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制定复习计划大全11篇

时间:2022-02-17 12:15:20

绪论:写作既是个人情感的抒发,也是对学术真理的探索,欢迎阅读由发表云整理的11篇制定复习计划范文,希望它们能为您的写作提供参考和启发。

制定复习计划

篇(1)

建议同学们做一个寒假计划表,安排好自己每天要做的事情,按照计划学习。制订的计划绝对不要有勉强的成分,这是制订计划时最忌讳的问题。寒假里,同学们 可自由安排的学习时间比较充足,每个同学可以根据自己的情况,选择记忆效果最佳的时段,来安排需要记忆的语文、英语等内容,复习效果会事半功倍。在晚上睡 觉前,可以在脑海中过一遍当天复习的知识点,效果也会很好。另外,一天中各学科的复习应该穿添加行,也利于提高效率。

2、积极调整心态,在学习上扬长补短

中考看的是考试总分,考生各科成绩均衡很重要。同学们可以利用这个寒假纠正自己的偏科习惯。纠正偏科首先要解决心态问题。比如很多考生数学不好,主要是 害怕数学,认为自己没有数学天赋,学不好。我建议同学们首先要给自己积极的暗示,要经常告诉自己“数学我一定行! ”然后在时间的分配上,很多同学都把自己不喜欢的学科放在最后,等到不得不做时,才硬着头皮做,这样更加加重了畏难情绪。建议同学们不妨把自己薄弱的学科 都放在每天复习的第一门来做,这时精力比较集中,克服困难的信心也会增强。其实只要努力,大部分学生的偏科现象都可以纠正过来。除了在弱项上多花时间外, 强项也不能放松。有的考生觉得自己平时数学不错,就很少花时间在数学上,结果到了中考时,数学成绩反而下降了。

3、按照下学期中考体育成绩的要求,进行相应的体育锻炼

篇(2)

复习计划中的时段计划,是对整个复习过程的总体规化。这里时间的安排松紧张驰必需要适度,“前松后紧”则综合不足;“前紧后松”则基础不固。我通常把它分为四个阶段:

第一阶段:知识的全面疏理回顾(约7周时间)

第二阶段:重点知识的专项考查(约2周时间)

第三阶段:难点知识的专题分析(约4周时间)

第四阶段:高频高点的筛查巩固(约2周时间)

我校数学中考复习时间大约有15周,其间还有两次大型的统一的模拟考试,一模时间一般在第二阶段后,二模时间一般在第三阶段后。在第一、二阶段中,我每周选编一张数学中考卷,作为作业或课堂练习,一方面让学生对中考数学试卷的构成有一个较为全面的了解,另一方面调查学生对各知识点的掌握情况。这个过程中,教师的工作量是极大的,也是极为重要的,尤其是对学生各知识点掌握情况的统计分析,这将为后期复习中时间与内容的合理安排提供准确依据。也许刚进入初三的复习,老师们担心这样的综合性试卷学生会不适应。这并不奇怪,适应原本就是要有一个过程的。提前让学生接触这个过程,让他们去了解中考试卷的构成,让他们明白自己学习中存在的不足,对复习的针对性是有利的。

二、 重点知识的整体教学计划

中学数学知识主要分四大领域,共29章,我们常把它分为七个板块:数与式、方程(组)与不等式(组)、函数、统计与概率、三角形、四边形、圆。这七大块内容都较庞大,且这些内容在现有的人教版课本中介绍时跨越章节较多,知识叙述较分散琐碎。因此复习中如何将其整体展现,必须要有一个专项教学计划。

以三角形为例,在人教版的教材中,“三角形”是初中数学新课程四大研究板块中“空间与图形”的主要构成部分。从整个教材的安排来看,在新人教版的29章教学内容中,“空间与图形”板块共12章,其中以三角形为中心来介绍的有6章,另有3章在其内容的介绍中对三角形的有关知识进行了补充,可见三角形在初中数学学习中的地位。从中考知识分布来看,与三角形知识有关的约占25%,是“空间与图形”板块中的大户;从教材的编排设计来看,新教材采用循序渐进、螺旋上升的方式,因此这部分内容被分得较碎,整体感较弱,并且由于一些定理被删去后,个别地方逻辑关系有些脱节,对学生证明的学习产生一些滞碍;从中考试题组织呈现方式来看,这部分内容或单独成题、或渗透于其它问题之中,或繁、或简难易不同,或动、或静组合各异,呈现方式丰富多样。鉴于三角形这块知识在教材及中考中的重要性,历来是中考总复习的一个重点,对于这一内容的复习就必须有一个专项计划。(具体复习方略见《整体贯通,重点突破――中考三角形复习方略》)

三、 难点知识的专题突破计划

在中考中,数学有几个传统难点:函数的综合应用、直线形或圆的组合题、实际应用型问题、运动变换类问题;也有一些新生易变的难点:如方案的设计与比较、数据的估算、数字或图形类探究性问题、条件或结论开放类问题等。对于这些常见的一些难点知识,复习中如何进行有效地突破,必须要有一个较细的系列专题讲座计划。

在函数板块复习中,学生对函数的组合题比较发怵。为此我特意搞了一个专题,先让每个学生都分别搜集一些自己觉得比较重要的、试卷中常见的、以及自己在解答中存有困难的,关于函数知识的问题。接着在小组交流中初步将这些问题汇总、分类,如关于求解析式的、关于求交点的、与面积有关的、关于实际问题处理的、与几何联系成份较多的等等。然后在课堂复习中,选取其中较典型的几个组合题,进行问题的构成分析,比较函数问题的“组构特征”,让学生体会综合题的组成特点,及解答时的处理手段。最后为了便于学生理解与记忆,与学生一起总结与编撰了一个口诀:“平面直角坐标系,象限符号要牢记;直线双曲抛物线,图象性质放第一;四个函数是根本,待定系数求解析;交点方程巧面积,几何建模数形理;平转翻折动点走,设定参量找联系;语言转译觅条件,板块书写最整齐;树立信心不言弃,恐函之症定可医。”取名为“愈恐函诀”。这里要注意一件事,就是这个口诀的得到一定要让学生共同参与,要让学生自主体会,要让学生感到是他们自己总结得到的,而不是教师外加给他们的,教师只是进行了一些文字方面的修改,使之变得更易上口而已。这样学生会加倍地珍惜这个口诀,会主动地有意识地去使用这个口诀。实践表明,有了这个口诀,学生对函数形成了一个总的印象,不仅了解了函数问题的一般组构特征,还明确了这些问题的解决手段。此后,学生对函数组合题地处理能力有明显提升。

篇(3)

2. 第二个记忆周期:30分钟

3. 第三个记忆周期:12小时

4. 第四个记忆周期:1天

5. 第五个记忆周期:2天

6. 第六个记忆周期:4天

7. 第七个记忆周期:7天

8. 第八个记忆周期:15天

二、背诵方法:

1. 初记单词时需要记忆的内容:

a)单词外观,b) 单词的中文释义,c) 单词的记忆法

2. 每个list的具体背诵过程(每个list按 6页,每页10个单词计):a) 背完一页(大约5分钟),立即返回该页第一个单词开始复习(大约几十秒)b) 按上面方法背完1~6页(大约在30分钟),回到第1页开始复习(两三分钟)c) 按上面同样方法背完7~12页,一个list结束

d) 相当于每个list被分为6个小的单元,每个小的单元自成一个复习系统;背一个list总共需要半小时左右的时间。

3. 复习过程:

a) 复习方法:遮住中文释义,尽力回忆该单词的意思,几遍下来都记不住的单词可以做记号重点记忆。

b) 复习一个list所需的时间为20分钟以内

c) 当天的list最好在中午之前背完,大约12小时之后(最好睡觉前)复习当天所背的list

d) 在其后的1,2,4,7,15天后分别复习当日所背的list

4. 注意事项:

a) 每天连续背诵2个list,并完成复习任务;

b) 复习永远比记新词重要,要反复高频率的复习,复习,再复习;c) 一天都不能间断,坚持挺过这15天,之后每天都要花大约1小时复习;

篇二:遗忘曲线与复习计划

遗忘曲线是由德国心理学家艾宾浩斯(H.Ebbinghaus)研究发现,人体大脑对新事物遗忘的循序渐进的直观描述,人们可以从遗忘曲线中掌握遗忘规律并加以利用,从而提升自我记忆能力。该曲线对现在学习研究界已产生重大影响。 根据我们所知道的,记忆的保持在时间上是不同的,有短时的记忆和长时的记忆两种。而我们平时的记忆的过程是这样的:

输入的信息在经过人的注意过程的学习后,便成为了人的短时的记忆,但是如果不经过及时的复习,这些记住过的东西就会遗忘,而经过了及时的复习,这些 短时的记忆就会成为了人的一种长时的记忆,从而在大脑中保持着很长的时间。那么,对于我们来讲,怎样才叫做遗忘呢,所谓遗忘就是我们对于曾经记忆过的东西 不能再认起来,也不能回忆起来,或者是错误的再认和错误的回忆,这些都是遗忘。艾宾浩斯在做这个实验的时候是拿自己作为测试对象的,他得出了一些关于记忆的结论。他选用了一些根本没有意义的音节,也就是那些不能拼出单词来的众多字母的组合,比如asww,cfhhj,ijikmb,rfyjbc等等。他经过对自己的测试,得到了一些数据。

