大，并愈来愈趋向系统的复杂性，向揭开物质世界最复杂最高级的系统——大脑的奥秘进军。生物学研究的课题愈来愈带有根本性，当今自然科学的研究重点正在转向研究生命本身。对生命现象的深入探索，增强了人们对生物学的哲学兴趣，并促使科学哲学向新的研究方向转变。在这方面，现代综合进化论的主要建筑师之一E.迈尔作出了开创性的工作，他致力于建立生物学的新哲学，强调这样一种新的科学哲学必须放弃对僵化的本质论和决定论的依附，必须将科学概念加以扩展、不仅包括物理科学的而且还包括生物科学的原理和概念。
传统科学哲学还带有专注于纯科学领域的局限。国外学术界在讨论医学哲学与科学哲学的关系这一论题时，已有学者指出，从历史上看，科学哲学家往往不到自然科学领域外面去寻找对科学的定律、解释和理论的洞察力以确定理论演变的进程，而是将自己限制于纯科学形式中，一直忽视和轻视象工程学、农学和医学这样的应用科学领域。同时由于传统科学哲学仅仅局限于从“内部”考察科学，忽视了科学技术与社会之间的互动关系，这种狭窄的科学观不可能得出真正有洞察力的答案。传统科学哲学在研究视野上的这些缺陷，对后来兴起的生物学哲学也产生了某种程度的影响。
固然，科学哲学主要是把科学作为知识体系，对之进行认识论和方法论的研究，但是认识的最终目的不是知识本身，而是改造世界的实践活动。对科学的哲学反思也不能脱离它所固有的实践本性。在科学、技术和社会走向一体化的现时代，尤有必要拓宽科学哲学的领域，开展实用性的或应用性的研究，并将科学哲学研究同科技发展的社会研究结合起来。作为实用科学的农学和医学与作为基础科学的生物学之间的联系极其密切，它们都属于生命科学的范畴。在生命科学哲学领域内，理应包括对这些应用学科的理论和实践的哲学研究。以分子生物学为依托的生物技术，将成为医学和农业科学的主导技术，并将引起医学革命和第三次农业革命。生物技术的“每一个创新，每一个技术妙举，每一个概念上的困难的解决，都使得需要一种确定的生物学哲学变得更加显著，并且目前正在朝向这个目标发展”。〔4〕
21世纪将是生物学世纪。可以预期，未来世纪生命科学的巨大进展及其革命性变化，必然要求生物学哲学在已有研究基础上，无论从理论框架到研究内容到论题范围都要有所突破。要尽力吸收、消化生命科学的最新成就，以正确的世界观和方法论为指导作出新的哲学概括，提出新的理论观点及发展生物科学技术的战略选择，这些可谓生物学哲学学科建设的题中应有之义。
2 拓展和深化生物学发展新形势下的生物学哲学研究
以下试从生物科学发展的规律性、生物学规律与物理规律的关系以及生物学规律与社会规律的关系三方面谈点浅见。
（1）“自然科学现在已发展到如此程度， 以致它再也不能逃避辩证的综合了”。〔5〕恩格斯在上个世纪80年代作出的这一论断， 揭示了辩证思维对于了解科学事实的辩证性质的必要性，这也为后来自然科学本身的发展所证实。
近现代自然科学发展的趋势是由经验分析进到辩证综合，这在生物学的发展中表现得十分明显。自本世纪二、三十年代起，在生物学范围内开始出现一些学科的综合趋势。早期的两大综合，一个是以胚胎学为中心，将之与细胞学、遗传学和生物化学综合起来，形成统一的发育观点；另一个是以进化论为中心，将达尔文的自然选择学说与群体遗传学相结合，发展为一个有巨大阐明力的学说，即现代综合进化论。进化的综合范式取得了富有建设性的成果，如迈尔所说，是在有关的学科之间找到了一种共同语言并澄清了许多进化问题和作为其基础的各种概念。但是这一范式仍是不完善的，还有不少尚未解决的问题。它不仅受到一些批评家的非难和质疑，就是在达尔文主义者之间也依然存在某些意见分歧。更完全的综合始于本世纪50年代中后期诞生的分子生物学，它是生物化学、微生物学和遗传学等学科相互融合的产物，其主要目标之一是试图将大量的生物功能与分子水平上发生的事件联系起来。分子生物学的核心——分子遗传学，在信息大分子的结构、功能及相互关系的基础上来研究生物的遗传与变异。按照生物学史家G.E.艾伦的说法，J.沃森和F.克里克的工作，把信息学派、结构学派和生化学派对遗传（甚至扩展到整个生物学）的问题的研究统一起来了。作为一个新的遗传学范式，分子遗传学的范式补充和修正了（不是取代）进化综合范式，推动了关于进化过程中基因的变化和调节机制等问题的研究。着眼于分子水平上的进化的中性学说同着眼于表型进化的自然选择学说，也应看作是一种互补关系而非互相否定。