春节标语大全11篇

绪论：写作既是个人情感的抒发，也是对学术真理的探索，欢迎阅读由发表云整理的11篇春节标语范文，希望它们能为您的写作提供参考和启发。

篇（1）

3. 欢天喜地迎新春，尊老爱幼促和谐!

4. 装点天下商通四海，业精于勤日日高升!

5. 贯彻落实科学发展观，建设文明和谐新xx!

6. 文明过新年，快乐每一天!

7. 弘扬传统美德，建设和谐社会!

8. 坚定发展信心，鼓足超越勇气，推动发展!

9. 建设文明和谐新xx，再创xx新辉煌!

10. 群策群力，迎难而上，推动经济社会持续健康发展!

11. 开拓创新，与时俱进，科学发展，安全发展，转型发展，跨越发展!

12. 恭祝全体员工及家属新春快乐、阖家幸福!

13. 以我文明新貌，喜迎文明盛会!

14. 抢抓新机遇，增创新优势，再创新辉煌!

15. 牢固确立科学发展观，在科学发展中率先发展!

16. 深入解放思想，推动科学发展，共铸改革辉煌，同享发展硕果!

17. 解放思想开拓创新 为建设富有魅力的现代化企业而努力奋斗!

18. 牢固确立科学发展观，在科学发展中率先发展

19. 汇聚百川、服务两港、创新开拓、勇立潮头

20. 抢抓新机遇，增创新优势，再创新辉煌

21. 装点天下商通四海，业精于勤日日高升

22. 年年岁岁花不同，岁岁朝朝人依在

23. 抢抓新机遇，争创新优势，再创新辉煌

24. 张灯结彩迎新年，齐心协力谱新篇

25. 张灯结彩欢度佳节，齐心协力共创伟业城市，让生活更美好

26. 坚持科学发展和谐发展，努力把xx建设成为民富区强、文明和谐的现代化xx新城

27. 建设社会主义新农村，共创xx美好家园

28. 坚持党的群众路线，全心全意为人民服务

29. 新年伊始，向各行各业的建设者致敬

30. 新年快乐,佳节如意!

31. 欢度春节，祝福万家

32. 迎新年，讲文明，树新风，促和谐

33. 以科学发展观统领全局，推动xx经济社会又好又快发展

34. 世界文明的盛会，我们大家的世博

35. 以我文明新貌，共庆新春佳节，喜迎世博盛会

36. 文明的城市、欢庆的佳节，美好的生活

37. 在新的一年新的开始新的起点新的征程

38. 年年顺景财源广岁岁平安福寿多

39. 与时俱进弘扬xx精神，万众一心构建和谐港城

40. 耄耊之年，风采犹存!富如东海，寿比南山!

41. 运筹帷幄雄心开创千秋业 达权知变妙笔描绘万代春

42. 大吉大利过新年，事业成功辉煌年!

43. 汇聚百川、服务两港、创新开拓、勇立潮头

44. 一干二净除旧习五讲四美树新风

45. 春色明媚山河披锦绣华夏腾飞祖国万年轻

46. 五更分两年年年称心一夜连两岁岁岁如意

47. 求真务实抓转型，全心全力搞跨越!

篇（2）

2. 春色明媚山河披锦绣华夏腾飞祖国万年轻

3. 五更分两年年年称心一夜连两岁岁岁如意

4. 求真务实抓转型，全心全力搞跨越!

5. 祝各位在新的一年里：身体健康，万事如意!

6. 一干二净除旧习五讲四美树新风

7. 聚精会神搞建设，一心一意谋发展

8. 喜迎猴年!欢度新年!再接再励!再创辉煌!

9. 欢天喜地迎新春，尊老爱幼促和谐!

10. 文明过新年，快乐每一天!

11. 张灯结彩迎新年，齐心协力谱新篇

12. 张灯结彩欢度佳节，齐心协力共创伟业城市，让生活更美好

13. 新年伊始，向各行各业的建设者致敬

14. 群策群力，迎难而上，推动经济社会持续健康发展!

15. 开拓创新，与时俱进，科学发展，安全发展，转型发展，跨越发展!

16. 恭祝全体员工及家属新春快乐、阖家幸福!

17. 建设社会主义新农村，共创xx美好家园

18. 坚持党的群众路线，全心全意为人民服务

19. 张灯结彩迎新年，齐心协力谱新篇!

20. 坚持科学发展和谐发展，努力把xx建设成为民富区强、文明和谐的现代化xx新城

2017年欢度春节宣传标语（简单篇）

1. 春满人间民泰安。

2. 人寿年丰喜事多。

3. 神驹腾跃吉祥年。

4. 梅花香遍神州地。

5. 坚持科学执政民主执政依法执政，全力构建和谐社会。

6. 山青水秀风光好。

7. 庆佳节，创新业，夺取全市改革开放和现代化建设新胜利。

8. 欢欢喜喜过节 平平安安过节

9. 新年伊始，向各行各业的建设者致敬

10. 过欢乐春节 文明春节 做文明市民

11. 欢度春节，祝福万家

12. 辞旧迎新 来年更上一层

13. 张灯结彩迎新年，齐心协力谱新篇。

14. 瑞雪映兆丰稔岁。

15. 牢固确立科学发展观，在科学发展中率先发展。

16. 笛弄梅花曲。

17. 华人欢度万荣春。

18. 龙族喜迎千禧岁。

19. 瑞雪兆丰年。

20. 莺歌绿柳楼前。

21. 政协人和天地春。

22. 跨越江河架宏桥。

23. 东风迎新岁。

24. 兔降葡旗别澳门。

25. 龙游沧海江湖小。

26. 文明过新年，快乐每一天!

27. 欢天喜地迎新春，尊老爱幼促和谐!

篇（3）

3、推动移风易俗，树立文明乡风。

4、节俭是良知，“光盘”是美德。

5、勤俭节约不能忘，铺张浪费要摒弃。

6、唯诚唯信行世事，克俭克勤践家风。

7、相亲相爱家庭和睦，互谅互帮邻里温馨。

8、行路看红灯，垃圾不乱扔，坐车让老人，处处讲文明。

9、走文明路，开文明车，做文明人，创文明城。

10、一路礼让一路行，一路文明一路情。

11、一花一木皆是景，一言一行要文明。

12、树立环境保护意识，建设绿色文明家园。

篇（4）

3、我会给你送一个不同平日的祝福，因为这四字一年只说一次：元旦快乐!

4、千万要平安！我深感明白，偶前面的路艰难而又漫长，我不可能也没有时间来回报你们的那份牵挂和关爱。

5、新的一年，希望你财富贼多，事业贼火，身体贼棒，家庭贼旺，一切贼顺，鸡年贼牛!

6、恭祝春节快乐。祝你年年圆满如意，月月事事顺心，日日喜悦无忧，时时高兴欢喜，刻刻充满朝气!

7、爱情的基础，是勇气；友情的基础，是义气；亲情的基础，是和气；生活的基础，是喜气；祝福的基础，是豪气；新年到，愿你事业有财气，快乐有福气！

8、又馋了吧，新年喝一盅吧!要知道母亲有一个不肯哭、不肯服输、不示弱的女儿，要想用她所有的心血换回一份安闲平稳的将来，借此来报效苍老多病的双亲和冀我以希望的姐妹亲朋。

9、快乐时有你的祝福，失意时有你的安抚，遇到你是我的幸福，人生有你我已知足，在新的一年里，让我们共同来祝福彼此，新年快乐!

10、分别几日，新春到来。愿领导春节一切好，接福纳财心欢笑。 春节到了，想想没什么送给你的，又不打算给你太多，只有给你五千万：千万快乐！

11、烦恼忧愁不再来，福星财神相对拜。新年快乐，恭喜发财！短信祝福，依依情在。

12、千万不要忘记我！ 大地回暖春节来，小桥流水百花开。人寿年丰又一春，生活美满笑颜开。

13、或许给您拜年的人已经排成了长队，新年到放鞭炮，拱拱手祝福好，身体棒乐陶陶，事业成薪水高，夫妻间分红包，兄弟间酒不少，敬长辈送补药，会亲友真热闹，送旧符展新貌，春节乐天天笑!

14、驶入平安快乐道，淌过吉祥如意河。马年来，马年嗨，蛇年祝福最精彩，愿你如马般舞出自己的锦绣前程，如马般游出自己的甜美爱情，如马般点燃自己的美丽心情。

篇（5）

中图分类号：I053.5

文献标志码：A文章编号：1009－4474(2012)04－0043－05

The Cultural Symptoms and Decoding of Youth Idol Drama

——Analysis Based on the Theory of John Fiske

YAN Qing， ZHU Jing-wen

(Department of Literature and Journalism, Sichuan University, Chengdu 610064, China)

Key words: Youth Idol Drama; John Fiske; ideologies; ideograph; intertextuality; Post Modernism

Abstract: Youth Idol Drama as a type of TV play closely interacts with business and economic logic, and its artistic generation and acceptance are both deeply influenced by the post modernism thoughts. In the light of John Fisks Symbol theory, TV “bardic” ideographic theory, intertextuality theory of horizontal and vertical dimensions and so on, the creation and acceptance of the Youth Idol Drama can be interpreted as the ideology knitted with the illusion of the reality. In the dissemination, the selection of strategy for daily visual bardic is to be made through the audiences individual decoding in the acceptance and the visual spectacle and entertainment carnival of the Youth Idol Drama are thus completed.