然后,艾宾浩斯又根据了这些点描绘出了一条曲线,这就是非常有名的揭示遗忘规律的曲线:艾宾浩斯遗忘曲线,图中竖轴表示学习中记住的知识数量,横轴表示时间(天数),曲线表示记忆量变化的规律。

艾宾浩斯遗忘曲线也被称为艾宾浩斯保持曲线。它的纵坐标代表保持量,横坐标代表天数。曲线表明了遗忘发展的一条规律:遗忘进程是不均衡的,在识记的最初遗忘很快,以后逐渐变缓,经过一定的时间,几乎就不再遗忘了。这就是遗忘发展的“先快后慢”(遗忘曲线)。

主要贡献

第一个在心理学史上对记忆进行系统实验的是德国著名心理学家艾宾浩斯。他对记忆研究的主要贡献一是对记忆进行严格数量化的测定,二是对记忆的保持规律作了重要研究并绘制出了著名的“艾宾浩斯遗忘曲线”1886年他出版了《论记忆》一书。从此,记忆成了心理学研究的重要领域。 运用

复习点的确定

1. 第一个记忆周期:5分钟

2. 第二个记忆周期:30分钟

3. 第三个记忆周期:12小时

4. 第四个记忆周期:1天

5. 第五个记忆周期:2天

6. 第六个记忆周期:4天

7. 第七个记忆周期:7天

8. 第八个记忆周期:15天

背诵方法

1. 初记单词时需要记忆的内容:

a)单词外观,b) 单词的中文释义,c) 单词的记忆法

2. 每个list的具体背诵过程(每个list按12页,每页10个单词计):

a) 背完一页(大约5分钟),立即返回该页第一个单词开始复习(大约几十秒)

b) 按上面方法背完1~6页(大约在30分钟),回到第1页开始复习(两三分钟)

c) 按上面同样方法背完7~12页,一个list结束

d) 相当于每个list被分为12个小的单元,每个小的单元自成一个复习系统;每6个小单元组成一个大单元,2个大单元各自成为一个复习系统。背一个list总共需要一小时左右的时间。

复习过程

a) 复习方法:遮住中文释义,尽力回忆该单词的意思,几遍下来都记不住的单词可以做记号重点记忆。

b) 复习一个list所需的时间为20分钟以内

c) 当天的list最好在中午之前背完,大约12小时之后(最好睡觉前)复习当天所背的list

d) 在其后的1,2,4,7,15天后分别复习当日所背的list e)复习的原则

时间间隔:30秒 1分钟 5分钟 30分钟 1小时 8小时 1天 2天 6天 31天 重学节省诵读时间百分数:58.2 44.2 35.8 33.7 27.8 25.4 21.1

复习点的确定

人的记忆周期分为短期记忆和长期记忆两种。

第一个记忆周期是 5分钟

第二个记忆周期是30分钟

第三个记忆周期是12小时

第四个记忆周期是 1天

第五个记忆周期是 2天

第六个记忆周期是 4天

第七个记忆周期是 7天

第八个记忆周期是15天

以上的8个周期应用于背词法,作为一个大的背词的循环的8个复习点,可以最大程度的提高背单词的效率

背单词就找个小本子窄窄的那种,每页中间对折左边英文右边中文,每天背100个,分5组每组20个,每一个看过留下读音和拼写的印象,基本上5~8分钟一组,全部5组大概看30分钟,最好不要超过40分钟,然后再从第一组再看,每天一百个新的,看过的按记忆周期在第2、4、7、15天重新复习,基本每天进行的300~400个单词记忆。

注意事项

a) 每天连续背诵2个list,并完成复习任务;

b) 复习永远比记新词重要,要反复高频率的复习,复习,再复习;

c) 一天都不能间断,坚持挺过这15天,之后每天都要花大约1小时复习;

时间表(左边序号表示第几天,*号之后表示复习内容)

第1天 list12 *list12

第2天 *list12 list34 *list34

第3天 *list34 list56 *list56

第4天 *list12 *list56 list78 *list78

第5天 *list34 *list78 list910 *list910

第6天 *list56 *list910 list1112 *list1112

第7天 *list12 *list78 *list1112 list1314 *list1314

第8天 *list34 *list910 *list1314 list1516 *list1516

篇(4)

“凡事预则立,不预则废。”做什么事有了计划就容易取得好结果,反之则不然。有良好的复习计划能使我们的复习有明确的方向,避免盲目性,使复习工作循序渐进,有条不紊,从而提高复习的有效性。2013届的高考备战已经开始,为增强高三政治复习的计划性、针对性和有效性,帮助学生提高政治复习的效率,特制订如下复习计划。

一、一轮复习扎扎实实,夯实基础

时间安排:2012年7月—2013年2月上旬。

主要目的:牢固掌握考试范围内的每个考点,做到考点问题化、系统化、清晰化,夯实学科基础。

具体可分以下三个环节。

第一,以2012年的《考试大纲》为线索,以教材为依据,按考点逐个进行复习。在复习中一方面抓单个考点的复习,注意知识的广度和深度,另一方面抓知识的形成过程,强化知识的内在联系。例如,在讲价格这个考点时,一方面要把影响价格的各种因素都讲清,另一方面要在讲清价格变动的原因的基础上,进一步讲解稳定物价的措施,即是什么、为什么、怎样做。

第二,进行梯级训练。所谓梯级训练就是将练习题分为三种:第一种是以课时为单位的基础知识测试和基本能力训练;第二种是以单元为单位的综合训练;第三种是完成对应的近两年的高考题。

第三,整理复习提纲。每个模块复习中要按考点整理一轮复习提纲,提纲内容是把每个模块的每个考点问题化、层次化,并对问题进行解答,整理好之后每人一份,这样会方便学生复习,使学生更好地掌握基础知识。

二、二轮复习全面提升学科能力,掌握解题方法

时间安排:2013年2月下旬—2013年5月上旬。

主要目的:提高应用能力,掌握解题方法。

具体可分为以下四个环节。

第一,复习主干知识,构建知识体系。与第一轮把基础知识作为重点的复习不同,二轮复习更加重视知识网络的梳理,强调知识的内在联系,注重学生应用能力的提高。如果说一轮复习更加强调重点中的两点,那么,二轮复习则是更加强调两点之中的重点;所以这轮复习要抓住重要主干知识,强化知识间的联系,构建知识体系。要把每个专题中重要的特别是与热点有关的主干知识再强调和复习。而知识的整合可以打破考点、课、单元的限制,以某个知识点为主把相关知识串起来,抓住知识之间的内在联系,形成知识网络。如在讲到企业的经营时可以把整本书中关于企业的做法概括一下,可以从第一单元价值规律的角度、第二单元公司经营的角度、第四单元市场经济的角度,又好又快的角度、对外开放的角度等来整理。这样做能帮助学生更好地理解知识间的联系,构建知识体系,从而宏观把握知识。

第二,讲解典型例题,提高解题能力。讲解典型例题特别是解剖高考真题,把握命题趋势。通过对近几年高考试题的分析,全面把握高考命题角度,帮助学生多方位掌握知识,同时掌握解题方法,提高解题能力。

第三,关注社会生活中的热点问题,实际联系理论。如果说一轮复习的做法是理论联系实际,那么二轮复习的主要做法则是实际联系理论。通过对当年热点、重点和具有长效性意义问题的分析、梳理,帮助学生进一步巩固基础知识,进一步做好知识的条理化、系统化、网络化工作,切实掌握主干知识和重难点知识,从而提高运用知识分析和解决问题的能力,增强解题技巧,达到举一反三、融会贯通的效果。

第四,总结试题特点,掌握解题规律。在高三政治备考中一定要加强解法指导,可以在平时解题中穿插解法指导,也可以单独开设解法指导课。从选择题方面看,选择题归纳为体现说明类、措施启示类、计算类、漫画类等。选择题通常会设置以下五种陷阱:1.以假乱真;2.张冠李戴;3.混淆主次;4.因果倒置;5.逆向选择。考生可根据选择题设置陷阱的特点来逐一破解。从非选择题方面看,非选择题有六类即原因依据类材料题、意义类材料题、措施类材料题、体现类材料题、启示类材料题、认识评析类材料题。不管哪类试题,从宏观上都可以采用“三步破解法”解答。第一步,逆读。即先读设问,然后带着设问中的问题读材料,边读边思考找出材料中的关键词。第二步,确定知识范围。第三步,组织答案。在训练的基础上,对每一种题型进行概括总结,形成一套便于学生掌握和运用的解题方法和套路。同时在训练的时候一定要让学生动手把答案写下来,在教学中提高,在训练中积累。