现代分子生物学在进化研究方面的认识成果向人们昭示，一种完整的进化理论的建立，期待着传统的进化生物学与分子生物学实现新的综合。更进一步看，生物进化是种系发生和个体发育的辩证统一过程，对进化的深层认识，必须解开发育之谜这个世纪难题，以阐明个体发育中基因在多层次水平上的程序控制机理。由于分子生物学、细胞生物学与遗传学的结合，把发育生物学推向前台，将成为21世纪生命科学的新主角。据中科院未来生物学预测研究组预测，在分子水平上使遗传、发育和进化的统一成为可能，这将是未来生物学的主要理论任务之一。由这三者统一所导致的理论大综合，蕴含着丰富的哲学思想。从哲学认识论和方法论上对之进行理论概括，也应成为未来生物学哲学的主要理论任务之一。
“分久必合”。生物学中的这种综合趋势还在继续。一些生物学家预言，面向21世纪的生命科学，必然是各学科相互渗透与相互交融的“大生物学”时代。“大生物学”要求辩证地综合与不同组织水平相关的各门学科所积累的科学事实，建立起一般的生命理论，发展统一的生物学原理。多种学科的综合，反映了生物现象的相互联系和科学概念、方法论准则的统一。结合生物学认识发展的内在逻辑的考察，对生物学理论的相互关系（特别是理论的概念结构之间的转换、理论范式的确立和更替）进行哲学分析，能为我们提供有关生物科学发展规律性的新的认识。
（2）在生物学哲学的讨论中， 争议较多而且也是悬而未决的一个理论问题是关于生物学的自主性问题。具体言之，生物学的概念与规律能否在某种意义上“还原”为物理学和化学的概念与规律？生物学家运用的解释型式（例如历史的解释或目的论的解释）在物理科学中是否相宜？在生物系统中显示的某些现象是否也在无机系统中显现或有重大差异？等等这样一些有关生物学和物理学的联系究竟是什么的问题， 被A. 罗森伯格称之为“生物学哲学的中心问题”（《生物科学的结构》）。根据对这个问题的不同回答而形成了“自主论”与“分支论”两派泾渭分明的理论观点。这种分野在历史上的表现形式是活力论与机械论的对立，在现代则主要是所谓反还原论与还原论的争论。
从本体论方面说，讨论物理化学的实体和过程是否构成所有生命现象的基础，这实质上就是高级运动形式与低级运动形式的相互关系问题。如果把生命运动形式同物理化学的运动形式混同起来，甚至完全否定生命运动在质上的特殊性，这种本体论上的极端还原论倾向在哲学上和生物学上都是不可取的。相反，如果把生命运动的独特性绝对化，忽视其与其他运动形式之间的包容关系和发生学联系，这种倾向同样是不可取的。以辩证唯物主义的物质运动形式观为指南，依据科学认识的新成果，将能通过阐明生命运动和低级运动形式存在的联系和连续性而更深入地揭示其本质。
从方法论方面说，在生物学中通过把复杂现象分解为更为简单的组成部分进行研究，最终在物理化学层次上——分子层次上——作出说明，这也即还原论作为方法论的功能。分子生物学正是运用物理化学的还原方法来分析生命活动的基本过程，才获得了划时代的成就。这被誉为还原论的胜利。但是也要看到，生物学中还原方法的应用是有其局限性的。研究表明，生物体是一个多层次的、有组织的、结构复杂的系统，其中各个组成部分和整体具有多方面的相互作用。生物体的整体性不能建筑在来自于各个部分的分子碎片之上，分子参与组织的整体，它们的转移和复制是整体的全部功能的结果。本世纪下半叶以来系统科学和非线性科学的发展，为探索生命系统的复杂性提供了新的科学思想和科学方法。还原论方式的自下而上的决定原则即较低层次决定较高层次的原则，同系统整体思维方式的自上而下的决定原则即较高层次决定较低层次的原则，二者既相互对立又相互依赖，它反映了部分与整体的辩证法。合理地结合这两种决定原则，应是生物学进一步阐明生命机制及其规律性的研究战略。
（3）在当代， 从自然科学奔向社会科学的强大潮流已成为不可遏止之势。由于生物学革命对自然和人类社会生活产生的广泛影响，凸显了人的自然基础和社会基础的统一问题。与此相应，生物科学和社会科学的综合性研究也成为人们关注的热点。加拿大哲学家M.鲁斯在其《生物学哲学》一书中宣称，未来的社会科学将和生物学结合起来，社会学将把生物学的成果包括在自己的理论中，研究这种结合会提供许多有意义的东西。从现代生物学的发展可以看到，生物科学领域的一些学科（如遗传学、动物行为学、生态学等）与社会学、人类学、伦理学、经济学及政治学等学科的渗透、融合，不仅加深了人们对自然界和人类自身的认识，同时也启迪了对生物学规律和社会规律二者相互关系的哲学思考。