青春偶像剧（以下简称偶像剧）是电视剧艺术中受商业逻辑和经济逻辑影响最深刻的类型，是后现代体验下生活镜像和意义建构的独特形态。偶像剧以时尚性、奇异性表征系统将受众定位于追新求异的青少年人群，并力图通过电视剧文本符码的日常化影像编织将现实的意识形态最大化呈现。费斯克用符号学原理剖析电视（节目）文本，阐释了电视用符码来建构意义，并将生产者、文本和观众三者勾连起来，实现了从意义的建构到符码表意的视像传播，再到受众的个性化解码的动态而开放的意义生态圈和循环系统，为偶像剧的传播理念、意义编织和接受等提供了新颖的视角和理论价值。

一、意识形态的编织和幻化呈现

偶像剧运用符码单位构建青少年日常生活情境的叙事文本，以电视媒介为传播载体进行一种视像化的意义传达，最终通过一系列视像化的符码表意和隐喻完成了文本意义的游移升华。费斯克在《解读电视》、《电视文化》等著作中巧妙地将索绪尔、巴特等人的符号理论融入电视媒介，创造性地将电视符码分为了“现实”、“表现”和“意识形态”三个等级。

在第一层级“现实”中，符码代表了其初始意义，亦即索绪尔符号学中的“能指”效用。偶像剧中这些符码取自现实客观世界，是受众热捧事物的择取，如青春靓丽的俊男美女、时尚多变的服饰妆容、现代化的都市建筑等。“现实”层面的电视剧符码所建构的影视文本尽管只是对现实世界的部分选择，但是在一定程度上实现了视像的真实性，满足了电视受众的日常化观赏诉求。湖南卫视自拍剧《一起来看流星雨》中的男女主角就均为戏剧学院的本科学生，没有明星光环的他们与普通的青少年受众缩短了距离，因此他们的出场就更像是校园亲历而非表演。美国偶像剧《绯闻女孩》中，现代都市风貌的符码较之中韩两国更为突出，无论是男女主角居住的豪华别墅或商务楼，还是舞会派对中豪华的厅堂装潢，抑或配合情节呈现的风景胜地，无不以摄像机为眼、电视为介来完成叙事文本符码的建构。

第二层级的“表现”是通过技术使日常符码的表意上升到文化层次——在社会共享符码的关联下形成了偶像剧的符号所指。这种通过技术形成的叙事文本可以称为技术符码，包括摄像技术的运用，如镜头写意、画面剪辑、声画效果等，可以更好地完成“现实”层面日常符码表意的提升。偶像剧中技术符码的运用主要体现为声画演绎人物性格、镜头写意躯体和类躯体镜像、画面营造都市幻象三个方面。首先，声画演绎人物性格是通过声音和画面的运用来实现符码表意的深化，将俊男美女视像化的日常符码表意提升到了无法用语言表达的内心层面。偶像剧的对白和音乐，无论是幽默风趣还是诗意唯美，都充分运用了语言内在的戏剧张力，营造轻松浪漫的氛围，积淀观影情绪，从而推动情节的发展和人物塑造。《绯闻女孩》就借用当红歌星Lady Gaga的歌曲作为影片的背景音乐，从而有效地提升了剧作的时尚性和流行度。其次，镜头写意躯体和类躯体镜像是指用镜头语言如特写或者推拉摇移等来突出剧中人物躯体和类躯体的视觉呈现，由此来建构偶像剧特有的视觉化、时尚化、都市化的青春幻象。躯体镜语是指身体包括人物神态、动作、装扮等在内的人物形象的呈现，它是以人物靓丽的容貌、完美的身材和时尚的装扮来塑造偶像的崇高地位的。再次，画面营造都市幻象则是通过画面的剪辑技巧辅以镜头语言来完成都市幻象，如酒吧、豪华餐厅、星级酒店等营造出偶像剧的背景环境，为偶像剧塑造梦幻却又高度仿真的环境现场。而韩国偶像剧《拜托小姐》中女主角居住的豪宅、休闲娱乐的高尔夫球场、办公的豪华商务大楼则成为了偶像剧的类躯体叙事，在辅助躯体叙事的同时交代环境背景，其营造的都市幻象一方面为达成受众的情感共鸣做铺垫，另一方面则通过这种高度物质化、视像化的呈现方式达到陌生化效果，为受众崇拜心理的激发划定了最佳的观赏距离。无论是躯体镜语还是类躯体镜语，在偶像剧中都成为满足受众偶像崇拜诉求的最佳话语呈现方式，也成为了建构消费景观、拟造超仿真社会的最佳路径。

第三层级的“意识形态”架构于“现实”能指与“表现”所指共同塑造的符码意指之上，是一种高于文化层面的世界观、价值观的符码表意。偶像剧的“意识形态”主要以电视文本符码的隐喻、转喻等方式体现地域文化差异，在潜移默化中形成独特的意识形态符码，有利于受众的识别进而引发共鸣。中国偶像剧在含蓄委婉的叙事文本符码、相对保守的躯体符码中充盈了进取向上的精神。比较有代表性的影片《奋斗》，没有梦幻的童话情节，但同样叙写了青年一代青春激昂的奋斗与情感历程。即使是陷入偶像剧套路的《一起来看流星雨》等剧，与相同题材的韩国版、日本版《花样少男少女》相比，也同样少了梦幻，而多了对现实生活的写照与人物成长轨迹的描绘。韩国偶像剧在躯体符码上突出的表现则从侧面烘托出韩国当下明显的消费转向痕迹，《浪漫满屋》、《加油小姐》、《咖啡王子一号店》等韩国偶像剧无一例外地都塑造了完美靓丽、时尚与智慧并存的男女主角，他们从服饰到妆容搭配都成为了潮流时尚的引领者，无不刺激着受众的消费欲望。在韩剧所营造的时尚帝国中，人们似乎必须消费才能生存。美国的偶像剧在都市环境营造上的技术优势，传达了其以现代化为诱饵的霸权文化的渗透效果。高耸云端的商务写字楼、开阔堂皇的私家别墅、豪华奢侈的购物广场……现代化都市的一切标记对于任何一个非美国人来说都很常见，而《绯闻女孩》中呈现的男女青年之间直白的乱性、物欲横流的社会风貌以及非人性的暴力冲突仍旧在不遗余力地传达一种美国式生活方式，不管这种奢靡混乱的生活方式是多么地不堪。

二、日常生活的后现代表达与传播

在费斯克看来，电视具备的“吟咏功能”(bardic function)顺利实现了叙事文本的传递。电视的吟咏功能类似于中世纪的游吟诗人的作用——“利用既有语言把当时社会的生活作息，整理组织出一套又一套的故事或讯息，并强化肯定了听者对自己以及对自己文化的感受。”〔1〕在当下后现代思潮的背景下，电视的“吟咏功能”对人们的身份认同和文化归属发挥了重要作用。所谓后现代，是一个相对于现代性的概念，但是这种概念并非在时间、序列上进行区别〔2〕。在此我们更多的是将后现代看为一种对世界的态度，一种思考和感受的方式或行为，它质疑客观真理、理性、同一性和客观性等，不信任任何单一的理论框架、大叙事或终极性解释。而电视的“吟咏功能”是在题材选择、符号修辞、传播技术等后现代认可的基础上实现传播与接受的。

在题材选择上，偶像剧通过对经典文本的“后现代摹写”锁定文化范围，奠定收视根基。作为20世纪以来的重要文化现象，偶像剧的创作深受后现代思潮的影响，在表达方式上呈现出明显的后现代倾向——在内容上对经典文本的创造性摹写与在形式上对经典文本的模仿、拼贴，借经典文本的受众基础为新的偶像剧预设收视期待。经典文本的后现代摹写，是借鉴利用经典文本中的素材，根据现代青少年群体的审美标准和创作者的传播需求来进行筛选、加工创作全新的电视剧本。改写后的偶像剧摈弃了经典文本中深刻的思想内涵，力求以通俗、浅显的方式达到最优化的定位传播。法国后现代主义代表人物里奥塔尔曾将后现代主义定义为“针对元叙事的怀疑态度”〔3〕。而偶像剧的受众被定位为一群勇于接受新思潮、敢于颠覆传统的青少年人群，该剧种的诉求本身就含有对元叙事持怀疑、颠覆以至批判的态度，因此，偶像剧在题材的选取、内容的表达上即完成了一次对于传统经典文本的颠覆性再创作。韩国人气偶像剧《豪杰春香》通过对韩国家喻户晓的传统故事《春香传》的改写，在内容和形式两个层面上创新了表达方式，消解了传统叙事中朝鲜人民赞颂女主人公刚强不屈的美好品质而抨击贵族阶级骄奢逸的封建主义腐朽统治这一宏大主题，在将题材简化为一女两男的情感纠葛的同时完成了电视剧与后现代语境的充分契合。

此外，创作者通过对经典作品的经典细节的模仿与拼贴，对偶像剧在表述形式上进行后现念的艺术加工，完成了经典作品的差异化表达。如台湾偶像剧《流星花园》在当时掀起了偶像剧的收视狂潮，尽管该剧是由日本的漫画《花样男子》改编，但改编后的电视剧所获得的成功远远超过了原有漫画所引发的追捧效果，开创了偶像剧中一种王子与灰姑娘式的“经典模式”，之后日本、韩国、中国的偶像剧都纷纷翻拍和效仿。如《流星花园》中帅气的四大男主角F4的出场：多辆豪华轿车在一辆开路车引导下驶入了校园，学校的老师同学纷纷夹道欢迎，其气氛丝毫不亚于明星的闪亮登场。这一成功的偶像塑造画面在《花样男子》、《一起来看流星雨》中都有类似的呈现。

在符号修辞上，偶像剧借助消费奇观构造价值认同，以电视为媒介通过偶像塑造来传播都市文化，引导社会的消费价值走向。从索绪尔所揭示的“符号社会”到鲍德里亚所描绘的“消费社会”，青春偶像剧就是这一语境下的产物。