三、三轮复习考前热身,模拟训练

时间安排:2013年5月中旬至高考前。

主要目的:巩固提高,全面提升答题能力。

具体可分为以下四个环节。

第一,筛选高效信息,确定主攻方向。

第二,抓纲务本,回归教材。

第三,精选习题,考前热身训练。

篇(5)

    在职高高考中,英语占了很大的比例。学生如果在英语上获得优异的成绩,那么就很容易考入自己理想的大学。因此作为一名英语老师,要让自己的学生在高考英语中取得优异的成绩,必须搞好高考前的英语复习。那么怎样去搞好高考英语复习呢?拟定一份切实可行的复习计划是非常重要的一步。我从事职高英语教学工作已经有十几年了,先后承担了四届高考班的英语教学工作。对于高考英语复习计划的拟定,我有以下几点个人体会,希望与各位同仁共勉。

    一、选择适合职高学生的复习书籍和资料是拟定计划的前提

    职高英语教材很多,在学完基础版和提高版之后,找到一本合适的复习书是搞好英语复习的必要条件。一旦有了合适的复习书,我们就可以按照书上的章节来拟定相应的复习计划。职高学生通常英语的学习基础较差,因此找的书一定要符合学生的实际。既不要太难,也不要太易。我特别不赞同有些老师去选择普高那边的书籍和资料,认为能给学生一定的难度,那么学生做高考就容易了。实际上,这是错误的想法,因为普高的书籍和资料,对于职高学生学起来太难,时间一长,他们就对英语复习产生了厌倦情绪,有的甚至放弃。这些年来,我一直用《职高对口招生考试和毕业会考丛书3+X》,人教版的。在这本书中,对高考所有考点作了系统的归纳,符合职高学生的实际。除此之外,这本书还设置了相关的作业和试卷,以备学生练习和测试。学生们在复习过程中很喜欢这本书,因为他们能够时时找到成就感。

    二、拟定计划

    由于高考复习的时间很有限,我们要取得良好的复习效果,就必须要拟定可行的复习计划。这是一件要认真对待的事情,千万不要认为只是一个计划,从而草草了事。有了复习书籍和资料后,我们要多花一点时间认真阅读复习书籍和资料,切实了解各章节的内容,一定要做到心中有数。另外还必须做到以下四点:

    1.认真学习考纲。考纲是高考复习的指挥棒,认真学习考纲内容有利于复习。作为一名老师,针对英语教学的实际,去认真学习考纲,从而明确考纲的具体内容并且熟记于心,更有利于拟定高考复习计划。通过学习,我们就能够更好地明白哪些是今年的高考重点和难点,哪些既不是重点也不是难点;哪些内容是自己在教学中曾经忽略掉的或没有引起高度重视的;哪些内容是自己在平时教学中做得比较好;哪些是自己所教班级学生最难掌握的或已经掌握的。充分认识考纲有利于在有限的时间内复习好高考知识点,从而提高复习质量。

    2.认真研究高考题型。近几年来,职高英语高考题型发生了很大的变化,认真研究题型有利于更好拟定复习计划。因为题型可以告诉我们每个题的分值多少和难易;题型的变化可以使我们迅速地转变复习的方向,同时便于合理安排时间,使复习事半功倍。例如2010年后,高考题型变动较大:完形填空由原来的一道题变成了两道,每题10个小题,难度减小;阅读理解由原来的4道题(各5小题)变成了5道题(各4小题);翻译的汉译英由原来的译整句变成了填空;原来的短文改错全部变成了情景对话。如果你不去研究题型,可能就会拟定不出实用的计划,从而影响复习效果。

    3.仔细分析学生的学情。除了以上几点外,老师对所教学生的学情分析也是非常重要的。我们根据学生的学情去考虑他们学习的层次性,从而采用有效的教学方法。这样我们就可以教给他们容易接受的学习内容,使其学有所得,从而激发他们学习和复习英语的浓厚兴趣,便于复习计划的有效实施。

    4.采取新颖性策略。职高英语复习备考不仅仅是一个英语语言知识和语法知识再现的过程,一个语言强化训练的过程,还应该是一个持续学习的过程。因此,教师要多动脑筋,多想办法,在选择材料时注意内容要新,在组织训练时形式要新,要经常性变换方法和模式,让学生在此过程中始终有一种“新”的感觉,这才能让学生继续培养和保持高昂的学习兴趣,在吸收新知识、开阔视野的同时英语语言能力和应试能力才能不断得到强化和提高。多年的实践证明,新颖性策略符合学生的心理,符合认知规律,效果很好。复习备考是要讲究科学的,任何违反科学,急功近利、急于求成的冒进行为和做法都是行不通的。

篇(6)

【关键词】 碘化N-正丁基氟哌啶醇;血管平滑肌细胞;缺氧;增殖;反义寡核苷酸;早期生长反应基因-1

[Abstract]Objective : To investigate the effect and mechanism of N-n-butyl haloperidol iodide(F2)on hypoxia-induced proliferation of rat thoracic aortic smooth muscle cells(SMCs)in vitro, and to indicate the relationship between the effect of F2 and the express of early growth response gene-1(egr-1). Methods: Passages 3 to 4 of cultured rat thoracic aortic SMCs were used to establish hypoxia models. The viability of VSMC was detected by mono-nuclear cell direct cytotoxicity assay. The cell cycle was analyzed by flow cytometry. The levels of Egr-1 and PDGF-A were assessed by Western blot. Results: Compared with the hypoxia group, the absorption value,proliferation index and the levels of Egr-1 and PDGF-A of antisense oligodeoxynucleotide group and F2 group were all decreased. Conclusion: The inhibition of F2 on hypoxia-induced proliferation of rat thoracic aortic SMCs in vitro is mediated by Egr-1.

[Key Words]N-n-butyl haloperidol iodide; vascular smooth muscle cell; Hypoxia; proliferation; antisense oligodeoxynucleotides; early growth response gene-1

碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)是本实验室设计合成的一种新型氟哌啶醇季铵盐衍生物,已有实验表明它对心肌缺血再灌注损伤以及心肌细胞、内皮细胞缺氧复氧损伤具有保护作用,且这种作用与抑制早期生长反应基因-1(egr-1)mRNA及蛋白表达水平的过度升高有关[1~6]。缺氧可致血管平滑肌细胞(VSMCs)的过度增殖[7],进而导致一系列血管增生性疾病。本研究拟在观察F2对心脏整体、离体以及内皮细胞的作用基础上,进一步观察F2对缺氧诱导的VSMCs增殖的作用及其与Egr-1的关系。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

倒置相差显微镜(上海光学仪器厂,中国);超净工作台(苏州净化设备有限公司,中国);CO2培养箱(Thermo Forma公司,美国);凯基MTT细胞增殖检测试剂盒以及细胞周期检测试剂盒(凯基生物科技发展有限公司,中国);multiskan spectrum酶标仪(Thermo Labsystem公司,芬兰);FACSCalibur流式细胞仪(Becton Dickinson公司,美国);聚丙烯酰胺凝胶电泳相关材料(Bio-RAD公司,美国);硝酸纤维素膜(Invitrogen公司,美国);F2(汕头大学医学院药物研究室化学组合成,结构由中国科学院上海有机化学所鉴定,实验前用聚乙二醇溶解配成);胎牛血清(杭州四季青生物制品公司,中国);M199培养基、胰蛋白酶(GIBICO公司,美国);Egr-1 1抗以及血小板源生长因子-A(PDGF-A)1抗(Santa Crutz公司,美国);α-SMactin 1抗、辣根过氧化物酶标记2抗、即用型SABC免疫组化染色试剂盒、3,3′-二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,中国);Egr-1反义寡核苷酸(AD-ODN)、正义、错义寡核苷酸(大连Takara公司,中国)。

1.2 大鼠胸主动脉VSMCs培养及鉴定

SD大鼠断颈处死,放血,无菌条件下取出胸主动脉,去除血管内、外膜,将中膜组织以贴块法行原代培养,细胞融合后用质量分数0.25%的胰蛋白酶消化传代。倒置显微镜下观察,呈现VSMCs特征性的“峰”、“谷”状生长。小鼠抗大鼠α-SMactin单克隆抗体免疫细胞化学鉴定,阳性细胞达95%以上,实验用第3~4代细胞。

1.3 寡核苷酸的细胞转染方法及荧光标记检测

平滑肌转染前1d换用无血清无抗生素培养基培养,先将脂质体LipofectamineTM 2000 Reagent溶入转染液(M199培养基)中,每800μL转染液稀释32μL脂质体,轻轻混匀,室温孵育5min。同时将AD-ODN、正义或错义寡核苷酸也溶入转染液中,每800μL转染液稀释16μg寡核苷酸,轻轻混匀,然后将两者混合,室温孵育20min,加入到6400μL的M199培养基中,用此溶液换掉原培养基,继续培养36h后进行下一步实验。将5′端有异硫氰酸(FITC)标记的AS-ODN转染VSMCs(步骤同上),入37℃、体积分数5%的CO2细胞培养箱中避光培养8h,然后在488nm的激发光源下观察荧光标记的AS-ODN转染情况。