如生态经济学作为生态学与经济学交叉发展起来的一门边缘学科，主要是阐明生态系统与经济系统相互作用所形成的生态经济系统运动和发展的客观规律。而生物政治学则旨在用生物学的概念、原理和方法来研究政治行为，借以探索社会政治生活的本质及其规律。在横跨生物科学与社会科学的众多交叉学科中，1975年由美国动物学家E.威尔逊在其巨著《社会生物学：新的综合》中所倡导并加以重新解释的社会生物学引起了很大反响。这是一门系统研究一切动物（包括人类在内）的社会行为的生物学基础的学科，其核心在于承认基因是遗传和自然选择的基本单位，一切社会行为均有其特殊的遗传结构。威尔逊和C.拉姆斯登还进行了更为广泛的概括，在他们所著《基因、理性和变化》（1981）中提出基因—文化互作进化论，认为整个人类文化领域在一定程度上依赖于遗传控制。学术界对社会生物学褒贬不一，围绕它所提出的人类行为的遗传决定问题展开了激烈的争论。这场争论远未完结，它所涉及的生物进化与文化进化的关系、社会生物学的哲学意义以及如何正确评价这一学说等问题也是生物学哲学研究的课题。
生物学与社会相互作用的一个引人注目的方面，表现为生物技术研究对伦理观的冲击和基因工程的社会控制及其伦理调节。生命科学技术的进步，在造福人类的同时也引发出许多社会伦理问题，向传统的伦理道德观念提出了新的挑战。举医学领域来说，由于医学技术以人作为直接作用对象，它所引发的伦理问题更为突出。自本世纪六、七十年代以来，国外医学界关于死亡标准、器官移植、安乐死、重组DNA 技术以及人工生育技术种种问题的伦理学争论，无不反映了传统伦理观的困惑和人类面临的伦理学上的选择。在当代新科技革命条件下，随着生物高技术的发展，不断涌现出新的伦理道德难题。被称为生物学领域的第一“大科学”的人类基因组工程，无疑会深化人类对自身结构的认识，但这项研究也将面临与伦理观念相悖的严峻形势。例如，由检测基因产生的侵犯个人健康隐私权问题。当今在世界范围内受到广泛关注的克隆绵羊“多利”的出世，更是激起了一场有关其应用前景和伦理意义的大争论。人能否克隆？在人身上重现这一成就或者创造新的生命形式（如人兽混合体）是否合乎伦理？未来的生命科学技术怎样与社会协调？是否应该着手进行人种改造的选择？站在生物学哲学的高度，我们将如何回答这些问题？
参考文献
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[3]莫里茨·石里克：《自然哲学》， 商务印书馆， 陈维杭译， 1984，第68页。
篇（9）
作者：乔凤怜等
在2012年教育部新修订的《普通高等学校本科专业目录》中，医学检验专业从临床医学类调整到医学技术类(1010)，学制由5年改为4年，学位由医学士改为理学士，专业名称改为医学检验技术(101001)[1]，这一调整更加明确了医学检验专业技术性人才的培养定位。为适应医学检验专业学制、学位、学科属性以及人才培养目标定位的变化，一些从2003年起相继开办或改办4年制医学检验本科的高校，如上海交通大学医学院、南方医科大学、湖北中医药大学、成都中医药大学等进行了有关4年制医学检验专业人才培养模式、课程设置、实践能力培养等关键环节的改革探索，取得了一些成效[2-6]，但也备受争议，并未达成广泛的共识；而另一方面，实验室认可制度以及《医疗机构临床实验室管理办法》等相关政策法规正在不断对检验医学工作的内涵和定位提出新要求，临床实验室的组织架构也在重建，这些变化客观上已经造成了院校教育与岗位能力需求的差距逐步加大[7-8]。因此，准确把握医学检验人才岗位需求的专业能力，客观分析人才的能力结构，清晰界定其基本标准和发展标准，以岗位能力需求为导向来重构人才培养模式和课程体系，才是保证人才培养质量的关键点。
为此，成都中医药大学作为国内较早(2007年)举办4年制医学检验本科的学校，开展了针对行业专家和本校毕业生的医学检验专业人才能力基本标准的调研，旨在理清医学检验岗位需求能力的基本标准，并通过分析本校历届毕业生的专业能力自我评价与岗位需求能力之间的差异，客观评价本校医学检验专业人才培养的质量，为深化4年制医学检验专业人才培养模式和课程体系改革提供思路和路径。
1调查内容及对象
1.1调查内容