一方面，偶像剧的偶像呈现不仅是其类型特征所在，更是以此架构的消费幻境。偶像剧在偶像塑造方面的特质不仅巩固了青少年追逐前沿、紧跟社会潮流这类受众群体，而且在转型社会缺乏偶像的社会风潮中也为其扩大受众基础奠定了社会文化根基。偶像在偶像剧中是最具传播价值的符号之一，“偶像”的能指即指剧中的主要角色形象，而其所指则指对该人物自内而外全方位的阐释，比如内涵修养、仪表妆容等，这种表意形式成为偶像剧奇观建构的基础和受众诉求表达的最佳方式。韩剧的盛行在很大程度上得益于偶像符号意指的最大化拓展，它为整个影视奇观的建构奠定了绝佳的消费根基。以《浪漫满屋》为例，剧中偶像主要有女主角宋慧乔和男主角Rain，电视剧通过服装、化妆、发饰等等一系列人物外形符号塑造了两个时尚、俊美却又不失现实传统的偶像，让观众在接纳人物的同时不自觉地陷入了影视幻境，并在潜意识中试图通过对剧中偶像人物的模仿来重塑自我的生存环境。

另一方面，如果说以上所述的偶像符号的建构和偶像奢侈生活的营造直接诱导受众对影视幻境中消费奇观的追逐的话，那么在偶像剧中通过影视符号传递的都市文化则以隐喻的方式完成了受众对于精英消费社会符号幻境的价值认同。这里所谓的都市文化，脱胎于现代社会的城市文化，是在后现代主义的演变之下以思想和技术的发展变迁为支撑形成的“超城市”都市形态。由于这种都市文化与当代偶像剧中频繁出现的隶属于现代化大都市的相关画面符号，如高楼大厦、娱乐会场、奇装异服等相契合，因此通过偶像剧传播的都市文化就可能形成一个都市的特定文化表征，亦即所谓的“都市名片”，进而对塑造都市形象、带动都市化相关产业的发展发挥重要的作用。如《奋斗》中的取景地北京，剧中多次出现的西单、798工业区等等一系列都市符号共同描绘了北京作为一个国际化大都市的基本形貌，为都市文化的传播提供了借鉴。美国的文化研究学者戴安娜?克兰认为：“都市文化是阶级文化……它们反映了消费这些文化的社会群体的价值、态度和资源。”〔4〕偶像剧在获取受众对都市文化价值认同的同时，也以这些都市文化的符号为介质隐喻了消费都市文化的社会群体亦即精英群体的价值、态度和专属资源，从而为受众的都市消费创造了绝佳的条件。此外，“对都市文化的精英形式越来越影响的商业公司和都市开发者，并不是无功利性的……他们直接或间接试图从他们与这些文化形式的联系中牟利”〔4〕。

在传播特性的把握上，偶像剧以电视为载体完成了符码表征的消费建构。迄今为止，广告、电视和媒体通过对社会的彻底渗透而建构的一种新的消费类型标志着一个新旧社会的彻底断裂，这个建立在消费拟像之上的消费社会正是后现代主义思潮转向的结果。偶像剧依靠独特的艺术表征所建构的幻象之城，在当今消费社会形态下生成的传播价值延展了偶像剧都市时尚元素传递的时空——受众不仅仅满足于节目的观赏，而且通过与人的话题交流、现实消费的参照，推动着影像幻境与现实幻境的融合，完成了偶像剧的传播。受众试图通过现实中的物质消费无限接近偶像剧营造的幻境之城，亦即鲍德里亚所说的“超真实”“拟像”世界的形成。《蓝色生死恋》、《浪漫满屋》等脍炙人口的韩国偶像剧通过梦幻化的神话叙事、躯体镜语与类躯体镜语的反复呈现，建构了一个颇具崇拜价值的幻象之城。受众在接受剧作的都市时尚化偶像传播的同时，将这种审美价值认同传递给了消费社会的生产系统，无论是服装、化妆品、家私甚至建筑风格都趋于影像化，而受众更是试图通过物质消费参与超真实社会的拟造。

三、互文性与受众身份的重塑

电视的多义性和互文性是生产型受众诞生的基础，而生产型受众的诞生也为电视意义的多维解读创造了条件。费斯克认为，“电视多义性”不仅是指“文本建构时必然的庞杂性”，也指“不同社会地位的观众必然引发出的不同解释”〔5〕。从“电视多义性”出发，文本在垂直和水平两个向度上构成了电视文本的互文性，受众在以后现代为主的转型风潮、媒介素养等因素的制约下呈现出审美意识的泛化，这两个向度的相互作用建构了偶像剧开放多元的诠释空间。

文本的互文性是指文本在水平和垂直两个层面上相关因素之间的互相呼应，这些因素互相阐发，互相补充，为文本的解读提供了或共鸣或间离等多样化的审美渠道。文本的水平面互文性是通过类型、角色和内容等因素协作实现的，相同题材的不同文本之间、不同文本的相似角色之间表意符码的先在性、模式化影响就是如此。例如日本最具人气的漫画《花样男子》最早就由台湾改编为经典偶像剧《流星花园》，随后日本韩国先后改编为《花样少男少女》，地域差异下的三部偶像剧因内容的细微差别建构了偶像剧文本的水平互文性——剧中的四大男主角F4和女主角尽管名字各异，但由于情节相同而形成了趋同现象，为受众的影视读解提供了模式参考。

文本的垂直层面的互文性指的是原始文本与其他不同文本之间的相互指涉关系，费斯克区分了初级、次级、第三级三种电视文本。初级文本是电视机构制作完成的原初文本；次级文本是为初级文本做宣传或解读的副文本，可分为宣传策划类（广告)和媒介类（评论杂志、报纸、广播等）两种；三级文本指的是观众观看以后发生的反应或彼此的交流，如口头交谈、观众来信、网络评论等〔6〕。垂直层面的互文性在偶像剧中对于受众的解读起着关键作用，无论是次级文本还是三级文本，都深刻影响着受众对于原初文本的解读。如《一起来看流星雨》一剧，次级文本就以“芒果卫视自制剧”、“新版《流星花园》”等种种噱头为该剧的上映积累了充分的收视期待；而在《一起来看流星雨》上映之后，随着三级文本的盛行，受众对于该剧的解读就自然形成了各自的团体，他们或褒或贬或中立，完成了多维视域下的解读过程。

受众审美意识的泛化拓展基于后现代主义思潮下受众审美意识的转型，有助于受众的审美诉求在广度和深度上交错式地拓展。从利奥塔对后现代“就是针对元叙事的怀疑态度”的定义出发，后现代主义从根本上讲就是一种对权威和传统的颠覆，即反对单一，主张多元；解构中心，解放形式〔7〕。

受众审美诉求在广度上的拓展主要表现为受众审美意识的普遍觉醒以及审美活动的日常化、大众化。“审美”作为一项高度艺术化、精英化的活动，曾经与大众保持一定的距离，在技术发展支撑下，电视普及所带来的受众电视剧审美意识的觉醒日益迫使大众打破这种距离的间隔；而且偶像剧所特有的世俗化叙事方式也极大地拓宽了受众的年龄范围，使剧种脱离了精英阶层的观赏局限。因此，受众在试图吸收精英审美方式的同时，建立了后现代式的观影态度，最终形成了偶像剧审美的日常性和大众化。也就是说，多样化的审美范式不再被精英审美排斥于认同范围之外，任何人都可以对同一部电视剧做出个性化的审美品读。对偶像剧的审美更加深刻地证明了这一点。同一部《蓝色生死恋》，有人读出了男女间至死不渝之爱，有人为女主角的坚强执着所感动，有人则更深入地觉察到了韩剧隐晦的叙事策略所带来的卓越传播效果；《奋斗》中既有中国大学生为了生活而奋斗的拼搏精神，又有错综复杂的情感变迁，还有喧嚣琐碎市井生活的真实写照。

而在深度上，受众审美诉求的拓展主要表现为受众在视觉审美上的开掘，从而诞生了“身体审美”之审美范式。偶像剧，顾名思义是将青春靓丽的青少年进行偶像塑造，而“偶像”这一符号在电视语言中是极其具象化的，唯有通过视觉语言的多角度诠释，才能将“偶像”放置于兼具高度与前沿的位置。而这种视觉语言的“具象化”过程在偶像剧中突出表现为对主角身体的呈现，它强化了身体审美在偶像剧视觉审美范式中的特殊地位。“美学是作为有关身体的语言而诞生的。”〔8〕偶像剧的青少年受众多处于寻求自我价值和社会认同的人生阶段，而剧中青春偶像们的身体呈现恰好为他们提供了一种可供借鉴的、符合社会审美标准的镜像模式，使他们习惯于根据这一镜像来塑造自我的身体以及行为方式，以求更好地融入嬗变的社会场域。

参考文献：

〔1〕费斯克.解读电视〔M〕.郑明椿,译.台北：台湾远流出版社，1993:63.

〔2〕余乃忠.“后现代”概念的谱系学悬疑〔J〕.学术月刊，2010，（8）:27.

〔3〕让-弗朗索瓦里奥塔尔.后现代状态：关于知识的报告〔M〕.车槿山,译.上海：上海三联书店出版社，1997:2.

〔4〕戴安娜?克兰.文化生产：媒体与都市艺术〔M〕.赵国新，译.南京：译林出版社，2001：112，113.

〔5〕John Fiske.Television:Polysemy and Popularity〔J〕.Critical Studies in Mass Communication，1986，(3):391.