1.4 实验分组

取3~4代SD大鼠胸主动脉VSMCs随机分为对照组;缺氧组;F2组(1×10-6mol/L);PEG组(1×10-6mol/L);AS-ODN组;正义寡核苷酸组;错义寡核苷酸组;脂质体组(寡核苷酸的转染按其细胞转染方法进行)。所有组用无血清培养基孵育24h后换成体积分数10%的胎牛血清培养基,除对照组在37℃、5% CO2普通细胞培养箱内孵育16h外,其余组均放入自制的缺氧盒[5]内缺氧16h。

1.5 MTT比色法测定VSMCs增殖

将细胞消化制成5×107个/L的细胞悬液,以每孔100μL的量接种于96孔培养板中,用含10%胎牛血清的M199培养液置37℃、5% CO2细胞培养箱中培养24h,按照实验分组要求培养后,每孔加入50μL 1×MTT溶液,在37℃继续孵育4h后吸出上清液,每孔加入150μL DMSO,用平板摇床摇匀,用酶标仪在550nm波长处检测每孔的吸光度(A值)。

1.6 VSMCs细胞周期的测定

取第3代生长良好的VSMCs,按实验分组要求培养后分别消化,离心,收集细胞于离心管,再用PBS洗涤细胞1次(106g,离心10min),收集并调整细胞浓度为1×109/L的细胞悬液,用体积分数70%的冷乙醇固定,4℃保存。染色前用PBS洗去固定液,加100μL RNaseA 37℃水浴30min,再加入400μL PI染色混匀,4℃避光30min,上机检测。

1.7 Egr-1及PDGF-A蛋白测定

Egr-1蛋白测定用的是缺氧2h模型,PDGF-A蛋白测定用的是缺氧16h模型。做完模型后培养瓶中的细胞用PBS洗涤2次,0.25%的胰蛋白酶和质量分数0.2%的乙二胺四乙酸(1∶1)消化收集,再加入PBS漂洗2次,106g,离心10min(4℃),弃上清液,沉淀中加入适量的单去污裂解液,冰上裂解30min。15294g,离心10min(4℃),取上清液,采用Bradford法测定蛋白浓度。加入5×上样缓冲液,100℃变性4min后备用。

配制质量分数10%(测Egr-1时)或15%(测PDGF-A时)的分离胶与质量分数5%的浓缩胶,完全凝固后,每泳道加70μg蛋白样品,经电泳(125V,70min)和转膜(100V,60min)后,在封闭液中封闭2h,然后加入1∶400的Egr-1或PDGF-A抗体稀释液,4℃过夜,缓冲液洗膜3次,每次10min,再加1∶2000的二抗稀释液室温孵育2h,洗膜3次,每次10min,加化学发光试剂于膜上,反应1min,压片,曝光后将胶片进行显影、定影。

1.8 统计学处理

结果以x±s表示,用SPSS 11.0统计软件进行分析,用单因素方差分析进行组间比较。

2 结果

2.1 AS-ODN在VSMCs中的转染

同一视野下,SMCs所在位置与FITC标记的AS-ODN发光的位置相一致,成功转染入VSMCs(图1)。

2.2 F2及AS-ODN对VSMCs增殖的影响

与缺氧组比,F2、AS-ODN组的吸光度A值均下降(P

2.3 F2及AS-ODN对VSMCs细胞周期的影响

与缺氧组比,F2、AS-ODN组均可使S+G2/M期的细胞比例下降,G0/G1期的上升(表2)。表2 各组VSMCs的细胞周期(略)

2.4 F2及AS-ODN对VSMCs的Egr-1和PDGF-A蛋白表达的影响

与缺氧组比,F2、AS-ODN组的Egr-1以及PDGF-A蛋白表达均减少(图2、3)。

3 讨论

F2可改善心肌缺血再灌注损伤;心肌细胞、内皮细胞缺氧复氧模型上,可降低egr-1 RNA及蛋白表达水平,减弱细胞炎症反应的程度。F2对缺血再灌注心肌组织损伤和缺氧复氧心肌、内皮细胞损伤具有良好的保护作用。

Egr-1与血管损伤后VSMCs增殖与再生密切相关[8,9]。冠状动脉扩张后再狭窄的发生机制与egr-1基因转录的激活有着密切联系。Khachigian等[10]用靶向egr-1基因的AS-ODN方法明显抑制了球囊扩张术后再狭窄的发生。Santiago等[11]用靶向egr-1基因的AS-ODN在机械损伤的模型上,证实了这种损伤所致VSMCs增殖与再生是egr-1依赖性的。实验证实AngⅡ上调VSMCs的PDGF-A链表达也是egr-1依赖性的[12]。实验中,我们检测了不同缺氧时间VSMCs增殖情况以及不同缺氧时间Egr-1蛋白的表达水平,发现在缺氧16h VSMCs增殖最明显,而Egr-1表达在缺氧1h后明显升高,2h达高峰,此后逐渐下降,直到20h仍然高于对照组。因此,我们将靶向egr-1 mRNA的AS-ODN转染入VSMCs,在缺氧模型上观察到AS-ODN组VSMCs的过度增殖受到明显抑制,证实了egr-1与缺氧所致的VSMCs增殖的因果关系,这与文献报道相一致。

PDGF可促进多种细胞的分裂增殖。研究表明,PDGF作为egr-1的下游基因,在VSMCs增殖中发挥关键作用[8]。本实验表明,用靶向AS-ODN抑制egr-1基因的表达后,PDGF-A表达也明显下降,提示PDGF诱导VSMCs的增殖与egr-1有关。通过MTT比色法,表明F2、AS-ODN组均能抑制VSMCs增殖。流式细胞实验结果表明,F2、AS-ODN组均能降低缺氧VSMCs的S期和G2/M期细胞的比例,增加G0/G1期细胞比例,抑制VSMCs的过度增殖。Western blot证实,F2、AS-ODN组能抑制PDGF-A的表达。这进一步证实了F2通过抑制Egr-1的表达来抑制缺氧诱导的VSMCs的过度增殖。

【参考文献】

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[10]Khachigian LM. Catalytic oligonucleotides targeting EGR-1 as potential inhibitors of in-stent restenosis[J]. Ann N Y Acad Sci, 2001, 947: 412-415.

篇(7)

 

胃癌是临床常见的消化道恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率较高,严重威胁患者的健康。早期胃癌无特异性症状,临床诊断发现时大多已经发展为晚期癌症,失去了手术治疗的最佳时机。以2-3种药物联合化疗是目前临床治疗晚期胃癌的主要方法,可以延长患者的生存期,提高其生活质量。晚期胃癌的临床化疗方案较多,目前尚无公认的标准化方案[1]。因此,寻找一种安全、高效、经济的化疗方案,是目前临床关注的焦点和亟需解决的问题。本文回顾性分析了2009年6月-2010年6月我院肿瘤科采用DOF [多西他赛(docetaxel),奥沙利铂(oxaliplatin),氟尿嘧啶(fluorouracil)] 方案治疗的54例晚期胃癌患者的临床资料,旨在为临床治疗晚期胃癌提供参考。现报告如下。

1 资料与方法

1 一般资料 2009年6月-2010年6月我院肿瘤科收治的晚期胃癌患者共54例,男33例,女21例;年龄37-72岁,中位年龄58岁;临床分期:ⅢB期13例,Ⅳ期41例;病理分型:低分化腺癌23例,中分化腺癌16例,粘液腺癌7例,印戒细胞癌4例,管状腺癌3例,未分化癌1例;转移部位:腹腔淋巴结转移27例,左锁骨上淋巴结转移16例,肝转移4例,肺转移2例,同时发生两处及以上转移5例;初治35例,复治19例(近一个月未接受手术或药物治疗),Kamofsky评分≥60分,预计生存期>3个月。所有患者均有可评价病灶,肝肾功能、血常规及心电图等指标均正常,无明确化疗禁忌,签署书面知情同意书后行DOF方案治疗。

1.2 治疗方法 多西他赛(艾索,恒瑞药业;泰索帝,赛诺菲-安万特)75mg/m2 ,静脉滴注1h,d1;用药前一天给予地塞米松口服,8mg/次,每天2次,连用3天,防止过敏反应和水钠潴留。奥沙利铂(艾恒,恒瑞药业;乐沙定,赛诺菲-安万特)130mg/m2,加入5%葡萄糖注射液500ml静脉滴注3h,d2。氟尿嘧啶(上海旭东海普药业)500 mg/m2,静脉滴注6-8h,d2-d6。21天为一个周期,连用2个周期后对疗效和毒副作用进行评价。化疗期间给予5-HT受体拮抗剂,预防恶心、呕吐等消化道反应。每周复查血常规,每周期前后检查肝肾功能和心电图。