在前期研究[2-3，6，9-11]的基础上制定了“成都中医药大学医学检验专业人才能力基本标准与质量评价调查问卷”。问卷分为三部分，第一部分为“调查对象及其工作单位基本情况”，第二部分为“医学检验岗位应该具备的专业能力要求”，第三部分为“毕业生专业能力的自我评价”。第二、第三部分调查表均将岗位能力需求分解为“普适性专业能力、临床基础检验能力、临床生物化学检验能力、临床微生物学检验能力、临床免疫学检验能力、临床血液学检验能力、临床分子生物学检验能力、综合能力”8个维度共49个项目。
1.2调查对象
以省内不同层次(二甲、二乙、三甲、三乙)的医疗机构检验专家(科主任、或主管)为调查对象完成岗位能力需求问卷调查；以在上述单位工作或实习的本校医学检验专业2011届~2015届本科毕业生为调查对象完成毕业生专业能力的自我评价。
1.3调查数据分析
毕业生专业能力自我评价中的“优、良、一般、较差”四个等级，分别给予赋值“4分、3分、2分、1分”进行统计分析，数据结果以各条目评价分值的“均值±标准差”表示并进行比较。所有数据用excel表格和spss17.0统计软件进行分析处理，统计方法选择用单因素方差分析及独立样本t检验，P<0.05差异有统计学意义。
2结果
2.1医学检验岗位应具备的专业能力要求
随机调查医疗机构检验科主任30位，问卷回收27份，问卷回收率90%。被调查者中，高级职称占比70.4%，所属单位为三级以上医院占比81.5%，其中拥有专业设置完整的检验科的医院占比96.3%。“医学检验岗位应该具备的专业能力要求”调查中，所有被调查者对8个维度49个项目均选择“是”，有33.3%的被调查者在自主填写栏目中进行了补充，主要包括：①仪器检验结果的综合分析能力；②实验室认可相关知识及参与实验室认可的能力；③强化法律法规意识及服务意识。
2.2毕业生专业能力的自我评价
按历届毕业生30%发放问卷220份，回收204份，回收率92.7%。
被调查毕业生工作单位分布情况为：医院检验科占72.1%，独立实验室占7.8%，输血科及其他实验室占20.1%；检验科所属医院中三级以上占66.1%，二级以上占11.8%，具体分布见表1。
毕业生专业能力自我评价各维度得分总体情况见表2。由表2可见8个能力评价维度中“临床分子生物学检验能力”得分最低，条目均数2.91±0.83。评价为一般或较差(3分及以下)共15项目，详见表3。
3讨论
3.1医学检验岗位需求专业能力基本标准的研判分析
为探讨医学检验岗位需求专业能力基本标准，本团队前期通过徇证的理念及方法，获取近10年来有关医学检验专业教学改革情况研究现状，重点分析人才培养的知识、素质和能力要求情况，结合检验岗位的现实需求和发展趋势，初步界定了“医学检验岗位能力”[2-6，9-11]，概括为群集的普适性专业能力、专业技术能力、实验室质量控制能力、专业拓展能力4个方面。
为进一步确证和完善上述专业能力体系，本团队制作“医学检验岗位应该具备的专业能力要求调查表”对省内不同层次(二甲、二乙、三甲、三乙)的30位医院检验行业专家(检验科主任/主管)完成了岗位能力需求调查。
3.1.1医学检验岗位能力标准体系调查表的制作
调查表以初步界定的“医学检验岗位能力”为依据，将4个方面的能力归入8个维度(见表2)，第1维度“普适性专业能力”涵盖群集职业能力，具体细化为临床实验室一般工作能力，包含实验室检测系统的操作与维护，实验结果规范化、准确报告，临床实验室质量管理体系，实验室安全防护能力等项目。第2至第7维度分别为专业技术能力(临床基础检验、临床生物化学检验、临床免疫学检验、临床微生物学检验、临床血液学检验、临床分子生物学检验)，每一维度中均细化为特有实验室检测基本知识与能力，开展的常规项目基本知识和能力，常规仪器分析项目及结果判读的基础知识和能力，实验室质量控制的基本能力。第8维度“综合能力”涵盖信息获取、表达及专业可持续发展能力，细化为文献检索、信息获取能力、跟踪专业理论和技术发展能力、专业信息表达能力等项目。并最终形成由8个维度共49项目构成的医学检验岗位能力体系，既体现了医学检验岗位的一般能力要求，同时描述了专业的具体能力需求，力求使标准体系具有指导性、完整性和可操作性。
3.1.2岗位能力标准体系适应性调查对象的选择
“医学检验岗位应该具备的专业能力要求”调查中调查对象的纳入标准为医院检验科主任或主管技师以上捡验工作人员，目的是抽取对医学检验岗位具有较为深入的认识，可准确、全面的理解和分析医学检验各专业岗位能力需求的行业专家。本次调查中该项调查回收问卷均来自省内医院检验科主任，其中多数具有高级职称，所属医院多数为三级以上，几乎全部具有专业设置完整的检验科。因此认为，调查对象应积累了医学检验岗位丰富的实践经验，全面掌握医学检验各专业实践较高水平的需求，其评价结果具有可靠性。