篇（6）

1、吃了春分饭，一天长一线。

2、春分种芍药，到老不开花。

3、买种省了钱，减产后悔晚。

4、春分，日螟封分。

5、春分到清明，棉花干播种。

6、春分降雪春播寒。春分有雨是丰年。

7、春分不上炕，谷雨插不上。

8、春分无雨到清明。

9、春分有雨家家忙，先种瓜豆后插秧。

10、麦过春分昼夜忙。

11、两头去，中间留，玉米苗子黑油油。

12、春分时节，果树嫁接。

13、春分大风夏至雨。

14、春分南风，先雨后旱。

15、春分降雪春播寒。

16、龙生龙，凤生凤，好种才有好收成。

17、春分豆苗粒粒伸。

18、春分无雨莫耕田，秋分无雨莫种园。

19、春分春分，昼夜平分。

20、春分不种麦，别怨收成坏。

21、春分麦，芒种糜，小满种谷正合适。

22、有钱买种，无钱买苗。

23、要想出好苗，棉籽粒粒挑。

24、晒棉种，很重要：发芽势，明显好;发芽率，能提高。

25、春分西风多阴雨。

26、春分有雨家家忙。

27、春分不暖，秋分不凉。

28、春分有雨到清明，清明下雨无路行。

29、春分分芍药，到老不开花。

30、好种出好苗，早发早结桃。

31、春分前冷，春分后暖;春分前暖，春分后冷。

32、种子买得贱，空地一大片。

33、要想庄稼长得凶，一家一个沤粪坑。

34、春分春分，百草返青。

35、春分有雨是丰年。

36、麦怕春旱，谷怕急雨。

37、纺好线，用好棉，好种壮苗长满田。

38、春分刮大风，夏至雨。

39、春季雨丰不歉，冬有大雪多面。

40、春分天暖花渐开，马驴牛羊要怀胎。

41、春分雨不歇，清明前后有好天。

42、春分前后，大麦豌豆。

43、春分不冷清明冷。

44、春分利大风，利到四月中。

45、春分天暖花渐开，牲畜配种莫懈怠。

46、春分前后怕春霜，一见春霜麦苗伤。

47、花开九不尽，果子没人问。

48、半年的锅头当年的炕，熏透的烟囱发苗壮。

49、好种出好苗，好苗多结桃。

50、春分节到不能让，地瓜母子快上炕。

51、种不正，苗不正，结个葫芦歪歪腚。

52、春分无雨划耕田。

53、春分麦起身，一刻值千金。

54、春分雨多，有利春播。

春分天气谚语

1、春分阴雨天，春季雨不歇。

2、春分降雪春播寒。

3、春分前冷，春分后暖;春分前暖，春分后冷。

4、春分刮大风，夏至雨。

5、春分有雨到清明，清明下雨无路行。

6、春分麦起身，一刻值千金。

7、春分刮大风，刮到四月中。

8、春分前好布田，春分后好种豆。

9、春分不种麦，别怨收成坏。

10、要想庄稼长得凶，一家一个沤粪坑。

11、春分至，把树接;园树佬，没空歇。

12、春分春分，百草返青。

13、要想出好苗，棉籽粒粒挑。

14、春分栽不妥，再栽难成活。

15、春分有雨是丰年。

16、新土填得多，大长胡萝卜。

17、惊蛰蛾子春分蚕。

18、吃了春分饭，一天长一线。

19、晒棉种，很重要：发芽势，明显好;发芽率，能提高。

20、春分种芍药，到老不开花。

21、春分麦，芒种糜，小满种谷正合适。

22、春分南风，先雨后旱。

23、春分有雨家家忙，先种瓜豆后插秧。

24、春分分芍药，到老花不开;秋分分芍药，花儿开不败。

25、若要庄稼壮，一年一换炕。

26、春分日，植树木。

27、好种出好苗，好苗多结桃。

28、春分，日螟封分。

29、填平坑湾，先种黍穇。

30、春分到清明，棉花干播种。

31、春分前后，大麦豌豆。

32、春分不上炕，谷雨插不上。

33、有钱买种，无钱买苗。

34、春分早报西南风，台风虫害有一宗。

35、春分降雪春播寒。春分有雨是丰年。

36、花开九不尽，果子没人问。

37、春分时节，果树嫁接。

38、追肥浇水跟松耪，三举配套麦苗壮。

39、春分秋分，昼夜平分。

40、花开九不尽，果价要跑人。

41、春分前后怕春霜，一见春霜麦苗伤。

42、麦到春分昼夜长。

43、好种出好苗，早发早结桃。

44、纺好线，用好棉，好种壮苗长满田。

45、春分不暖，秋分不凉。

46、春分早、谷雨迟，清明种薯正当时。

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篇（7）

Overexpression and purification of catalase-peroxidase katG from mycobacterium tuberculosis

【Abstract】Objective　To express and purify the catala se-peroxidase katG gene from mycobacterium tuberculosis. Methods　 Plasmid pET24b containing katG was transferred into com petent Escherichia coli and katG gene was overexpressed by the challenge of isopropylthio-β-D-glactoside(IPTG). The expression of katG protein was on e-step purified by Xpress systemTM. Furthermore， the catalase activity of katG protein was preliminarily detec ted. Results　The recombinant escherichia coli produced katG p rotein in large quantities， accounting for 17.7% of total cell protein. The mole cular mass of katG protein was estimated to be 80 000 by sodium dodecyl sulfate -polyacrylamide gradient gel electrophresis (SDS-PAGE). It was found that imidazole at the concentration of 350 mmol/L could elute the katG protein most efficiently and yield the final preparation at greater than 90% purity. Th e katG protein was preliminarily detected to have the activity of catalase. Conclusions　The stable katG overexpressing recombinant Escherichi a coli can be constructed by the plasmid pET24b containing katG gene. The reco mbinant strain can produce katG protein with catalase activity and the product o f which can be purified into higher activity.

【Key words】Mycobacterium tuberculosis; katG ; Gene expression; Protein purification

异烟肼(INH)是一种最经济有效的抗痨药，几乎所有的抗痨方案中均包括IN H。结核分支杆菌编码的katG基因的突变可致结核分支杆菌对INH 产生耐药性［1］。自1992年以来，对于katG基因变异或缺失造成分支杆菌对异烟肼 耐药的基因水平研究已较为深入［1，2］，有必要在蛋白水平对耐药机制进行进一步 研究。本研究将含有katG基因的pET24b-katG表达载体转化埃希大肠杆菌BL21(DE3)菌株 ，获得稳定的高表达菌株后进一步对表达产物进行了纯化，并对纯化产物进行了酶活性的初 步检测。

材料与方法

一、材料

(一) 质粒与菌株　表达质粒pET24b-katG与埃希大肠杆菌BL21(DE3)由复旦大学遗传学研究 所惠赠。

(二) 试剂　XpressTM蛋白纯化系统为美国Invitrogen公司产品；异丙基-β-D硫代 半乳糖苷(IPTG)为华美生物工程公司产品；其他主要生化试剂为美国Sigma公司产品或国内A R级产品。

二、方法

(一) 表达载体的转化与基因产物的表达　将表达质粒pET24b-katG转化用氯化钙处理法得 到的感受态大肠杆菌BL21(DE3)菌株，将菌株涂于含卡那霉素的LB平板上，30°C过夜培养。 挑取抗卡那霉素的菌株接种于20 ml的LB培养基(加入20%的葡萄糖0.2 ml，浓度50 mg/ml的 卡那霉素40 μl，浓度20 mg/ml的氯霉素34 μl)中，37°C，160 r/min振摇过夜。取3 ml过 夜培养物种入100 ml的LB培养基(含20%的葡萄糖1 ml，浓度10 mg/ml的卡那霉素400 μ l， 浓度20 mg/ml的氯霉素170 μl)中，37°C以160 r/min振摇，每20 min测定1次A60 0值，直至A600值到达0.4～0.5(勿超过0.5)。随后每100 ml LB培养基中 加入1 mol/L IPTG 400 μl，分别在加入IPTG后的第2、3、4、5、6 h收集菌液。将菌液在4 °C下，5 000 g，离心5 min，弃上清。将沉淀物以10 ml缓冲液(50 mmol/L Tris.Cl， pH 8 .0， 2 mmol/L EDTA， 0.1% Triton X-100)重新悬浮，加入溶菌酶(100 μg/ml)。在冰浴中以中等强度超 声破菌，每次10 s，共3次，破菌后，4°C， 离心5 min，收集上清液备用。

(二) 表达产物的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测　参照文献［3］ 进行。收集IPTG诱导后的菌液10 μl，与 加样液10 μl混合，100°C水浴，3 min后点样，25 mA恒流通电进行SDS-PAGE。电泳后以 考马斯亮蓝染色15 min，然后以脱色液脱色观察结果。

(三) 表达产物的纯化　采用Xpress TM蛋白纯化系统进行纯化。用无菌双蒸水悬 浮树 脂纯化柱3次。加入7 ml结合液(20 mmol/L磷酸钠，500 mmol/L氯化钠，pH 7.8)，以及经IP TG不同时间诱导后产量最高的破菌液上清5 ml，重新悬浮纯化柱。反复轻摇混合2 min。静 置10 min，吸弃上清，再加入破菌液上清5 ml重复以上步骤。以4 ml结合液重新悬浮纯 化柱 ，温和摇动混合2 min，静置沉淀，吸弃上清，共3次。再以冲洗缓冲液(20 mmol/L磷酸钠， 500 mmol/L氯化钠，pH 6.0)洗4次，分别以不同浓度的咪唑洗脱液(50、200、350、500 mmo l/L)各5 ml加入柱中，收集不同洗脱浓度的洗脱液。将洗脱液进行SDS-PAGE。将纯化后的 蛋白以85%的硫酸胺沉淀，离心后将沉淀物以无菌双蒸水溶解，4°C透析过夜。透析产物加 入甘油(40%)后贮藏于-80°C的环境下。

