绪论:写作既是个人情感的抒发,也是对学术真理的探索,欢迎阅读由发表云整理的11篇人大副主任述职报告范文,希望它们能为您的写作提供参考和启发。
一、政治思想方面
认真学习科学发展观和党的各项政策纪律,严格执行各项党纪、法规和规章制度,廉洁自律,严格要求自己。为了更好完成自己的工作,我在自己学习、增加新知识上下了不少功夫,取得了一些效果。在日常工作中,我把我所学到的理论知识运用到实际工作中去,并把工作学习中收获写成体会文章。在业余时间,我采用科技手段更快更多获取信息,加快知识的更新,增强了政治素质、业务水平、组织协调、语言表达等方面能力。
二、工作情况与工作成绩
(一)狠抓、落实,将安全工作落到实处
在日常的管理中,安全工作必须坚持不懈的抓紧抓好,防火、防盗、防外电侵入、防突发事件已呈制度化,防范的应急预案得到完善。第一、完善制度上的漏洞。在管理制度的运行中会有未预料到的问题,这就要求管理者值班员勤于现场督导检查,及时跟踪反馈并做有效完善,以确保执行过程中的准确无误,给员工的操作不留隐患。根据全员与公司签订了HSE责任状、承诺书,确立中心的安全保卫工作负责人,对各要害部位确立了要害部位负责人。从而使各自职责更加明确、责任分明。进一步建立健全外来人员登记管理制度、社会车辆出入牌证管理制度等一系列规章制度,对外来人员和车辆做好管理,防止各类被盗案件发生。实行二十四小时值班制度,设立专门沿河路值班室,每晚有专人值班,配备值班电话,并由中心员工带班。在每天的晨会上,我们都对员工进行教育,在工作中提高警惕,防抢、防盗,在每周的一、三、五,我们对抢报器进行测试,确保抢报器的正常。第二、有针对性的抓好安全意识培训。安全工作,人人有责,我们全体职员参加了中心营业大厅于今年6月份在中心营业厅组织应急疏散预案的演练,让员工树立安全意识,特别是对紧急事件、突发事件举一反三的进行了培训,提高了员工的识别能力及敏锐的反应能力。制作安全生产宣传条幅、小册子、招贴画、标语等宣传品,要求营业大厅悬挂、张贴等。制造一个人人讲安全,处处要安全的安全生产氛围,做到了时该提醒,处处监督。以知识讲座、答题竞赛等多种形式,对员工进行了安全培训,使广大员工都能掌握一定的安全生产知识及相关法律常识。
(二)端正思想,确保优质服务
在大家都可以创造出功能、质量相同的产品和经营手段的今天,以服务致胜已成为整个通信行业的共识。但服务所获得的效果各有各的不同。心有多大,舞台就有多大。自参加工作以来,他一直本着“想客户之所求,急客户之所需,排客户之所忧”的服务理念,为客户提供全方位、周到、便捷、高效的服务。在为客户服务的过程中,做到操作标准、服务规范、用语礼貌、举止得体,给客户留下了良好的印象,也赢得了客户的信任。有一天,一位老人向我投诉,我请老人到办公室,并给老人倒了一杯热水,耐心的询问他要投诉什么。老人说他昨天到营业办理业务时,营业员态度不好,当他不存在。经过我详细的了解情况之后,终于弄明白了原因。原来是他要办理小灵通停用业务,营业员没听清,叫他出示身份证又没带。营业员当时没给他办理,所以就来投诉了。他给老人解释之后,便带领他一起去办理业务。老人临走时还一个劲的给他说谢谢。*年来,由于我的表现出色,曾获得了**荣誉。得到了公司领导和同事的一致好评和认可。
(三)脚踏实地,努力做好工会主席工作
今年认真学习传达贯彻通信公司工作会议精神和公司工会年度要点提出的目标任务,在电信业务部工会在公司党委和工会的正确领导下,紧紧围绕公司工会的工作重点,脚踏实地开展工作,积极发挥工会组织的桥梁纽带作用,团结和动员全体职工,为公司的和谐发展作出了贡献。1、以丰富多彩的文化活动来凝人心、聚团队是非常重要、并且非常有效的一种方式。通过多次活动,在营业厅已形成了一种健康、团结、乐观、向上的精神风貌。2、加强民主管理,鼓励员工参政议政,为公司的发展献计献策,全年共提合理化建议28条,经合建小组讨论筛选后最终上报公司工会18条。3、大胆创新服务模式,利用晨会组织创新服务会,营业人员就服务管理创新和服务规范化等课题进行交流和讨论,形成“业务有限,服务无限”的共识。通过讨论会后,“微笑服务、快速服务、真情表达”的理念开始出现在营业厅每天的晨会上。4、组织营业员工开展对日常服务工作中客户经常咨询的问题进行大讨论,经过讨论达成共识,大家纷纷表示要从我做起,从现在做起,自己找问题,互相找差距,明确工作定位,把为用户排忧解难,真诚服务变成自觉行动。
三、存在问题和下一步打算
zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 6569.
received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.
indexed/abstracted in and full text linkout at pubmed. journal title in pubmed: zhong xi yi jie he xue bao.