3.1.3岗位能力标准体系适应性调查结果分析
该项调查中，一方面所有被调查者对列出的全部(8个维度49个项目)能力标准评价均选择了“是”，说明研究者初步制订的岗位能力体系中切合岗位实践要求，无超出实践需求的不合理能力要求。另一方面，被调查者认为体系中尚欠缺的能力包括仪器检验结果的综合分析能力、实验室认可相关知识及能力、法律法规意识、服务意识等。充分反映了医学领域的新技术、新思维对检验医学岗位实践的深入影响，是医学检验院校教育应积极跟进的相关部分。
3.2毕业生专业能力自我评价分析
第一，由表2可见，8个维度评价中临床分子生物学检验能力均分最低，结合表3可见，该维度5项指标中4项指标均分均低于3分，可见毕业生认为自己临床分子生物学检验能力欠缺。其主要原因可能是：①临床分子生物学检验作为一门新兴学科，相比其它传统学科，出现时间相对晚，对该学科能力培养的模式、方法尚未有较长时间的理论探索、实践验证；②虽然临床分子生物学检验为现代医学实验的发展提供了较好的方法学，但因方法自身成熟性及医院条件限制导致临床实验室尚未普及开展，毕业生在工作过程中涉及较少。在表2中，其他得分相对较低的专业能力项目为临床血液学检验和微生物学检验，其主要原因可能是：①形态学的知识和能力相对复杂，与临床医学尤其是疾病联系较为紧密，医学基础知识要求高，学习难度和熟练掌握难度较大；同时各项实验室检查项目与临床病理生理改变甚为密切，实验结果分析难度较大；②在不同等级医院开展的项目、基本要求差异较大。
第二，分析表3可知，能力体系列出49项指标中有15项在本次自评调查中得分为3或低于3，即总体评价为“一般”或“较差”。分析可知15项在8个维度中的分布如下：1.实验室质控能力项共6项；2.分子生物学检验维度中4项(包括质控)3.普适性能力及综合能力共3项；4.其他专业能力3项。可见，各学科的实验室质量控制是毕业生岗位能力中相对薄弱的方面。完成实验室质量控制、解读质控结果、根据质控结果采取行动的能力，相比其他的专业岗位能力要求岗位对专业实验室中与检测结果质量相关的各环节(包括设备、试剂、环境、人员、方法等)具有全局的观念以及对检验过程具有相对透彻的理解。
3.3从医学检验岗位的专业能力需求探讨本校4年制医学检验专业教育的改革思路
篇（10）
DD的基本原理是将具有可比性的细胞在某一条件下可表达的mRNA群体通过逆转录方法变成相应的cDNA群体，以此为模板，利用一对特殊引物，即3anchor引物和5arbitrary引物，在一定条件下进行PCR扩增，得到与mRNA相对应的“标签”（tags），然后用变性聚丙烯酰胺测序胶分析其差别，将有差别的基因克隆化，进一步分析其结构与功能。DD依赖三种技术：（1）mRNA逆转录技术；（2）以特定引物进行的PCR技术；（3）DNA测序胶电泳技术。
二、DD方法的优点及其应用
用某一方法来寻找mRNA表达的差异，至少要满足下列要求：（1）在一定时间、空间里，每一个细胞约有15000种mRNA表达，其中除少数属高丰度表达外，大量的属于低丰度表达，即要求使用的方法足以显示低丰度mRNA；（2）重复性要好；（3）实验过程中能够步步验证比较（side-by-sidecomparison）；（4）得到的产物能代表相应的mRNAs或cDNAs，并能由此找到相应的cDNA序列；（5）省时，简便易行。
既往对mRNA的比较研究中多用减数杂交方法［4］（subtractionhybridization），该方法灵敏，可显示低丰度RNA，但是步骤复杂，需时较长，而且在得到最终结果前无法步步验证对照比较，故不易重复，并且需要大量的RNA作起始研究材料。这一点对RNA来源不易者（如手术活检标本）极不利［5，6］。
DD的优点在于：（1）仅需0.2μg总RNA作为起始材料；（2）可同时分析多组样品；（3）敏感性高，可检出低丰度mRNA；（4）实验周期短，约8天即可完成［7］，便于重复；（5）最突出的优点是实验过程中可步步验证比较。可简单地将DD的特点概括为“3SRV”，即“Simplicity，Sensitivity，Speed，Reproducibility，Versatility”。