1.3 疗效评价 依据WHO抗肿瘤药物疗效标准[2]对近期疗效进行评价。标准包括:(1)完全缓解(CR):目标病灶均消失并维持4周以上,无新病灶出现;(2)部分缓解(PR):基线病灶最大径之和至少缩小30%并维持4周以上;(3)疾病稳定(SD):基线病灶最大径之和减少<30%或增加<20%;(4)疾病进展(PD):基线病灶增加>20%或出现新病灶。近期有效率(ORR)=(CR+PR)/总数×100%,近期疾病控制率(DCR)=(CR+PR+SD)/总数×100%。毒副作用依照WHO抗肿瘤药物毒副反应标准分为0-Ⅳ度。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0软件处理数据,采用χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 近期疗效 化疗2个周期后,CR2例,PR30例,SD13例,PD9例,ORR为59.26%,DCR为83.33%。初治者的ORR和DCR分别为68.57%、88.57%,高于复治者的42.11%、73.88%,差异均无统计学意义(χ2=3.573,P=0.059;χ2=1.965,P=0.161)。DOF方案治疗晚期胃癌的近期疗效见表1。

表1  DOF方案治疗晚期胃癌的近期疗效(n/%)

2.2 不良反应 DOF治疗方案的不良反应以脱发、胃肠道反应和骨髓抑制为主。发生率排在前三的不良反应分别为:脱发(100%)、白细胞减少(85.19%)和恶心呕吐(75.93%)。详见表2。

表2  DOF方案治疗晚期胃癌的不良反应

 3 讨论

奥沙利铂是第3代铂类抗肿瘤药,通过烷基化复合物作用于DNA而抑制其合成和复制,从而导致肿瘤细胞的死亡。与传统药物顺铂、卡铂相比,奥沙利铂具有抗癌谱广、水溶性好、副作用低等优点。氟尿嘧啶通过干扰DNA的合成而发挥抗肿瘤疗效,治疗胃癌等消化道癌效果较好,是众多胃癌治疗方案的基础药物,其单独治疗胃癌的有效率约为21%[3]。氟尿嘧啶和奥沙利铂在治疗晚期胃癌方面有很好的协同作用,多在临床联合使用[4]。多西他赛是一种半合成的紫杉烷类抗肿瘤药物,可以结合微管蛋白,促进其聚合成微管并能抑制微管解聚,形成稳定而无功能的维管束,从而干扰癌细胞的有丝分裂。由于其作用机理独特,对多种癌症有效,近年来受到临床的青睐。国外有研究组应用多西他赛联合奥沙利铂治疗晚期胃癌有效率达56%,中位生存期9个月,中位进展期6.6个月[5]。

本组应用奥沙利铂联合氟尿嘧啶、多西他赛治疗晚期胃癌54例,近期有效率为59.26%,疾病控制率为83.33%;初治者分别为68.57%、88.57%,高于复治者的42.11%、73.88%;中位疾病进展时间为7.4个月,中位生存期为10.3个月。结果与相关研究报道相似[6]。不良反应主要为脱发、胃肠道反应和骨髓抑制。脱发发生率为100%,但主要以Ⅰ度(85.19%)为主;Ⅲ-Ⅳ度白细胞减少率为12.96%(7/54),恶心呕吐发生率为75.93%(41/54)。经对症治疗后,患者均能完成化疗,无因不良反应而终止治疗。

综上所述,DOF方案治疗晚期胃癌的近期疗效较好,不良反应可以耐受,值得在临床参考使用。

参考文献

[1] 李春华,马廷行.DOCLF方案治疗晚期胃癌的安全性研究[J].新医学,2007,38(9):586-588.

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篇(8)

[中图分类号] R512.62 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2017)05(c)-0079-03

[Abstract]Objective To study the curative effects of Adefovir ester (ADV) joint Lamivudine (LAM) and Entecavir (ETV) monotherapy in patients with cirrhosis after hepatitis.Methods 120 cases who had hepatitis B cirrhosis treated in our hospital between December 2012 to October 2015 were seleeted,they were randomly divided into control group and observation group,with 60 cases in each group,patients of two groups were given conventional support treatment,control group was given Entecavir treatment,the treatment group was given Adefovir ester joint Lamivudine treatment,after 1 month,2 months, 6 months,1 year treatment, hepatitis B virus DNA(HBV DNA) turn rate and hepatitis B e antigen (HBeAg) serological conversion rate of two groups were compared,before and 1 year after treatment Child-Pugh score,albumin (propagated),total bilirubin (TBiL),alanine aminotransferase (ALT),prothrombin activity(PTA) level,and the presence of adverse reactions after treatment of two groups were compard.Results Two groups of patients in the treatment of 1 month to 1 year was compared with HBV-DNA overcast rate,HBeAg serological conversion rates,there was no statistically significant difference (P>0.05);before treatment and after 1 year of therapy,ALT,TBiL level,Child scores of the two groups were significantly lower,PTA level increased significantly,the difference was statistically significant(P0.05).Conclusion Adefovir ester and Lamivudine combination therapy of hepatitis B cirrhosis of the liver curative effect is distinct,and safe and worthy of clinical promotion.

[Key words]Adefovir ester;Lamivudine;Entecavir;Hepatitis B cirrhosis of the liver

慢性乙型病毒性肝炎治目标为抑制病毒复制、改善肝纤维化、延缓病情向肝硬化及肝癌发展,从而降低死亡率[1]。我国有关慢性乙肝防治指南中提到:目前抗病毒药物主要包括核苷类似物及干扰素;而干扰素会导致肝衰竭,对失代偿期肝硬化患者禁用,代偿期肝硬化患者也应慎用[2-4]。核苷类似物目前常用的有恩替卡韦、阿德福韦酯等,由于目前病毒耐药率逐渐上升,是否能选择两种无交叉耐药的药物联合抗病毒治疗,临床并无定论。本研究以阿德福韦酯和拉米夫定联合治疗乙肝肝硬化,观察其临床效果及安全性,旨在为乙肝肝硬化患者抗病毒治疗提供参考依据。现将结果报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2012年12月~2015年10月在我院治疗的120例乙肝肝硬化患者,诊断均符合慢性乙型肝炎防治指南(2015年版)标准[2];排除非初治患者、疑有或合并肝癌患者、妊娠或哺乳期妇女;所有患者均签署知情同意书。按随机数字表法分为对照组和观察组各60例。观察组男性36例,女性24例,年龄41~65岁,平均(48.1±2.6)岁,病程39~82个月,平均病程(68.1±10.2)个月;对照组男性32例,女性28例,年龄43~68岁,平均(47.9±3.1)岁,病程41~79个月,平均病程(66.3±11.5)个月。对比两组患者相关资料,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2治疗方法

两组患者均予常规对症支持治疗。对照组予恩替卡韦(百时美施贵宝中国投资有限公司,规格0.5 mg,国药准字H20052237) 0.5 mg/次,1次/d治疗。治疗组予阿德福韦酯(葛兰素史克中国投资有限公司,规格10 mg,国药准字H20050651) 10 mg/次,1次/d;联合拉米夫定(葛兰素史克中国投资有限公司,规格5 mg) 100 mg/次,1次/d。两组均治疗1年。

1.3观察指标

在治疗前及治疗1个月、2个月、半年、1年时,检测患者HBV-DNA转阴率和HBeAg血清学转换率,比较患者Child-Pugh评分,检测患者ALB、TBiL、ALT、PTA水平。其中ALB、TBiL、ALT、PTA使用日本日立公司全自动分析仪7100,HBV-DNA使用瑞士罗氏公司Light Cyler荧光定量PCR仪、当HBV-DNA

1.4统计学方法

SPSS 19.0统计软件对数据进行统计分析,计量资料以(x±s)表示,用t检验;计数资料以率(%)表示,用χ2均数±标准差检验。当P

2结果

2.1两组各期HBV-DNA转阴率和HBeAg血清学转换率比较

比较两组患者治疗1个月~1年后HBV-DNA转阴率、HBeAg血清学转换率,差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。

2.2两组Child-Pugh评分及ALB、TBiL、ALT、PTA比较

组内比较,治疗前及治疗1年后各组比较ALT、TBIL水平及Child评分均明显降低,PTA水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05)(表2)。

2.3不良反应

两组患者在治疗期间耐受性均可,偶有头痛、腹痛、腹泻、恶心等症状,未经特殊诊治,均可自行好转,两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。

3讨论

大量研究证实乙肝肝硬化患者长期接受抗病毒治疗能获得病毒学、生化应答、血清学、组织学的明显改善。持续性抑制病毒的复制,能减轻肝细胞坏死性炎症发生,能改善肝功能,延缓相关并发症如腹腔积液、消化道出血、肝性脑病等的发生,以改善患者预后[5-6]。