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doi: 10.3736/jcim20090110open access
effects of ligustrazine injection on high glucoseinduced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase1 and tissue inhibitor of metalloproteinase1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro
guisong zhu, jinsong he
department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china
objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase1 (mmp1) and tissue inhibitor of metalloproteinase1 (timp1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.
methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low, medium and highdose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semiquantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp1 and timp1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp1 and timp1 in culture supernatants were measured by enzymelinked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.
results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucoseinduced type ⅰ collagen and timp1 expressions in a dosedependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium and highdose ligustrazine injection could significantly increase mmp1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).
conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp1/timp1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.
keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase1; tissue inhibitor of metalloproteinase1; in vitro
腹膜纤维化是腹膜透析治疗的主要并发症,最终导致腹膜功能衰竭,这是腹膜透析患者退出治疗的主要原因[1]。腹膜纤维化以细胞外基质(extracellular matrix, ecm)的过度沉积为特点[2]。研究表明,ecm的过度沉积是由于ecm合成与降解失衡而引起[3]。ⅰ型胶原是腹膜纤维化中主要的ecm[4],其降解过程受基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase1, mmp1)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase1, timp1)调控[5]。有研究证实,高糖能上调腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells, hpmcs)ⅰ型胶原和timp1的表达,降低mmp1活性[3]。本研究通过观察川芎嗪注射液对高糖刺激下hpmcs ⅰ型胶原、mmp1和timp1表达的影响,探讨川芎嗪在防治腹膜纤维化中的作用及其机制。
1 材料和方法
1.1 试剂和主要仪器 川芎嗪注射液(江苏苏中药业集团股份有限公司,批准号为国药准字h20020630);50%葡萄糖注射液(江苏方强制药厂,批号为200710111)。磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution, pbs)、胎牛血清(fetal calf serum, fcs)、trizol和rpmi1640粉剂等(gibco公司);胰蛋白酶和琼脂糖粉等(promega公司);ⅰ型胶原、mmp1和timp1酶联免疫吸附测定(enzymelinked immunosorbent assay, elisa)试剂盒(adl公司);二喹啉甲酸(bicinchoninic acid, bca)蛋白含量检测试剂盒(南京凯基生物科技公司);ⅰ型胶原、mmp1、timp1和βactin引物,mmlv第一链cdna合成试剂盒和taq酶等(invitrogen公司);抗细胞角蛋白抗体、抗细胞波形蛋白抗体、第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体(北京中山生物技术有限公司)。nu2500e二氧化碳培养箱(nuaire公司);全自动酶标仪(biobank公司);生物电泳图像分析系统(上海复日科技有限公司)。
1.2 实验方法
1.2.1 hpmcs的培养与鉴定 取来自南京大学医学院附属鼓楼医院普外科择期腹部手术患者(排除尿毒症、腹膜炎)捐献的大网膜组织,按文献[3]方法原代培养hpmcs,按1︰3传代,第3代细胞用于实验,每次实验均由来自3个患者的标本进行3次独立实验。倒置相差显微镜观察hpmcs呈多边形,似铺路鹅卵石样外观;免疫组化鉴定抗细胞角蛋白抗体和抗波形蛋白抗体染色阳性,抗第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体染色阴性。