DD方法因有上述优点，被广泛应用。例如：Musholt等［8］应用DD方法对手术切下的髓样甲状腺癌标本与局部转移的淋巴结进行了比较，发现了两个新的表达基因MDF-1和MDF-2，并认为这两个基因在髓样甲状腺癌的进展与转移中起了重要作用；Zuo等［9］研究溃疡性结肠炎的粘膜细胞，以正常结肠粘膜细胞作对照，找到了25个表达基因，其中有些与甲状旁腺瘤、T细胞受体-β、卵巢癌等表达的基因同源。
关于神经再生问题，Livesey等［10］发现了Reg-2基因，并认为该基因是哺乳类动物运动神经元再生的关键基因。
在骨科领域，也有许多用DD方法的研究，Ryoo等［11］找到了一个与成骨细胞表型发育有关的细胞增殖标志基因PROM-1（proliferatingcellmarker）。更令人鼓舞的是，Boden等［12］用一种新的骨形成蛋白LMP-1基因转染骨髓细胞，再作局部基因治疗，在动物实验中成功地进行了脊柱融合，LMP-1基因就是用DD方法克隆出来的。
此外，DD还应用于心血管病［13］、糖尿病［14］、胚胎发育［15］、先天性疾病［16］以及药理学［17］和眼科学［18］等。不仅用于动物和人类，还应用于植物分子生物学研究［19］。
三、存在的问题与对策
DD方法存在的问题概括起来有两方面：一是假阳性多（约50％～70％），二是得到的有差异cDN段短（约为110～500bp）。因为这两个问题，使许多研究者踟蹰不前，这也是Debouk［3］提出质疑的原因之一。
产生假阳性的原因，在于以下4个环节：（1）提取总RNA时，有染色体DNA污染，此DNA作为模板在PCR过程中被扩增；（2）从聚丙烯酰胺胶上挑选有差异条带时，实验组与对照组间信号对比不够显著；（3）在克隆阶段挑选阳性菌落时，未能排除基因克隆中的假阳性；（4）研究中多次使用PCR技术，很难避免实验室环境中的交叉污染。
解决这一问题的对策是：（1）提取RNA操作严格，得到的RNA必须经过脱氧核糖核酸酶I(DNaseI)充分消化，去除染色体DNA污染。（2）从聚丙烯酰胺胶上切取有差异条带时，首选实验与对照间信号差异显者，最好是互为有或无的关系；如果仅仅是强与弱的关系，放在次选位置上。（3）即使是差异显著地显现为一条带，也不能肯定是由某一cDNA的均一分子泳动而成，有可能是结构不同而分子量相同的cDNA共泳动（Co-migrat）的结果。对此，可用mSSCP方法区别开来［7］。也可在基因克隆挑选时，用ReverseNorthern原理作菌落原位杂交进行筛选［20］。（4）关于交叉污染问题的克服应服从分子生物学一般原则。（5）有差异基因的最终确认是用Northern杂交，如果选取了十几或几十条差异条带，用Northern杂交工作量太大，若用ReverseNorthern杂交则比较简便［20］。
DD扩增片段较短(≤500bp)，且扩增片段多位于3UTR（3untranslatedregion）范围内，很少能扩增到ORF（openreadingframe）范围内。这一缺点是由使用的特殊引物所决定的，因此DD得到的是mRNA的标签（tags）；由此带来另一个问题，即这一位于3UTR范围的标签与GeneBank数据库比较时，多数情况是与EST（expressionseguencetags）比较，常不能满足研究者的要求。
解决这一问题的对策是：（1）应用TargetedDD方法，基本原理是将5端引物延长，增加扩增片段的特异性［21，22］；或者用Stone和Wharton［23］报道的“targetedRNAfingerprinting”方法。这样有可能使扩增片段特异性高，减少假阳性率，同时可能在GeneBank数据库中得到更多结构与功能方面的信息；（2）用得到的cDN段作probe筛选相应cDNA文库，得到cDNA全序列，以便于基因结构与功能研究。
四、展望
了解细胞在某一条件下的基因表达，对阐明生命过程(如生长发育与分化、细胞凋亡与衰老等生理过程)以及炎症、肿瘤、心脑血管疾病等病理过程极为重要。DD方法在应用中被不断完善，同时也有更新的技术问世，如DNAmicroarrays［24］，把大量寡核苷酸片段排列在相似于一种大规模集成电路式的生物芯片上，一次可完成数量相当可观的反应，提供的信息是目前所有基因表达研究技术不可比拟的。但是，该方法在反应信号检测与数据处理等方面需要昂贵设备，比较起来，DD方法还是有其优越性，如果实验设计合理，技术应用得当，相信对分子生物学研究有帮助。