恩替卡韦被列入乙肝肝硬化治疗首选药物[7],为一种鸟嘌呤核苷类似物,在细胞内通过磷酸化变为三磷酸盐与三磷酸脱氧鸟嘌呤核苷竞争HBV多聚酶,以抑制HBV DNA病毒复制。有报道,恩替卡韦因高效能和高耐药基因屏障的原因,其耐药率极低,5年低于2%;耐药变异可在rtL180M和rtM204V的基础上联合rtS202、rtM250或rtT184中3个位点中1~3个的氨基酸而替代变异。阿德福韦酯是无环磷酸化单磷酸腺苷核苷类似物,在细胞激酶作用下能被磷酸化为阿德福韦二磷酸盐,通过与脱氧腺苷三磷酸途径及整合病毒DNA引起DNA链延长中止这两个方式来抑制HBV DNA多聚酶[8-11]。长期使用阿德福韦酯治疗后出现耐药可致病毒载量反弹,进而加重乙肝病情,致肝功能失代偿,甚至出现死亡。拉米夫定为首个被批准治疗慢性乙肝的核苷类似物,能在细胞内磷酸化为拉米夫定三磷酸盐,以环腺苷磷酸的形式嵌入到HBV DNA中,使DNA链终止合成;长期服用拉米夫定可致HBV对其敏感性降低;在治疗中常见有C区rtM204I/V/S及B区rtV173L及rtL180M变异[12-13]。阿德福韦酯联合拉米夫定治疗乙肝肝硬化能使基因屏障提高,这对拉米夫定耐药的慢性乙肝患者能有效的抑制HBV DNA,且二者联合用药后对阿德福f酯的耐药发生率更低,还能预防耐药的发生[14-15]。本研究结果显示,两组患者治疗1个月~1年后HBV-DNA转阴率、HBeAg血清学转换率,差异无统计学意义(P>0.05),提示两组抗病毒治疗效果差别不大。组内比较,治疗前及治疗1年后各组ALT、TBiL水平及Child评分均明显降低,PTA水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);提示两种治疗后均能改善患者肝功能,但联合用药组对改善患者肝功能及控制临床症状有更好疗效。对于用药安全性,两组患者均未发生严重不良反应。

综上,阿德福韦酯联合拉米夫定治疗乙肝肝硬化较单药恩替卡韦疗效相当,但联合用药较单药治疗发生病毒耐药率低,推荐临床联合用药。

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篇(9)

目的: 观察在单一剂量5氟尿嘧啶(5FU)治愈荷瘤小鼠过程中外周血细胞数量的变化与肿瘤结节缩小之间的关系, 为进一步研究化疗治愈肿瘤的作用机制奠定基础。方法: 利用单一剂量5FU治愈荷瘤野生型C57BL/6小鼠模型, 荷瘤小鼠腹腔内分别注入25、 75、 135 mg/kg的5FU, 等量生理盐水对照, 确定5FU治愈肿瘤的量效关系。然后, 再取6只荷瘤小鼠, 分别在75 mg/kg 5FU治疗前3 d、 治疗后第1、 4、 7、 11、 15、 28天内眦静脉取血, 进行血常规检测, 分析外周血白细胞、 血红蛋白和血小板的变化与荷瘤小鼠肿瘤结节缩小之间的相关性。结果: 75、 135 mg/kg的5FU均可使荷瘤小鼠的肿瘤结节在治疗后1周内逐渐缩小、 直至消退, 因此5FU治愈荷瘤小鼠的最低有效量为75mg/kg。75mg/kg 5FU治疗后第1天外周血白细胞降为(5.0±1.1)×109/L, 并持续到化疗后第4天, 与治疗前(9.5±1.58)×109/L比较差异有统计学意义(P

【关键词】 5 氟尿嘧啶(5FU) 肿瘤治愈 淋巴瘤 C57BL/6小鼠 血小板计数

[Abstract] AIM: To investigate the relationship between the alterations of complete blood counts and tumor shrinkage during tumor rejection induced by a high dose of 5FU in C57BL/6 mice. METHODS: Wild type C57BL/6 tumorbearing mice were treated with different doses of 5FU intraperitoneally. 75 mg/kg 5FU was the minimal effective dose of 5FU that could cure the tumorbearing mice. Then another 6 tumorbearing mice were treated intraperitoneally with 5FU (75 mg/kg). Blood samples were obtained from orbital venous sinus on different days before and after 5FU treatment, and then complete blood counts were performed and the relationship between the alterations of blood counts and tumor shrinkage after 5FU treatment was analyzed. RESULTS: Tumor sizes decreased steadily and tumors disappeared within the first week after 5FU treatment; and at the same time 75 mg/kg 5FU also had side effects on peripherial blood cells. The number of WBC significantly decreased from the first day after 5FU treatment (P0.05). Later it decreased again and it couldn’t recover back to normal level at the 28th day after 5FU treatment (P

[Keywords]fluorouracil (5FU); tomor rejection; lymphoma; C57BL/6 mice; blood platelet count

5氟尿嘧啶(5FU)是临床常用的化疗药物, 属细胞周期特异性抗恶性肿瘤药物。近年研究发现5FU在体内可转变为5FU脱氧核苷酸、 5FU核苷等代谢产物, 从而影响或干扰DNA及蛋白质的合成, 但是其抗肿瘤作用的确切机制不清。我们在制备出单一剂量5FU(75mg/kg)治愈荷瘤野生型C57BL/6小鼠模型的基础上, 通过使用免疫缺陷动物发现5FU治愈肿瘤的过程需要机体T淋巴细胞的参与[1]。由于大剂量5FU在体内发挥抗肿瘤作用的同时也对机体产生剂量依赖性的毒副作用, 使骨髓抑制、 外周血象下降等, 而机体外周血象的变化与5FU化疗疗效的关系目前尚不清楚。本研究旨在检测大剂量5FU在治愈荷瘤小鼠过程中外周血细胞(白细胞、 红细胞和血小板)数量的动态变化, 探讨外周血细胞数量的变化与肿瘤结节缩小之间的关系, 分析以外周血细胞数量的变化作为预测荷瘤小鼠化疗疗效或机体抗肿瘤免疫力指标的可能性, 为进一步研究5FU抗肿瘤作用的细胞分子机制提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 材料 野生型C57BL/6小鼠(H2b), 体质量为20~30 g, 雌雄兼用, 性别和周龄相匹配, 饲养于SPF环境中。5氟尿嘧啶(5FU, Mr 130.08), 购自Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 荷瘤C57BL/6小鼠动物模型的制备 参见文献[2], 取1×105对数生长期的EL4肿瘤细胞接种在野生型C57BL/6小鼠(H2b)皮下, 7~9 d后皮下可及肿瘤结节, 从而建立荷EL4肿瘤的野生型C57BL/6小鼠模型。

1.2.2 大剂量5FU对荷瘤野生型C57BL/6小鼠的治疗作用 取皮下接种EL4细胞后12 d的荷瘤C57BL/6小鼠, 随机分组, 每组4只, 分别用25、 75、 135 mg/kg5FU单次腹腔内注射, 等量生理盐水对照。随后每1~3 d观察并记录1次5FU治疗后荷瘤小鼠肿瘤的平均直径(最大横径与垂直方向的横径的平均值)。当荷瘤小鼠的肿瘤直径接近或等于15 mm时视为治疗无效, 并处死小鼠。找出5FU治愈荷瘤小鼠所需5FU的最低治疗剂量。

1.2.3 单一剂量5FU治愈荷瘤小鼠过程中外周血细胞的动态变化 取6只野生型荷瘤C57BL/6小鼠, 分别在75mg/kg5FU治疗前3 d、 治疗后第1、 4、 7、 11、 15、 28天乙醚吸入麻醉后内眦静脉取血[3]少量, 1 g/L肝素等量混合后用全自动血细胞仪进行血常规的检测, 了解5FU治疗前后外周血白细胞、 血红蛋白和血小板的动态变化。

1.2.4 统计学处理 计量资料采用x±s表示, 组内比较用随机区组方差分析及两两比较。

2 结果

2.1 单一剂量5FU治愈荷瘤小鼠的量效关系 所有接受5FU治疗的荷瘤小鼠无急性中毒致死发生。不同剂量的5FU单次治疗后荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化见表1。由表1可见, 75和135 mg/kg的5FU都能使荷瘤小鼠的肿瘤结节在5FU治疗后1周左右消退, 但肿瘤结节消退的速率随5FU治疗剂量的增加而加快, 因此, 我们认为5FU治愈荷瘤小鼠的最低有效剂量为75 mg/kg。

表1 不同剂量5FU治疗后各组荷瘤小鼠肿瘤结节大小的变化(略)

Tab 1 Dynamicchangesoftumor’ssizeintumorbearingC57BL/6 mice after different doses of 5FU treatment

2.2 75 mg/kg5FU对荷瘤小鼠外周血细胞的影响75 mg/kg 5FU治疗前后荷瘤小鼠外周血白细胞、 血红蛋白和血小板的动态变化见表2。由表2可见, 75 mg/kg的5FU对外周血象的影响使白细胞的数量在治疗后第1天就降为(5.0±1.1)×109/L, 并持续到化疗后第4天, 与治疗前(9.5±1.58)×109/L比较差异有统计学意义(P0.05); 但在治疗后第28天外周血白细胞的数量降为(5.9±1.96)×109/L, 低于化疗前水平(P

表2 75 mg/kg5FU对荷瘤小鼠外周血细胞的影响(略)

Tab 2 The side effects of 5FU on peripherial blood cells of tumorbearing mice

dP

3 讨论

应用细胞毒性化疗药物进行系统或大剂量化疗是目前各种晚期恶性肿瘤患者有效治疗的基础, 但是化疗药物抗肿瘤作用的确切机制不清。同时, 尽管临床研究发现化疗的疗效与肿瘤患者机体的免疫功能密切相关, 但到目前为止临床上还没有可用来代表机体抗肿瘤免疫力强弱的指标。因此, 通过动物实验了解在大剂量化疗治愈肿瘤过程中荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化与外周血细胞数量变化之间的相关性, 对于寻找与机体抗肿瘤免疫力或化疗疗效密切相关的临床检测指标、 指导临床用药具有重要的指导意义。

本研究证实75 mg/kg5FU治愈荷瘤小鼠属于大剂量化疗治愈肿瘤的动物模型。75 mg/kg的5FU不但对荷瘤小鼠的肿瘤有直接杀伤作用, 而且对机体增殖迅速的外周血细胞也有抑制作用, 具体表现在: 75 mg/kg5FU治疗后1 d外周血白细胞就出现降低(P

参考文献

[1] 李墨林, 李传刚, 舒晓宏, 等. 化疗治愈荷瘤小鼠模型的建立及氟尿嘧啶抑瘤作用的免疫机制[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2007, 23(11): 1010-1013.