(四) 过氧化氢酶活性测定　对破菌液上清进行过氧化氢酶活性的初步测定。用磷酸盐(K2 HPO4+KH2PO4，0.1 mol/L)与NaCl(2 mol/L)的缓冲液配制10%的Tween 80溶液，取 5 ml 与30%的双氧水5 ml混合。分对照管与katG管，在katG管内加入不同容积的含pET-katG表达 质粒的菌株破菌上清(20、40、80、160 μl)，对照管 则加入含pET空载体的菌株破菌上清，10 min后观察气泡产生情况。如产生大量气泡则提示 酶活性较佳。

结

果

一、重组katG蛋白的诱导表达以及产物的鉴定分析

将含有katG基因的pET24b-katG表达质粒转化大肠杆菌，在IPTG诱导下表达，分别对不同诱 导时间的表达产物进行SDS-PAGE以及考马斯亮蓝染色，可在相对分子质量80 000处见一诱 导表达带 (图1)。比较不同诱导时间的表达产量可以发现，经诱导2 h后的表达产量已达到峰值。在其 后蛋白纯化中即可选取该诱导时间的产物。对此诱导表达带进行黑度密度自动扫描分析，此 处表达蛋白量约占总菌体蛋白量的17.7%。

二、重组katG基因表达产物的纯化结果

采用Xpress TM蛋白纯化系统进行纯化发现，分别以不同浓度的咪唑洗脱液(50、 200、350、500 mmol/L)洗脱纯化柱后，所收集的洗脱液再次进行SDS-PAGE分析。结果发现 ，以350 mmol/L咪唑洗脱后纯化的效率最高，通过SDS-PAGE黑度密度自动扫描分析可以发 现纯化率可达90%以上。

三、对katG基因表达产物的过氧化氢酶活性测定结果

在过氧化氢反应系统中加入不同容积的破菌上清(20、40、80、160、320 μl)，比较气泡产 生情况，发现加入含pET-katG表达质粒的菌株破菌上清的各管均有气泡产生，且均较对照 管为明显，而以加入量为160 μl与320 μl的反应管产生气泡最为显著。提示重组katG表达 产物具有过氧化氢酶活性。

讨

论

结核分支杆菌的katG在INH的抗结核作用机制中起着关键作用。研究表明INH实际上是一个 药物前体，需经结核分支杆菌过氧化氢酶-过氧化物酶活化后 才发挥抗结核作用，而katG则由katG基因所编码［4］。有研究 通过质粒将katG基因转移到INH耐药菌株胞内，可令其对INH重新恢复敏感性。而对结核分支 杆菌的临床耐异烟肼菌株进行katG基因分析亦发现该基因的缺失或突变是引起耐药的主要原 因［5］。然而对于katG如何活化INH以及katG发生变异后导致耐药的 确切机制仍然 不清，特别是近年来对于不同突变位点变异对药物敏感性的影响程度颇有争议［6］ ，因此在蛋白水平研究katG的作用环节与耐药机制，以及比较不同位点 基因突变对酶结构与活性的影响等方面进行研究可深入了解INH耐药的发生机制，进而可 能在蛋白水平找到消除耐药的途径。由于结核分支杆菌生长较缓，而且具有较强的传染性， 长期以来在提取结核分支杆菌蛋白进行研究的进展较缓。本研究通过基因重组的katG表达载 体转化到大肠杆菌后产生高表达的katG蛋白，相对分子质量约为80 000，表达量可占总菌体 蛋白的17.7%。表明该基因重组的菌株为katG的高表达菌株，对表达产物进行初步过氧化氢 酶活性研究验证了其酶活性。进一步对表达产物进行纯化后可提取到纯度超过90%的katG蛋 白。本研究为进一步研究katG蛋白、katG对异烟肼的活化机制以及为检测katG变异耐药菌株 奠定基础，并且对深入阐明INH的耐药产生机制与寻求消除耐药的方法有较大的意义。

参考文献

1，Rouse DA， Li Z， Bai GH， et al. Characterization of the KatG a nd inhA genes of isoniazid-resistant clinical isolates of Mycobacterium tuber culosis. Antimicrob agents Chemother， 1995， 39:2472-2477.

2，Zhang Y， Heym B， Allen B， et al. The catalase-peroxidase gene and isoniazid resistance of Mycobacterium tuberculosis. Nature， 1992， 358:591-593.

3，Sambrook J， Fritsch EF， Maniatis T，著. 分子克隆实验指南.金冬雁，黎孟枫，译. 第2版. 北京：科学出版社，1992.

篇（8）

RIZ1是功能性筛选能与视网膜母细胞瘤（RB）肿瘤抑制因子相结合的蛋白质时分离出来的基因。已发现由于不同启动子的作用，RIZ1可以表达两种蛋白产物，即氨基端含有PR结构域的全长产物RIZ1（1719个氨基酸），以及除缺少RIZ1氨基末端200个氨基酸（包含PR结构域）外其余序列与RIZ1完全相同的RIZ2［1］。研究表明，RIZ1而非RIZ2具有肿瘤抑制特性。一般来说，RIZ1定位于人染色体1p36，为多种不同类型人癌组织所缺失［2］。许多人类肿瘤，如肝癌、结肠癌、神经母细胞瘤、肺癌、黑素瘤、骨肉瘤的组织中出现RIZ1而非RIZ2表达沉默［35］。我们初步研究也发现，人乳腺癌组织中存在RIZ1 mRNA表达的改变［6］。人癌组织和细胞株中RIZ1错义失活性突变均出现在PR结构域内或其附近［7］。在乳腺癌细胞系、肝癌细胞系中由腺病毒介导的RIZ1表达可以造成细胞G2M期阻滞和（或）细胞凋亡［35］。更重要的是基因敲除鼠若无RIZ1表达而仅有RIZ2表达，则易发生胃癌和B细胞淋巴瘤［7］。通过以上研究可以确定PR结构域与肿瘤的发生有直接联系，因此，目前认为RIZ1抑制肿瘤的作用与其PR结构域有关。为了更好地研究RIZ1 PR结构域的功能与结构，我们采用基因工程技术合成并提纯了RIZ1氨基末端含PR结构域的200个氨基酸的融合蛋白，并初步探讨了其体外功能，现报道如下。

1 材料与方法

11 材料pRIZ1 RH质粒由本研究组保存；原核表达载体质粒pGEX6P3购自Amersham Biosciences公司，是一种融合蛋白表达载体，含一个可编码谷胱甘肽S转移酶(GST)的读码框架，其下游有多克隆位点，插入符合相应读码框架的外源基因片段，在IPTG的诱导下可表达出与GST相融合的蛋白质；大肠杆菌CM1061菌株（购自New England Biolabs）、大肠杆菌BL21（DE3）表达菌株（购自EMD Bioscienses）由本课题研究组保存；Pfu DNA聚合酶等PCR试剂购自Stratagene公司；PCR产物纯化试剂盒(QIAquick PCR Purification Kit)、大量质粒提取试剂盒(QIAGEN Plasmid Maxi Kit)为QIAGEN公司产品；限制性内切酶EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ购自Fermentas公司；T4 DNA连接酶购自New England BioLabs公司； Glutathione Agarose吸附柱购自Sigma公司；人组蛋白 H3购自upstate公司；AdenosylLMethionine，S［methyl3H］ 购自PerkinElmer公司；BioRad蛋白测定试剂盒购自BIORAD公司。

12 PCR引物的设计与合成目的基因为含PR结构区的PR200基因片段，位于RIZ1全基因序列的第1~600个核苷酸(nt1600)。通过GenBank检索RIZ1的cDNA序列，采用DNA Star软件设计PCR引物，上游引物（GSTPR200P1）序列为：5′ACCGAATTCCATGGAAGTGAGGCTTTTCCCTTC3′，含EcoRⅠ酶切位点及启始密码子；下游引物（GSTPR200P2）序列为：5′CTCCTCGAGTCATTATGCAGAG GTGAAATCTGGCT3′，含终止密码子及XhoⅠ酶切位点。引物由Invitrogen公司合成。

13 目的基因的PCR扩增以 pRIZ1 RH质粒为模板，以GSTPR200 P1、GSTPR200 P2为引物，采用Pfu DNA聚合酶PCR扩增目的基因。阴性对照以等量去离子水代替模板。其反应条件为：95℃ 13min 热启动；95℃ 30 s，55℃ 30 s，72℃ 60 s，30个循环；最后72℃延伸10min。取PCR产物5μl，DNA Marker 1μl，经2 % 琼脂糖凝胶电泳后，在紫外灯下观察结果。产物纯化后经ABI PRISMTM 310 型基因分析仪（PERKIN ELMER） 测序确认。

14 重组载体的构建

141 PCR反应产物的纯化 将以上PCR产物点样于2 %的琼脂糖凝胶进行电泳，使用PCR产物纯化试剂盒纯化回收，用20μl去离子水溶解，取1μl在2 %琼脂糖凝胶电泳上检查，纯化成功后－20℃贮存。

142 载体pGEX6P3的制备 将原核表达载体pGEX6P3转入大肠杆菌CM1061菌株。挑取单个菌落培养，用质粒提取试剂盒大量提取质粒DNA，溶解于50μl的去离子水中。－20℃贮存。

143 PR200－pGEX6P3原核重组表达载体的构建 将纯化后的PCR 产物和pGEX6P3表达载体同时分别用核酸内切酶EcoRⅠ与XhoⅠ双酶切， 并分别用PCR产物纯化试剂盒纯化，氯仿抽提法回收。在T4 DNA连接酶作用下，连接含PR 基因片段与表达载体获得了PR200－pGEX6P3重组质粒（5 498 bp）。