1.2.2 实验步骤和分组 hpmcs用含1%fcs的rpmi1640培养液同步培养24 h后分为5组(每组设3个样本):正常组(完全培养液)、高糖对照组(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40 mg/l)组。各组完全培养液均为含有15% fcs的rpmi1640培养液。细胞置于37 ℃、5% co2培养箱培养48 h。
1.2.3 elisa法检测细胞上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1含量 分组干预48 h后,离心收集上清液,按elisa试剂盒说明书检测ⅰ型胶原、mmp1和timp1表达水平。用0.1 mol/l naoh溶解细胞沉淀,bca蛋白检测试剂盒测定细胞沉淀中蛋白质浓度,用相应蛋白质浓度结果校正检测结果。
1.2.4 半定量rtpcr 分组处理同上。采用trizol一步法提取总rna,2 μg总rna进行逆转录合成cdna,50 μl反应体系进行pcr扩增,以βactin作内参照(引物序列及反应条件见表1)。1.5%琼脂糖凝胶电泳(110 v,15 min)进行pcr产物鉴定,电泳图像分析仪扫描分析,mrna相对含量用其pcr产物吸光值(absorance, a)与βactin a值的比值表示。引物及pcr反应条件见表1。
1.3 统计学方法 实验数据用x±s表示,采用spss 15.0软件进行统计分析,组间差异比较采用单因素方差分析,两组间均数比较采用lsdt检验。检验水准α=0.05。 表1 ⅰ型胶原、mmp1、timp1和βactin引物序列及pcr反应条件
2 结 果
2.1 上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1蛋白质水平 与正常组比较,高糖对照组上清液中ⅰ型胶原和timp1含量显著升高(p<0.01),mmp1含量显著下降(p<0.01);与高糖对照组比较,低、中和高剂量川芎嗪组上清液中的ⅰ型胶原和timp1含量显著降低(p<0.05, p<0.01),且两者均呈量效关系,中、高剂量川芎嗪组上清液mmp1含量显著增加(p<0.01)。见表2。表2 各组上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1蛋白质表达
2.2 hpmcsⅰ型胶原、mmp1和timp1 mrna的表达 与正常组比较,高糖对照组hpmcs ⅰ型胶原/βactin mrna和timp1/βactin mrna分别上升(15.43±0.83)倍和(4.19±0.09)倍(p<0.01),mmp1/βactin mrna下降(86.9±0.44)%(p<0.01);与高糖对照组相比,低、中、高剂量川芎嗪组ⅰ型胶原/βactin mrna和timp1/βactin mrna表达水平均显著下调(p<0.05),两者均呈量效关系,中、高剂量川芎嗪组mmp1/βactin mrna表达显著增加(p<0.05)。见图1和图2。
3 讨 论
高糖透析液导致ecm过度沉积是腹膜纤维化的病理基础[2],研究表明,高糖不仅增加hpmcsⅰ型胶原的表达,并且引起ⅰ型胶原降解酶系mmp1/timp1的表达失衡[3]。我们的研究结果与之基本相同,此外我们发现,川芎嗪能显著对抗高糖的上述作用。
在生理条件下,hpmcs可以产生一定量的ecm和mmps/timps[3, 6]。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系,几乎能降解全部ecm成分。timps是内源性分泌蛋白,作为mmps的特异性抑制因子,其n'端可与相应的mmps催化活性中心的锌离子结合而抑制其催化活性[7]。本实验通过研究川芎嗪对hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型胶原及其降解酶系mmp1/timp1分泌及表达的影响,旨在探讨川芎嗪对hpmcs在高糖环境下ⅰ型胶原的合成和降解的干预作用及其机制。结果显示,川芎嗪能显著降低高糖所致的ⅰ型胶原的过度合成,同时显著下调timp1的表达,增加mmp1的表达,提示川芎嗪亦能通过调节mmp1/timp1的平衡,从而促进ⅰ型胶原的降解,减少ecm沉积。由此我们推测,川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用。
川芎嗪是中药川芎的有效成分之一,属酰胺类生物碱,具有活血化瘀的功效。药理实验证明,川芎嗪具有扩张血管、改善微循环、调节免疫和钙离子拮抗的作用[8]。目前川芎嗪抑制ⅰ型胶原、timp1和增加mmp1表达的机制尚不清楚。以往的研究发现这可能与抑制转化细胞生长因子β1(transforming growth factorβ1, tgfβ1)表达有关[9, 10]。tgfβ1是重要的致纤维化细胞因子,参与了腹膜纤维化的病理过程[2]。tgfβ1可增加ⅰ型胶原的合成,并且抑制mmps的活性而激活timps,使ⅰ型胶原降解减少[3, 11]。有研究报道,川芎嗪能降低多种细胞如心肌细胞、肝细胞和血管内皮细胞的胶原合成和timp1表达,而增加mmp1的分泌和表达,进一步的研究发现这可能是通过抑制tgfβ/smads信号传导通路继而抑制tgfβ1表达的结果[9, 10, 12]。我们前期研究证实,川芎嗪能下调高糖致hpmcs tgfβ1的表达(文章待发表)。因此我们推测,川芎嗪抑制tgfβ1的表达可能是其抑制hpmcs ⅰ型胶原合成和调整mmp1/timp1表达平衡的机制之一,其具体机制将是我们下一步要研究的内容。
综上所述,川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型胶原的过度合成,并且通过调节mmp1/timp1的平衡,促进ⅰ型胶原降解,从而减少ecm的沉积,防止腹膜纤维化的发生和发展。因此,川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用,这对腹膜纤维化的机制及其防治的研究有一定借鉴和应用价值。
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