[2] 李墨林, 李传刚, 舒晓宏, 等. 荷EL4肿瘤小鼠模型的建立及美法仑抑瘤作用免疫机制的探讨[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2006, 22(2): 235-238.

[3] 朱正美, 刘 辉. 简明免疫学技术[M]. 北京: 科学出版社, 2002: 103.

[4] 王 波, 江 森. 5FU的药代动力学研究及其在化疗中的合理应用[J]. 现代妇产科进展, 1994, 3(2): 145-148.

[5] 王 阳, 任 强. 血小板计数与恶性肿瘤及其分期关系分析[J]. 中国实验诊断学, 2003, 7(2): 105-106.

[6] 李墨林, 蔡桂凤, 朱 敏, 等. 卵巢恶性肿瘤患者血浆纤维蛋白原及血小板四项参数检测的临床意义[J]. 大连医科大学学报, 2004, 26(4): 280-283.

[7] Lerner DL, Walsh CS, Cass I, et al. The prognostic significance of thrombocytosis in uterine papillary serous carcinomas[J]. Gynecol Oncol, 2007, 104(1): 91-94.

[8] Iwasaki A, Hamanaka W, Harnada T, et al. Significance of platelet counts in patients who underwent surgical treatment for lung metastasis[J]. Int Surg, 2007, 92(2): 103-109.

[9] 赵建增, 刘 丽, 梅英杰. 外源血小板生成素基因体内导入对循环免疫因子水平的影响[J]. 中国免疫学杂志, 1999, 15(3): 103-105.

2.2 75 mg/kg5FU对荷瘤小鼠外周血细胞的影响75 mg/kg 5FU治疗前后荷瘤小鼠外周血白细胞、 血红蛋白和血小板的动态变化见表2。由表2可见, 75 mg/kg的5FU对外周血象的影响使白细胞的数量在治疗后第1天就降为(5.0±1.1)×109/L, 并持续到化疗后第4天, 与治疗前(9.5±1.58)×109/L比较差异有统计学意义(P0.05); 但在治疗后第28天外周血白细胞的数量降为(5.9±1.96)×109/L, 低于化疗前水平(P

表2 75 mg/kg5FU对荷瘤小鼠外周血细胞的影响(略)

Tab 2 The side effects of 5FU on peripherial blood cells of tumorbearing mice

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3 讨论

应用细胞毒性化疗药物进行系统或大剂量化疗是目前各种晚期恶性肿瘤患者有效治疗的基础, 但是化疗药物抗肿瘤作用的确切机制不清。同时, 尽管临床研究发现化疗的疗效与肿瘤患者机体的免疫功能密切相关, 但到目前为止临床上还没有可用来代表机体抗肿瘤免疫力强弱的指标。因此, 通过动物实验了解在大剂量化疗治愈肿瘤过程中荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化与外周血细胞数量变化之间的相关性, 对于寻找与机体抗肿瘤免疫力或化疗疗效密切相关的临床检测指标、 指导临床用药具有重要的指导意义。

本研究证实75 mg/kg5FU治愈荷瘤小鼠属于大剂量化疗治愈肿瘤的动物模型。75 mg/kg的5FU不但对荷瘤小鼠的肿瘤有直接杀伤作用, 而且对机体增殖迅速的外周血细胞也有抑制作用, 具体表现在: 75 mg/kg5FU治疗后1 d外周血白细胞就出现降低(P

参考文献

[1] 李墨林, 李传刚, 舒晓宏, 等. 化疗治愈荷瘤小鼠模型的建立及氟尿嘧啶抑瘤作用的免疫机制[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2007, 23(11): 1010-1013.

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篇(10)

[中图分类号] R681.5 [文献标识码]B[文章编号]1673-7210(2010)06(a)-228-02

2004年2月~2008年8月我院对28例腰椎滑脱症患者使用天津威曼生物材料有限公司的Ⅲ型脊柱内固定器行保留棘突韧带椎板减压和内固定复位加植骨治疗,取得了较满意的疗效。现将结果及经验总结报道如下:

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2004年2月~2008年8月我院28例腰椎滑脱症患者,其中,男11例,女17例;年龄38~60岁,平均54岁;病程1~15年;滑脱部位:L4 12例,L5 16例;滑脱程度:Ⅰ度14例,Ⅱ度10例,Ⅲ度4例。所有患者均存在不同程度的临床症状及体征,严重影响患者的生存质量。所有患者治疗前均行影像学检查,包括X线片、CT或MRl检查,所有患者术前症状、体征及影像学均符合诊断,经过药物、理疗、佩戴腰围、功能锻炼等保守治疗后症状无改善,最后选择手术治疗。

1.2 手术方法

对患者采用Ⅲ型脊柱内固定器为腰椎滑脱复位内固定,根据需要作彻底神经减压,滑脱椎体复位和足量的植骨融合进行治疗。首先采用持续硬脊膜外麻醉,患者取俯卧位,调整腰椎,垫好保护垫避免长时间压迫身体,以病椎棘突为中心,取其正中适当位置做切口,仔细辨别分离周围组织,暴露手术部位,后采用肋骨剪剪开一侧棘突韧带牵开缝线临时固定,术中注意勿误伤周围组织。分离周围组织后,分离硬脊膜及神经根,清除髓核前后精确处理软骨部分,避免误伤不必要的组织。在 “C”形臂机透视下对滑脱部分进行复位、固定,后将因椎体滑脱受到牵拉的脊髓和神经根进行处理。将切除的椎板棘突做成小碎骨块,同手术切口在髂后脊取适量的髂骨松质骨混合后植入椎间隙,可吸收缝线缝合纤维环切口1~2针以防止碎骨块脱出,2例Ⅱ度滑脱者的附加后外侧植骨,4例Ⅰ度滑脱者不摘除椎间盘而采用复位后后外侧植骨。冲洗伤口,仔细止血后置负压引流管,缝合棘突韧带,逐层缝合切口。术后卧床2~3个月,戴腰围下床活动。

2 结果

随诊时间1.0~4.5年,平均4年2个月,根据最后复查腰椎正侧位X线片和患者主观感觉及临床功能如下:①14例Ⅰ度全部恢复正常;10例Ⅱ度中6例恢复正常,4例恢复到0~Ⅰ度;4例Ⅲ度中有1例恢复正常,3例恢复到0~Ⅰ度。患者满意和手术优良者共24例(85.7%)。②植骨融合率:均在术后3~5个月融合,平均为4.5个月。③患者满意和手术优良者临床疗效按照赵定麟[1]的4级评分法:优20例,良4例,可4例,无差病例,优良率为85.7%,全部植骨融合成功,腰椎稳定性良好。有2例残留下肢麻木症状,但不影响生活工作。术后对所有患者进行随访,无一例出现内置物扭曲、松动及断钉等并发症发生,效果较为可靠及满意。

3 讨论

3.1 机制

腰椎滑脱症是骨科的常见病、多发病,临床表现复杂、治疗方法多样。其发生原因可以是先天性的(出生时就存在),也可能是后天性的,在儿童时期或更晚些发生。主要是因各种过度的机械应力引起,诱因包括搬运重物、举重、足球、体育训练、外伤、磨损和撕裂。还有一种腰椎滑脱是退行性的,即由于腰椎各种结构老化而发生结构异常,通常发生于50岁以后,这种滑脱通常伴有腰椎管狭窄,多需要手术治疗。其分级,即其分度一般以滑脱为滑脱椎体向前移位为下位椎体前后径所占比例为准,75% 的移位及超过100%者分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ度。发生腰椎滑脱后,患者可以没有任何症状,仅仅在是摄片时发现;也可能会出现各种相关症状,如腰痛、下肢疼痛、麻木、无力,严重时可出现大小便异常。滑脱较重的患者可能会出现腰部凹陷、腹部前凸,甚至躯干缩短、走路时出现摇摆。如果腰椎滑脱没有明显加重,可以采取保守治疗,定期复查腰椎 X线,了解滑脱情况。如果有腰痛和腿部的不适,在休息后通常症状可以得到缓解。腰椎问盘突出压迫神经根者可出现直腿抬高试验阳性、加强试验阳性,结合X线片、CT、MRI等辅助检查可明确诊断。合并下腰椎不稳、创伤性小关节炎可引起患者难以表达的疼痛和不适[2]。