15 表达重组蛋白阳性克隆的检测与鉴定用PR200－pGEX6P3重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）表达菌株， 涂布含100mg・L-1 AMP 的LB琼脂平板，37℃恒温培养过夜，平板上长出较好菌落。挑取阳性菌落接种在10ml含青霉素抗性的LB 试管中，37℃剧烈振荡培养过夜。次日按1∶60的比例接种过夜，培养物于15ml含青霉素抗性的LB 试管中，于37℃剧烈振荡培养至OD600 nm为05～08，均分该培养物为两部分，一部分加入异丙基β硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度为1mmol・L-1以诱导GSTPR200表达，另一部分不加IPTG作对照，继续培养5 h，每隔1h两部分各取1ml 培养物离心后留沉淀细胞置-70℃冷冻过夜。采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS PAGE)法，检测与鉴定能够表达与GST融合的含PR结构区蛋白质(GSTPR200融合蛋白)的阳性菌落。

16 GSTPR200融合蛋白的提纯与质谱分析挑取GSTPR200融合蛋白表达阳性菌落接种在10ml含青霉素抗性的LB 试管中，37℃剧烈振荡培养过夜，次日按1∶60的比例接种于400ml含青霉素抗性的LB 培养瓶中，于37℃剧烈振荡培养至OD600 nm 为05～08，加入IPTG至终浓度为1mmol・L-1以诱导GSTPR200表达，继续培养40～50 h。离心收取细胞，置-70℃冷冻过夜。次日用5ml PBST重新悬浮细胞，于4℃温度下超声破碎细胞，利用Glutathione Agarose吸附柱提纯GSTPR200融合蛋白。通过WatersMicromass LCT质谱系统（Waters公司）分析该蛋白质的分子量。

17 纯化GSTPR200融合蛋白的组蛋白甲基化转移酶(HMT)活性测定

采用BioRad蛋白测定试剂盒检测纯化的GSTPR200融合蛋白浓度后，按组蛋白HMT测定法分析该蛋白质的活性［8］。反应体系如下：总容积为40μl，含20mmol・L-1 TrisHCl （pH 80），02 mol・L-1 NaCl，04 mmol・L-1 EDTA，1 mmol・L-1 DTT，4 μg 纯化的GSTPR200融合蛋白或GST蛋白（阴性对照），5μg组蛋白H3，3μl （165μCi）AdenosylLMethionine，S［methyl3H］。 各反应混合物于37℃孵育10～20 h 后，分别取5μl（各设3个测定样品，共取15μl）反应物在P81上点样、冲洗、晾干，采用LS 6000IC型液闪仪（BECKMAN公司）测定每分钟脉冲数（CPM）以说明蛋白质HMT活性度。

2 结果

21 PCR扩增的目的基因PCR扩增产物长度为625 bp，其中目的基因为600 bp，引入扩增产物两端的限制性内切酶识别位点序列、启始密码子与终止密码子识别位点序列及保护碱基长25 bp。同DNA相对分子质量参照物相比，PCR扩增产物的大小与预测的结果一致（图1）。

图1 PCR 扩增PR200的结果(2 %琼脂糖电泳)（略）

Fig 1 Amplification of PR200 with PCR (2 % agarose gel)

1 DNA ladder；2 Negative control；3 PCR product

22 检出的表达重组蛋白阳性克隆经SDSPAGE蛋白电泳，考马斯亮蓝R250染色观察，包含重组质粒的诱导菌在相对分子质量47 000位置出现一蛋白条带，而未诱导的重组质粒转化菌在相应位置的蛋白条带要弱得多；含质粒pGEX6P3的诱导菌在相对分子质量27 000位置出现一条带。目的基因表达的多肽相对分子质量为19700，与融合蛋白共同表达相对分子质量约为47 000，与理论估计值相一致。见图2。

图2 IPTG诱导转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株表达的SDSPAGE 结果（略）

Fig 2 SDS PAGE showing the IPTGinduced expression of the transformed Ecoli BL21（DE3）cells

1标准蛋白质；2未诱导的转化pGEX6P3的BL21细胞；3诱导后的转化pGEX6P3的BL21细胞；4、6、8分别为未诱导的三个菌落的转化PR200－pGEX6P3 BL21细胞；5、7、9分别为诱导后的三个菌落的转化PR200－pGEX6P3 BL21细胞。 每泳道加样量约15μg， 12 % 胶。

1 Standard proteins; 2 Uninduced BL21 cells of pGEX6P3 transformed clone; 3 Induced BL21 cells of pGEX6P3 transformed clone; 4，6，8 Uninduced PR200pGEX6P3 transformed BL21 cells of three clones，respectively; 5，7，9 Induced PR200pGEX6P3 transformed BL21 cells of three clones， respectively 15μg per lane， 12 % gel

23 GSTPR200融合蛋白的纯化与质谱分析通过Glutathione Agarose吸附柱提纯的GSTPR200融合蛋白经SDSPAGE蛋白电泳，考马斯亮蓝R250染色，在相对分子质量47 000位置呈现单一的蛋白条带（图3）。质谱分析可见46980 处出现单一峰，进一步明确了该纯化融合蛋白质与预期的分子质量一致（图4）。

图3 GSTPR200融合蛋白纯化的SDSPAGE 结果（略）

Fig 3 SDSPAGE showing the purification of GSTPR200

1：标准蛋白质；2：诱导后细胞破碎液；3：通过柱子后的细胞破碎液；4：洗柱液； 5，6：蛋白洗脱液。 每泳道加样量约15μg， 12 % 胶。

1 Standard proteins；2 Induced lysate；3 Through flow；4 Washing flow；5，6 Elutions 15μg per lane， 12 % gel

图4 纯化GSTPR200融合蛋白质谱分析结果（略）

Fig4 Mass spectrometry analysis of the purified GSTPR200

24 GSTPR200融合蛋白对组蛋白甲基化作用采用HMT测定法可见，GSTPR200融合蛋白组CPM（孵育1、2 h后的3个样本CPM均值分别为817±58、1192±83）明显高于对照组（GST蛋白质组，分别为135±12、184±21）， 两者差异具有高度显著性（P

3 讨论

PR结构域是肿瘤抑制因子RIZ1的功能区域，本研究为了原核表达与纯化含该结构域的融合蛋白质（GSTPR200融合蛋白），选用了pGEX6P3载体。该载体具有GST 融合特征，可利用此标签进行纯化。采用大肠杆菌BL21（DE3）表达菌的优点在于该菌T7 RNA聚合酶基因可受IPTG诱导表达，而且该菌没有膜结合性蛋白分解酶活性，可抑制表达的融合蛋白质分解。本研究通过将重组载体PR200－pGEX6P3转入BL21（DE3）表达菌，成功地构建了GSTPR200融合蛋白的原核表达系统，并提纯了该融合蛋白质。研究发现PR结域能够使组蛋白H3中的第9赖氨酸甲基化，而人癌组织因PR结构域基因突变造成RIZ1甲基转移酶活性降低［89］。本研究为了了解所获得的GSTPR200融合蛋白是否具有甲基化活性，采用HMT测定法对提纯的融合蛋白质进行了检测。由于组蛋白H3与甲基在HMT的作用下可形成甲基化组蛋白H3，根据这一原理以3H标记甲基（［3H］methyl），将其与组蛋白H3及受检测的蛋白一起反应，通过测定CPM可反映形成的甲基化组蛋白H3的量，以说明该蛋白的HMT活性。本研究中纯化的GSTPR200融合蛋白组CPM比对照组（GST蛋白质组）明显增高，表明得到的融合蛋白质中PR部分具有HMT活性。本研究纯化蛋白的大量获取为进一步研究RIZ1 PR区域的结构与功能奠定了基础。

［参考文献］

［1］HUANG S Histone methyltransferases， diet nutrients and tumour suppressors［J］. Nature Reviews Cancer， 2002， 2(6):469476

［2］WEITH A， BRODEUR G M， BRUNS G A， et al Report of the second international workshop on human chromosome 1 mapping 1995［J］. Cytogenetics Cell Genetics， 1996， 72(23):114144

［3］HE L， YU J X， LIU L M， et al RIZ1， but not the alternative RIZ2 product of the same gene， is underexpressed in breast cancer， and forced RIZ1 expression causes G2M cell cycle arrest and/or apoptosis［J］. Cancer Res，1998， 58(19): 42384244

［4］JIANG G L， LIU L M， BUYSE I M， et al Decreased RIZ1 expression but not RIZ2 in hepatoma and suppression of hepatoma tumorigenicity by RIZ1［J］. Int J Cancer， 1999， 83(4):541547

［5］CHADWICK R B， JIANG G L， BENNINGTON G A， et al Candidate tumor suppressor RIZ is frequently involved in colorectal carcinogenesis［J］. Proc Natl Acad Sci USA， 2000， 97(6):26622667

［6］方娟娟，余卫平，樊祥山，等乳腺癌中RIZ1的表达及其临床意义初探［J］. 现代医学，2006，34(2):113115

篇（9）

[关键词]钛：微弧氧化：陶瓷氧化膜

[中图分类号]R783　[文献标识码]A　[文章编号]1008―6455(2007)01－0107―03

纯钛及钛合金具有良好的生物相容性和机械加工性能，为目前临床应用最广泛的口腔种植材料，但钛基种植体存在生物活性差，与骨结合强度低，愈合时间长及耐磨、耐腐蚀性差，在生理环境下易造成金属离子释放等问题，因此为了获得更优的纯钛种植体，需通过对钛进行表面改性来解决。