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篇（11）
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）10-39-03
宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤。宫颈癌死亡率每年大约26万，其中80%发生在发展中国家，HPV16和18是最常见的两种致宫颈癌的病毒，70%的宫颈癌由这两种病毒引起[1]。近年来采用阴道脱落细胞图片检查的普及，使不少宫颈癌患者能早期发现、早期治疗，提高了患者的生存期。但临床发现宫颈癌年轻化倾向明显，25～54岁人群发病率不降反升[2]。导致早期宫颈癌复发的因素较多，许多国内外学者对早期宫颈癌的各方面进行了大量的研究分析，得出了很多与早期宫颈癌复发有关的原因。本资料通过对国内外最近五年相关文献资料的研究学习，总结导致早期宫颈癌复发的分子生物学因素。
1 宫颈上皮细胞间质转化
大量的研究表明宫颈上皮细胞间质转化（EMT）与宫颈癌的形成和转移复发有密切关系。
1.1 上皮细胞间质转化（EMT）
正常的上皮细胞靠专门的细胞间粘附力紧密连接在一起，而且具有顶-基底极性。间质细胞形似纺锤体，连接松散，流动性强，具有前-后极性。上皮细胞通过复杂的程序转变成间质细胞的过程称为上皮细胞间质转化。上皮细胞转变为间质细胞后会失去原来的特性，中间会形成一种亚稳定的细胞既有上皮细胞又有间质细胞的特性，这是一种很多肿瘤都有的过程[3]。上皮细胞间质转化有3种类型，其中第3型存在于肿瘤的侵袭与转移中[4]。宫颈上皮细胞通过EMT过程，形成上皮样的癌细胞失去极性，不稳定，但是还具有上皮细胞的其他特性，经恶化和分化形成具有转移、侵袭能力的癌细胞。癌细胞离开原始位置，侵入基底膜下，侵入血管和淋巴管随血液转移到另一个地方形成转移灶。在这过程中，还有以下因素参与，干细胞机制[5]、抗吞噬作用[6]、免疫逃避、药物抗性等。
1.2 EMT的分子生物学
上皮细胞间质转化的标志性分子变化主要有：（1）E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的下调。E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的下调与早期宫颈癌的组织学分化、转移和复发成正相关[7]。（2）N-钙粘着糖蛋白、纤维连接蛋白以及波形蛋白的上调表达。波形蛋白的上调表达与早期宫颈癌的转移、复发成正相关[7]。（3）Rho GTP酶介导的细胞骨架重排。RhoC在正常宫颈组织、CIN 组织和宫颈癌组织中的表达逐渐增高，在有淋巴结转移的宫颈癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移组织，同时RhoC的沉默可以明显降低SiHa细胞的体外粘附能力和侵袭、迁移能力[8]。（4）调控EMT的基因转录因子的上调和易位，如Twist1、Twist2、Snail、Slug、Six1等。Twist1、Twist2和E47抑制E-钙粘蛋白的表达以及调节其它基因功能诱导EMT过程[9]。
1.3 EMT的信号通路
上皮间质转化的信号通路有转化生长因子（TGF-β）通路、Wnt通路、Notch通路、NF-κβ通路等。这些通路相互作用，共同调节EMT的过程[10]。
1.3.1 TGF-β信号通路 TGF-β是一组具有广泛生物活性的多肽，哺乳动物中有三种亚型TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3，其中TGF-β1是TGF-β相关的致瘤作用研究的重点，TGF-β1在肿瘤细胞中是上调的[11]。TGF-β通过细胞膜表面具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的TβR Ⅰ和TβR Ⅱ结合形成复合物。TβR Ⅰ有ALK1/TSR-1、ALK1/TSK7L、ALK5/TβRⅠ 3种受体，TβR Ⅱ只有一种受体。TGF-β与TβR Ⅱ结合形成复合物使TβR Ⅰ磷酸化，随之smads被磷酸化，诱导该复合物进入细胞核；这一信号通路受到干扰发生异常，与肿瘤的发生有重要关系[12]。