3.2 手术指征

一般情况下,出现下列病情有手术指征:①持续或反复腰痛,影响正常活动和生活;②有神经或马尾受压的症状和体征;③分期在Ⅱ度以上者;④腰骶区有明显的后凸畸形或下腰段不稳定者;⑤经保守治疗无效者,一般保守治疗半年以上无效者即考虑手术治疗[3]。

3.3 手术目的

如果腰椎滑脱的患者出现神经症状,而且通过正规的保守治疗后症状无明显缓解,仍然有长期的腰痛和其他滑脱的伴随症状,即保守治疗无效,严重影响生活和工作,应考虑手术治疗。腰椎滑脱的手术方法有很多种,如后路滑脱复位、椎弓根螺钉内固定、椎间植骨融合术等。其中保留棘突韧带椎板减压和内固定复位加植骨治疗腰椎滑脱症治疗的原理是其扩大了神经根出口,解除了硬膜囊和神经根的压迫,从而消除了产生腰腿痛的原因,达到了治疗的目的,减轻了患者的痛苦。本组28例患者经治疗后患者满意和手术优良者共24例(85.7%),即优良率达到了85.7%,而植骨融合率达到了100%,全部植骨融合成功,腰椎稳定性良好。由此可见,此术式是从扩大神经根出口,解除硬膜囊和神经根的压迫,从而消除产生腰腿痛以达到治疗的目的,较高的融合率是保证椎弓峡部裂伴椎体滑脱手术疗效的关键[4]。

3.4 Ⅲ型脊柱内固定器优点

Ⅲ型脊柱内固定器具有较大的优点,其具有强大的椎间撑开力,是滑脱椎体复位时的力量支点,原理与其具有5°、10°、15°的钉杆角有关,其可克服重度滑脱时上位椎体的 “嵌顿”现象,在复位的同时可最大限度地恢复腰椎生理曲度。提拉钉能把滑脱椎体提拉复位,且此器械占空间小,对腰椎运动的干扰少,能提供三维空间矫形力,并具有良好的可调性和内固定的稳定性,更加接近正常的生理状态,手术简单安全、刨伤小、并发症少,较为安全可靠,对患者的损伤较小,可很大程度上提高疗效及减轻患者的痛苦。

3.5 植骨融合的重要性

王国正[5]认为,在腰椎滑脱手术中植骨是手段,融合是最终目的。但融合的范围和质量并不一致,笔者认为Ⅰ~Ⅱ度滑脱可作短(单)节段融合,Ⅲ度以上作长(双)节段融合。有条件时可经后路作椎体间融合,需负重的年轻人可考虑作360°脊柱融合。在提高脊柱融合的质量上做到:①尽量扩大植骨床,精心做好床面。②增大植骨量,自体骨加异体骨更可满足要求。③植骨到位,填平压实,过关节处用条状骨,小关节内嵌骨片。④卧床时间宁多勿少,可预防过早活动产生的并发症。在内固定复位的基础上,本组全部融合,恢复脊柱稳定。李林东[6]认为,应注意椎体间植骨床的准备以及植骨块的质量。椎间盘髓核纤维环要完全取出,软骨板要充分刮除但不破坏软骨板下密质骨,用刮匙刮除软骨板感觉有“沙、沙”声时说明软骨板已经刮除,植骨床已经准备好。本组术中保留了棘突韧带,也为腰椎稳定和恢复起到了重要作用。

3.6 保留棘突韧带的重要性

以往传统手术一般行全椎板减压时,把棘突韧带切除,笔者于术中保留了棘突韧带,对于维持后柱稳定有好处,对腰椎的稳定性有较好的保护作用。

3.7 椎体滑脱复位程度的争议

以往关于此病的手术治疗指征及手术的必要性争议较大[7]。有学者认为不需复位,椎板减压原位固定融合(如全椎板减压H植骨术);也有学者认为滑脱超过一定限度则需复位,意见不一。赵建彬[8]认为复位固定融合能恢复脊柱结构的连接和腰骶椎生理曲度,纠正脊柱和椎管畸形。松弛被牵受压的神经根,有效地解除神经症状,优于原位固定融合,RF内固定系统在使滑脱椎复位时较其他系统具有更好的优势。对于重度滑脱(Ⅲ度以上),是否需要复位长期以来一直是脊柱外科争论的焦点。不主张复位者认为,部分恢复滑脱角可以复位脊柱前凸,稳定滑脱椎体,减少复位引起的神经症状[9]。有些学者则认为,脊柱滑移不稳主要与其解剖稳定性原理有关,尤其是重度滑脱患者,如果其滑脱的椎体得不到复位,则就无法从根本上解决其病因,也就达不到治疗疾病、解除痛苦的目的,由此可见复位在此病治疗中的作用。如今较多学者主张无论轻度滑脱或重度滑脱均应争取解剖复位,但应避免过度复位。腰椎管减压还包括滑脱椎间隙突出髓核的摘除,只有切除髓核才能对下一位神经根彻底减压。

笔者认为,手术彻底减压和植骨融合是关键,不一定要求绝对复位,这样可避免带来神经牵拉等并发症,同时保留棘突韧带和RF内固定对后期的脊柱稳定性起重要作用。复位效果好、临床症状缓解彻底、远期无断钉松动发生,通过对腰椎滑脱手术病例的随访观察,笔者认为,该术式是治疗腰椎滑脱症理想的方法,易为患者接受,且手术简单,费用低,可在基层医院推广应用。

[参考文献]

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[2]张佐伦,刘立成,周东生.脊柱外科手术及并发症[M].济南:山东科学技术出版社,2002:234-247.

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[4]王健,孙长根,胡勇,等.DRFS系统加植骨治疗退行性腰椎滑脱症临床观察[J].中国脊柱脊髓杂志,2002,12(5):397.

[5]王国正.内固定复位加植骨融合治疗腰椎滑症[J].颈腰痛杂志,2003,24(3):135-137.

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[7]唐天驷,钱忠来.腰椎崩裂和滑脱症[J].中华骨科杂志,1997,17(1):5-7.

篇(11)

研究生考试就要到了,为了能在考试中取得好成绩,只有制定好学习计划,才能达到事半功倍的效果。

1.计划源自知己知彼 计划是为考研服务的,所以在制定计划前考生一定要对考研的形势有所了解,希望报考的学校、专业,自身的实力等作详细、客观的分析,这样在制定计划时才能有的放矢、计划得当,达到“知己知彼,计划自明”的目的。比如对于所报专业的专业课,考生就应该及早了解它的内容范围、指定教材、历年试题等情况,这些信息都可以在所报考院校研究生招生办领取或者购买到,及时关注报考院校的网站。然后再根据自己的专业课水平确定自己专业课的复习进度、方式、投入的精力、钻研的程度等,这样考生专业课的复习计划自然也就明确了。

2.计划的灵魂是变化,要学会用活计划,作计划的主人计划的大敌是变化,然而优秀的计划却恰恰是敢于面对变化,因为计划的灵魂是应变。考试的时间通常在一年左右,其间的大事小情林林总总,难免会有出乎意料的,因此计划必须能够应对突发事件、异常情况。所定计划可根据实际情况进行20%调节,一到两周对大小计划实施进行评价,并及时修订,要使复习计划能够从容应对环境的变化,就要使制定的计划做到:松紧适宜、留有余地、富于弹性、灵活有效。

3. 复习计划不要与学习习惯“拧”着来 考生在制定复习计划时要尽量符合自己的学习习惯(当然是指好的学习习惯啦),做到“习惯融入计划,计划体现习惯”。复习计划与学习习惯之间只有兼容并蓄才能相辅相成。只有这样的计划考生在实施贯彻时才能更顺畅、高效。比如,有的考生早上记忆好,不妨就安排早上进行英语的阅读、背诵;而有的考生晚上更能静下心来看书,那就可以计划晚上看看数学之类需要集中精神的科目。

4. 将专业考试和求职的小计划纳入考研复习的大方案里去 考研的复习进程往往与考生的专业考试或者求职安排发生冲突,具体来说就是和纷至沓来的专业设计、招聘会、面试、公务员考试等发生冲突。对此很多考生顾此失彼处理不好,烦恼得很。其实解决这些冲突的最好办法就是在考研的复习计划里预留出考生进行求职活动的时间。为此,考生在制定复习计划时就要提前了解各类求职活动的时间安排。有些同学担心参加求职活动会减少考研的复习时间,可换一个角度想:平时复习那么累,正好利用这个机会换换脑子放松一下。