在众多的表面改性方法中，微弧氧化是一项在金属表面原位生长氧化物陶瓷层的新技术，它可改变纯钛种植体表面氧化层的厚度、化学组成、晶相结构、表面微形貌、粗糙度等多种特性，将此法用于纯钛表面改性，可形成粗糙多孔、耐腐蚀、含有不同比例元素的活性氧化层，这种结构有利于提高种植体表面的生物活性，改善其耐腐蚀性，而最新的研究发现向电解液中加入Ca、P、Si、Mg等成分后所制成的TiO2涂层，可促进种植体与骨之间的早期结合，提高种植体成功率，其中尤以Ca、Mg的效果最为显著。因此，本实验拟采用分别含Ca、Mg等元素的不同配方的电解液，利用微弧氧化工艺，对纯钛表面进行生物改性。

1　材料与方法

1．1材料：TA2纯钛(西北有色金属研究院)：乙酸钙、乙酸镁(国产分析纯)：β－甘油磷酸钠(Sigma公司分析纯，美国)。

1．2方法：①试件制备及预处理：／A2纯钛板经线切割加工成(10×10×3)mm3试件，以280＃、500＃、800＃水砂纸逐级打磨，丙酮、无水乙醇、蒸馏水超声清洗后干燥备用：②试件分组：MAO-1组和MAO-2组：③电解液配制：MAO―1组按一定的钙、磷离子浓度将乙酸钙、β－GP溶于去离子水中配制成电解液1：MAO-2组按一定的Mg离子浓度将乙酸镁溶于去离子水中配制成电解液2；④试件微弧氧化处理：以钛试件为阳极，不锈钢电解槽为阴极，分别在电解液1和电解液2中采用脉冲一直流电源对钛试件进行微弧氧化处理，并控制电解液温度在40℃以下，MAO－1组电压设定为450V，频率900Hz，占空比5％，处理时间5mim MAO-2组电压设定为450V，频率600Hz，占空比10％，处理时间5min；⑤试件分析：以扫描电镜(SEM)观察膜层的表面形貌，X射线衍射(XRD)和X射线能谱(EDX)分析膜层的成分和元素分布。

2　结果

2．1膜层的表面形貌特点：微弧氧化处理中试件表面可见无数个微小、明亮、游动的电弧光，处理后的两组纯钛试件均表面平整，形成了一层均匀的呈灰白色的陶瓷膜层，经涡流测厚仪测得MAO-1组膜层厚度约为6μm，MAO-2组膜层厚度约为5μm。表面的扫描电镜示两组表面均粗糙多孔，呈现交织网状结构(如图1～2)。

2．2能谱分析：能谱分析见MAO―1组陶瓷膜由Ti，Ca，P，0 4种元素组成(如图3)；MAO-2组陶瓷膜由Ti、Mg、0 3种元素组成(如图4)。

2．3 X射线衍射分析：X射线衍射分析表明MAO-1组氧化膜由金红石型的TiO2、锐钛矿型TiO2和钙钛矿型CaTiO3组成(如图5)；MAO-2组氧化膜由金红石型的TiO2、锐钛矿型TiO2和镁钛矿型MgTiO3组成(如图6)。

3　讨论

目前，提高种植体与骨组织结合的主要方法包括：使种植体表面形貌粗糙，使其具备生物活性，种植体与骨组织间实现化学性结合，种植体在生理环境下耐腐蚀性等。为了提高这些特性，目前纯钛种植体的表面改性方法很多，按工艺原理主要分：①物理法(粗糙化法、等离子喷涂法、离子注入法等)；②化学法(处理法、溶胶凝胶法、H2O2，处理法等)：⑧电化学法(电化学沉积法、电泳沉积法、微弧氧化法等)。

其中物理法主要是改变纯钛种植体表面形貌和粗糙度，有利于成骨细胞的附着和骨组织生长，增加与骨组织间的机械性结合，但这种方法不能改变纯钛种植体表面的化学特性，不具备生物活性，种植体与骨组织间结合力不强；化学法则主要是在种植体表面附加生物玻璃、羟基磷灰石等生物活性涂层，利用这些活性涂层来促进种植体与骨组织的早期结合，但这些涂层大多与种植体间结合力不强，在机体生理环境下耐腐蚀能力差，涂层易分层、降解甚至剥落，长期效果不佳。因而这些方法还存在一些缺点，不能完全满足临床上的需求。

微弧氧化技术，可很好的解决以上的问题，它是近年来在阳极氧化基础上建立起来的一项在有色金属表面原位生长陶瓷膜的新技术，它在工作中使用较高电压，期间发生了热化学、等离子体化学和电化学等多种反应。微弧氧化时微弧区瞬间高烧结作用可直接把钛基体金属氧化烧结成TiO2陶瓷膜，该层膜粗糙多孔，并且为金属表面原位生长，厚度均匀，与基体间结合牢固，且内层极其致密，极大提高了钛金属的耐腐蚀耐磨能力。

近年来研究表明钛种植体表面粗糙度的增加可以增强磷酸钙盐的沉积，提高成骨细胞造蛋白质和摄取钙离子的能力，多孔粗糙的钛表面有利于人成骨细胞的附着、增殖分化和功能表达，增强种植体与骨组织间结合力。本实验扫描电镜结果可见不同电解液处理的两组试件表面均粗糙多孔，呈现交织网状结构，为将来骨细胞附着和骨组织生长提供了较理想的材料表面形貌。

微弧氧化过程中电解质离子由于参与了微弧区的物理化学反应，因而也通过高温扩散到了氧化膜中。因此，通过调整电解液成分，可以方便地改变氧化层的化学组成，使氧化层内含有提高骨组织结合所需的活性元素，从而实现种植体与骨组织间的化学性结合。最新的研究表明当TiO2涂层中含有一

定量的Ca、P、Mg成分，钛种植体与骨组织间结合会显著增加。本实验通过电解液成分的改变和电参数的控制，使溶液中的Ca、P、Mg元素分别进入氧化层中。能谱证实MAO-1组氧化膜由Ti、Ca、P、0 4种元素组成；MAO-2组氧化膜由Ti、Mg、0 3种元素组成，其中Ti为基体成分，0为氧化过程中产生，而Ca、P、Mg的大量存在则充分说明了微弧氧化中伴随着沉积过程，电解液中的离子进入并参与了氧化膜的形成，从而在钛表面形成了含有不同比例元素的活性氧化层，有利于将来种植体与骨组织间结合。

XRD分析表明MAO-1组和MAO一2组氧化膜均由金红石型的TiO2、锐钛矿型TiO2组成，不同之处在于MAO-1组还含有钙钛矿型CaTiO3，而MAO-2组氧化膜还含有镁钛矿型MgTiO3。金红石型和锐钛矿型TiO2表明氧化膜为致密的陶瓷层结构，并且有研究显示TiO2的生物相容性高于纯钛，尤其是锐钛矿型TiO2已被证实有诱导骨样磷灰石形成功能，具有一定生物活性。钙钛矿型CaTiO3和镁钛矿型MgTiO3衍射峰的存在则说明在微弧氧化过程中由于复杂的化学反应使电解液中的Ca和Mg成分进入到氧化层中，并形成了一定的晶相结构，且含量较高。韩国和瑞典的学者报道了含CaTiO3、MgTiO2的TiO2涂层，在模拟体液中可诱导出骨样磷灰石。因此，可说明MAO―1组和MAO-2组氧化膜均具有一定的生物活性。

4　结论

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中图分类号：Q786 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）05-1189-02

目前，对于抗菌肽分子在先天免疫系统中发挥作用的机理还不是十分清楚，根据目前的研究结果来看，抗菌肽分子在发挥抑菌功能的过程中主要存在两种模式，一种是直接与细菌作用将其瓦解，另一种是发挥蛋白酶活性抑制剂作用来将细菌除掉[1]。本研究以凡纳对虾（Litopenaeus vannamei）重组Lv-SWD蛋白作为研究对象，通过蛋白质表达纯化以及多克隆抗体的制备，利用细菌结合试验来研究Lv-SWD的细菌结合作用，进一步丰富无脊椎动物先天免疫系统关于抗菌肽的基本理论。

1 材料与方法

1.1 材料

表达菌株是含有pET-28a-Lv-SWD重组子的大肠杆菌表达菌株。细菌结合试验的目标菌株分别是2种革兰氏阳性细菌（金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、巨大芽孢杆菌Bacillus subtilis）和2种革兰氏阴性细菌（绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa和弧菌Vibrio）。制备多克隆抗体需要的家兔为包头市花苑小动物市场购买的普通长耳白兔。

1.2 方法

1.2.1 目的蛋白的表达纯化 对构建的重组Lv-SWD蛋白的重组表达菌株进行IPTG诱导表达，离心收集菌体进行超声波破碎，并且通过蛋白质电泳试验分析破碎后的上清液与包涵体沉淀中目的蛋白质的存在情况。对于存在于破碎后上清液中的目的蛋白质，可以直接利用His-tag镍柱进行亲和纯化；对于存在于包涵体中的目的蛋白质，要进行变性后的透析处理，才能进行亲和纯化[2]。

1.2.2 多克隆抗体的制备与检测 将亲和纯化后的目的重组蛋白质进行SDS-PAGE试验，检测蛋白质的纯度，利用Bradford法检测目的重组蛋白的浓度；之后将目的蛋白质作为抗原免疫家兔，进行多克隆抗体的制备；家兔免疫共需要4～5次，每次注射间隔7～10 d，并且按照皮下多点注射的原则每次至少注射200 ？滋g重组蛋白。首次免疫将蛋白质抗原与弗氏完全佐剂按1∶1（V∶V，下同）进行充分混合后注射，第二、第三次注射与弗氏不完全佐剂进行充分混合后注射，从第四次免疫开始直接注射蛋白质溶液[3]。利用Western Blot方法进行多克隆抗体的检测。