与TGF-β信号通路影响细胞核内转录的因子有smad、Ras、Rho、TAK1、PP2A、β-catenin 以及NF-κβ、ATF2等。Smad7和TGF-β1与宫颈癌的发生发展、临床分期、侵润和淋巴结转移相关[13]。Stephanie等[14]的研究发现TGF-β信号通路在EMT过程中起着重要作用，从而导致癌细胞具有侵袭和转移能力。Iancu等[15]研究TGF-β通路在HPV诱导的宫颈癌中发现TGF-β通路的破坏与宫颈恶性进展有很大关系；在宫颈上皮样瘤变到宫颈癌的过程中TGF-β1表达减少；同时TGF-β1受体基因表达也下降。
1.3.2 Wnt信号通路 Wnt信号通路有经典的Wnt信号通路、Wnt/ca+通路、Wnt/PCP通路，其中经典通路最重要，通过β-catenin激活基因转录；其机理概括为WntFzdDshβ-catenin降解复合体解聚β-catenin入核TCF/LEF基因转录[16]。参与Wnt信号通路的蛋白有Frizzled、Dishevelled、Gsk3β、CK1、APC、β-catenin等。Wnt信号通路受到刺激后，APC基因突变使β-catenin降解复合物合成障碍，以及β-catenin基因突变使β-catenin不能被磷酸化和泛素化降解，从而使β-catenin降解障碍，胞浆内游离的β-catenin聚集，进入核内激活Cyclin D1、C-myc等基因转录，导致肿瘤发生。细胞核的Survivin、Cyclin D1受Wnt通路的激活[17]，影响宫颈癌的复发和转移。Survivin、P21、Cyclin D1蛋白对早期宫颈癌复发的影响中发现，三者在早期宫颈癌中的表达明显升高，并且三者共表达时与临床分期、病理分级有关；Survivin、Cyclin D1表达与早期宫颈癌复发有关，二者共同表达与盆腔淋巴结转移有关[18]。
1.3.3 Notch信号通路 Notch信号通路是肿瘤血管生成和转移的一个关键因素[19]。Notch信号通路由Notch、Notch配体（Jagged）、受体等组成，其中配体有Delta-like1、3、4，Jagged1、2，CSL，受体有Notch1、2、3、4，Notch信号通路在不同的肿瘤以及不同的阶段作用不同。Notch信号通路概括为DeltaNotch酶切ICN细胞核CLS/ICN复合体基因转录[19]。Notch1中有Notch1-RBP-Jκ路径、Notch1-PI3K-PKB-Akt路径、Notch1-IKK-NF-κB路径共同相互影响宫颈癌的发生发展[20]。Bajaj等[21]研究发现CD66+细胞中Notch信号通路对宫颈癌有重要作用。免疫组织化学分析显示Notch3在宫颈鳞癌中过度表达，Notch阳性表达的宫颈癌患者比阴性表达的患者的生存率小[22]。
1.3.4 NF-κB信号通路 基本的NF-κB信号通路包括受体、受体近端信号衔接蛋白、IκB 激酶复合物、IκB 蛋白和NF-κB二聚体。受到刺激后IκB 激酶复合物被激活，IκB 蛋白磷酸化和泛素化，IκB 蛋白被降解，NF-κB二聚体释放修饰后进入细胞核内，进行基因转录。NF-κB一般情况下位于细胞胞浆内，由两个功能亚单位P65和P50组成，与其抑制因子IκB-α和IκKB-β结合在一起。宫颈癌中IκB-α的去磷酸化使IκB-α减少，从而NF-κB的P65进入细胞核内[23]，参与细胞核内基因的表达调控。NF-κB激活对肿瘤的促进作用主要有：（1）①NF-κB激活对宫颈癌的转移有明显促进作用[24]；（2）NF-κB的GADD45α和γ表达下调使肿瘤细胞逃避凋亡；（3）NF-κB上调Cyclin D1等，促进肿瘤细胞生长。NF-κB的P65和c-IAP2的过度表达和caspase-3的下调，是宫颈癌发生发展的重要因素[24]。
2 小结
目前国内外对早期宫颈癌治疗后复发的因素研究较多，都认为复发是由于多方面、多路径的因素共同作用的结果。发现复发转移的关键因素，提高患者的生存率，减轻患者的痛苦是有必要的。除EMT、VEGF信号通路、notch信号通路等，是否可以发现更多关键的分子生物学层面的相关因素，使早期宫颈癌能更早的发现，得到早期治疗，阻断关键的分子生物路径，减少复发率。
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