1.2.3 重组蛋白质的细菌结合试验 将进行细菌结合试验的目的细菌菌株进行过夜培养，第二天低速离心收集细菌菌体，用500 ？滋L 1×PBS缓冲液悬起，加入经过1×PBS缓冲液透析的500 ？滋L目的蛋白质溶液（1 mg/mL），室温条件下摇床孵育1 h；低速离心后用500 ？滋L 1×PBS缓冲液洗涤5次。之后用7% SDS溶液200 ？滋L孵育菌体，沉淀10 min，离心后收集最后的菌体沉淀和7%的SDS洗脱液。将第五次的1×PBS洗脱液、7%的SDS洗脱液、最后的菌体沉淀作为样品进行SDS-PAGE，转膜后利用Western Blot方法检测结合试验的效果，使用的抗体是重组Lv-SWD蛋白制备的多克隆抗体[4]。

2 结果与分析

2.1 重组Lv-SWD蛋白的纯化与多克隆抗体的检测结果

大肠杆菌表达菌株经过IPTG诱导能够正确表达重组Lv-SWD蛋白，理论分子量为12.9 ku，由图1可见，纯化后蛋白条带的大小接近14.3 ku，说明重组蛋白的大小与理论预测值相符。Western Blot分析结果（图1）表明，重组Lv-SWD蛋白刺激家兔产生的多克隆抗体能够较好的识别蛋白质本身。

2.2 细菌结合试验结果

细菌结合试验结果（图2）表明，利用重组Lv-SWD蛋白制备的多克隆抗体识别醋酸纤维素薄膜后，4种细菌的菌体沉淀处都有明显的条带出现，说明巨大芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌以及弧菌都能较好的结合重组Lv-SWD蛋白。

3 小结与讨论

目前，对于抗菌肽分子的研究比较深入，尤其是在甲壳类动物中的研究成果较多。在中国明对虾、淡水小龙虾、克氏原鳌虾、南美白对虾、斑节对虾等动物中分别发现了甲壳肽、溶菌酶、抗脂多糖因子、对虾素等免疫效应分子[5]，这些分子多数具有一定的先天免疫相关功能，包括抗菌活性、结合细菌活性、蛋白酶活性抑制作用等。通过研究这些分子的结构特征发现，一般情况下无脊椎动物先天免疫相关的抗菌肽分子具有广泛的多样性，包括结构多样性与功能多样性[6]。在结构方面，抗菌肽分子一般都包括一个典型的结构域，例如WAP结构域、对虾素结构域、溶菌酶结构域，这些结构域的最重要特点就是具有成对出现的半胱氨酸残基，数目一般在8个以上[7]。

为了进一步研究抗菌肽分子的结构与功能之间的联系，本研究选择了凡纳对虾的SWD分子进行了系统研究。凡纳对虾的SWD分子中存在一个单独的WAP结构域，这个结构域主要由8个半胱氨酸残基组成。通过结构预测发现，这8个半胱氨酸残基可以形成4对二硫键，本研究在整个分子中形成一个球状的实体结构和一个疏水的空穴。通过大肠杆菌原核表达，利用重组蛋白作为抗原，制备了多克隆抗体。从而对分子的细菌结合功能进行了研究，结合此前进行的蛋白酶活性抑制试验，笔者发现重组的Lv-SWD蛋白具有抑制分泌型蛋白酶活性的作用，也存在直接结合细菌的功能，因此，推测在先天免疫系统中，Lv-SWD蛋白是一个重要的免疫效应分子，在对抗细菌的入侵过程中应该发挥着重要的功能。

参考文献：

[1] DU Z Q，REN Q，ZHAO X F，et al.A double WAP domain （DWD）-containing protein with proteinase inhibitory activity in Chinese white shrimp， Fenneropenaeus chinensis[J]. Comparative Biochemistry and Physiology B： Biochemistry and Molecular Biology，2009，154（2）：203-210.

[2] DU Z Q，LI X C，WANG Z H，et al.A single WAP domain （SWD）-containing protein with antipathogenic relevance in red swamp crayfish， Procambarus clarkii[J]. Fish & Shellfish Immunology，2010，28（1）：134-142.

[3] SUN C，DU X J， XU W T，et al. Molecular cloning and characterization of three crustins from the Chinese white shrimp， Fenneropenaeus chinensis[J]. Fish & Shellfish Immunology，2010， 28（4）：517-524.

[4] LI X C，DU Z Q，LAN J F，et al. A novel pathogen-binding gC1qR homolog， FcgC1qR， in the Chinese white shrimp， Fenneropenaeus chinensis[J]. Dev Comp Immunol，2012，36（2）：400-407.

篇（11）

脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)是指脑卒中后出现的以情绪低落、兴趣减退、失眠多梦等为主要临床表现的一种疾病,该病的患病率占脑卒中患者的25%-79%。作为心理性应激源,抑郁情绪通过作用于下丘脑―垂体―肾上腺轴,影响机体内腺体功能,产生相应内分泌改变。本研究通过检测PSD患者汉密尔顿抑郁量表及血清皮质醇(eortisol,Corl水平,探讨智三针结合五行音乐对PSD患者神经内分泌系统的影响。

1　临床资料

1.1　一般资料本研究共筛选出60名符合纳入标准的PSD患者,来源于广东省第二中医院康复科2008年3月至2010年5月间住院病例。在获取知情同意后,按照就诊顺序编号,查阅SAS8.0软件产生的随机数字表,分配到对照组和治疗组。其中对照组29例,男16例,女13例,年龄42-78岁,平均年龄62.5,病程3-14个月,平均7.3月。治疗组31例,男19例,女12例,年龄40-81岁,平均年龄64.1,病程2-16个月,平均7.9月。经t检验,两组患者年龄、性别、病程方面没有显著性差异。

1.2　纳入标准及排除标准

1.2.1　纳入标准:f1)符合CCMD-3抑郁症的诊断标准;(2)诊断工具采用汉密尔顿抑郁量表[3](HAMD)24项计分,总分20分为轻,中度抑郁,>35分为严重抑郁;(3)愿意受试并能合作的患者,均可纳入。

1.2.2　排除标准:(1)器质性精神障碍或精神活性物质和非成瘾物质所致抑郁,重度抑郁症有严重自杀倾向者;(2)患者在进行测评前2周内接受过任何形式抗抑郁治疗的;(3)合并有心脑血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病者;(4)凡不符合纳入标准,未按规定治疗。无法判定疗效或资料不全等影响疗效者。

2　方法

2.1　治疗方法对照组:口服氟西汀胶囊20mg,每日一次,连续服用8周。

治疗组:接受智三针结合五行音乐治疗。智三针治疗选穴主穴:神庭、本神(双侧),辅穴:合谷(双)、太冲(双)、内关(双)。操作方法:上主穴,选用环球牌无菌针灸针(0.3×40mm),直刺25mm,得气后不做手法,留针60分钟。以上辅穴,每日选取一个,器械及操作同上,留针20分钟。针刺治疗连续治疗6天,休息1天,共治疗8周。五行音乐治疗采用聆听方式进行,每天上午下午定时收听音响设备外放音乐1次,每次30min音量控制在60分贝以下,以患者舒适不觉刺耳为度。医生根据患者临床症状,运用中医辨证理论,根据病情累及的脏腑,分别选用角(肝)、徵(心)、宫(脾)、商(肺)、羽(肾)5套治疗音乐进行聆听,五行音乐CD由广东珠江音像出版社出版,收听前向患者讲述音乐所表达的思想感情,连续治疗8周。

角调(肝):欢乐歌、三六、云庆、行街、中花六板、花三六、四合如意。

微调(心):花好月圆、平湖秋月、月牙五更、十面埋伏、金蛇狂舞、寒鸦戏水。

宫调(脾):彩云追月、渔舟唱晚、汉宫秋月、姑苏行、雨打芭蕉。

商调(肺):夕阳箫鼓、昭君怨、蕉窗夜雨、翠湖春晓、柳青娘。

羽调(肾):紫竹调、江河水、到春来、平沙落雁、木棉花开、流水行云。

2.2　观察指标

2.2.1　24项汉密尔顿抑郁量表fHAMD)评定:在未接受抗抑郁治疗前,对所有人组患者进行评定。工作由2名专人负责进行,要求其未参与病人的诊治工作。治疗8周后,对患者进行二次评定。

2.2.2　血浆皮质醇的采集与检测:治疗组和对照组均于治疗前及治疗8周后,空腹抽静脉血5mL置于EDTA抗凝管中,在4℃条件下、13000r/min离心30min,吸取上清液,-70℃条件下保存待测。血浆皮质醇测定采用双抗体夹心放射免疫法,由GC-1200R放射免疫计数仪(中国科学技术大学中佳光电仪器公司)检测,实验步骤严格按照试剂盒(天津九鼎医学生物工程有限公司)说明书操作。2.3统计分析方法本文计量数据用(x±s)表示,进行正态分布检验后,采用SPSSIO.O软件做t检验。

3　结果

3.1　汉密尔顿量表评定比较治疗前两组患者HAMD评定差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性;治疗8周后评分同治疗前比较明显降低,均有显著性差异(PO.05)。结果见表1。

3.2　血浆皮质醇水平检测比较两组患者治疗前血浆皮质醇含量无统计学差异(P>0.05),具有可比性;治疗8周后同治疗前比较血浆皮质醇含量明显下降,具有显著性差异(PO.05)。结果见表2。